Neutral protease which was obtained from a genus of Aspergilli as the crystal form were investigated for their purification and properties. The results of biochemical and enzymatic studies for their purification and properties in this enzyme were as follows. 1) On the wheat media containing 70%-water and $CaCo_{3}$, Aspergilus oryzae S.H.W. 131 is satisfactorily grown under the basic optimum conditions temperature $27^{\circ}C$- $30^{\circ}C$at relative humidity 100% for three days. 2) The enzyme solution extracted with water is successively purified through the passing on column of Asmti-177N for decolorization of it. And ion exchanger such as DEAAE Sphadex A-50 or Shepadex G-100 and fraction collector is necessary for the sepearte treatments of this enzyme. After washing it with organic solvents as aceton-EtOH, etc., it should be dried on the vacuum dryer at $40^{\circ}C$) The protease activity is determined by the amounts of amino acids, tyrosine. 4) The optimum pH of neutral protease is 6.0-8.0. 5) In effectively decomposing with this neutral protease, the optimum temperature is $35^{\circ}C$. 6) It is interesting that the amounts of metal ion affects the activity of neutral protease. For examples, if it were treated with manganic ion, its activity would be more effective than any other that.
Young Ik Lee;Ahtesham Hussain;Md Aziz Abdur Rahman;Ho Yong Sohn;Hye Jung Yoon;Jin Sook Cho
Journal of Life Science
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v.33
no.11
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pp.923-935
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2023
Rubus crataegifolius (RC), Ulmus macrocarpa (UM), and Gardenia jasminoides (GJ) are well-known folk medicines in Asia used to treat various gastrointestinal disturbances. The present study evaluated the gastroprotective effect of LS-RUG-com, a mixture of commercially prepared powders of RC, UM, and GJ with a ratio of 3:1:2(w/w/w) against HCl/ethanol-induced gastritis, indomethacin-induced ulcers, and esophageal reflux-induced esophageal mucosal damage and Helicobacter pylori infections. In addition, TNF-α and IL-1β expressions were also determined and measured in esophageal tissue. As to HCl/ethanol-induced gastritis, the LS-RUG-com treatment at a dose of 150 mg/kg showed a remarkable anti-gastritis effect. Regarding indomethacin-induced gastric ulcers, the LS-RUG-com treatment had a significant anti-gastric ulcer effect. Furthermore, in the gastroesophageal reflux disease (GERD) model experiment, the LS-RUG-com treatment resulted in the histological recovery of stomach damage and mucosal injuries. Furthermore, the LS-RUG-com treatment led to an increase in gastric content pH, an increase in mucus protection, and a decrease in gastric pepsin output with a significant decrease in TNF-α and IL-1β. As to the Helicobacter pylori infected animal model, LS-RUG-com had a notable inhibitory effect on Helicobacter growth. The use of RC, UM, or GJ in isolation or the LS-RUG-com treatment as whole had good effects in terms of anti-oxidation, anti-neutralization, gastric acid secretion inhibition, and anti-lipid peroxidation, which supported the use of natural products as systemic gastric protective agents. Our results suggest that the LS-RUG-com might be a significant systemic gastroprotective agent that could be utilized for the treatment and/or protection from gastric disturbances and related damage.
These studies examined the production of oligosaccharides by ${\beta}-galactosidase$originated from Aspergillus oryzae and Kluyveromyces fragilis mixed. In addition, heat resistance and acid stability of transgalactosylated oligosaccharides were measured. When ${\beta}-galactosidase$ from A. oryzae, K. fragilis and mixed ${\beta}-galactosidase$ were added to 30%(w/v) lactose solution, maximum production of transgalactosylated oligosaccharides were 26.9%, 37.05 and 27.2%, respectively. The ratios of disacchride, trisacchride and tetrasaccharide in transgalactosylated oligosaccharides were 20.5 : 5.4 : 0.6, 20.4 : 10.5 : 4.2 and 21.0 : 4.1 : 1.9, respectively. Nine different oligosaccharides were recovered with 30% and 40% ethanol fractions. When the 30% ethanol fraction was treated at $150^{\circ}C$ for 10 min more than 90% of oligosaccharides remained stable. More than 90% of the oligosaccharides were stable at $130^{\circ}C$ for 3 min with pH 3.0, whereas there of Kluyveromyces was more than 90% with pH 3.5.
Kun Hee Park;Joo-Hyun Hong;Seon-Hee Kim;Jin-Chul Kim;Ki Hyun Kim;Ki-Moon Park
Journal of Web Engineering
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v.14
no.17
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pp.3604-3622
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2022
The fruit of Hippophae rhamnoides has been widely used for medicinal purposes because of its anti-inflammatory, antioxidant, antiplatelet, and antimicrobial effects. Since there are no clear reports on the therapeutic efficacy of H. rhamnoides in osteoporosis, this study aimed to confirm the potential use of H. rhamnoides for the treatment of osteoporosis through its osteogenic differentiation-promoting effect in ovariectomized mice. Through an in vitro study, we compared the effects of the EtOH extract of H. rhamnoides fruits (EHRF) on the differentiation of C3H10T1/2, a mouse mesenchymal stem cell line, into osteoblasts based on alkaline phosphatase (ALP) staining and the relative expression of osteogenesis-related mRNAs. The EHRF significantly stimulated the differentiation of mesenchymal stem cells into osteoblasts and showed 7.5 times (* p < 0.05) higher osteogenesis than in the untreated control. A solvent fractionation process of EHRF showed that the hexane-soluble fraction (HRH) showed 10.4 times (** p < 0.01) higher osteogenesis than in the untreated control. Among the subfractions derived from the active HRH by preparative HPLC fractionation, HRHF4 showed 7.5 times (* p < 0.05) higher osteogenesis than in the untreated naïve cells, and HRH and HRHF4 fractions showed 22.6 times (*** p < 0.001) stronger osteogenesis activity than in the negative control. Osteoporosis was induced by excision of both ovaries in 9-week-old female ICR mice for in vivo analysis, and two active fractions, HRH and HRHF4, were administered orally for three months. During the oral administration period, body weight was measured weekly, and bone mineral density (BMD) and body fat density were measured simultaneously using a DEXA machine once a month. In particular, during the in vivo study, the average BMD of the ovariectomized group decreased by 0.0009 g/cm2, whereas the average BMD of the HRH intake group increased by 0.0033 g/cm2 (* p < 0.05) and that of the HRHF4 intake group increased by 0.0059 g/cm2 (** p < 0.01). The HRH and HRHF4 intake groups significantly recovered the mRNA and protein expression of osteogenic genes, including ALP, Osteopontin, Runx2, and Osterix, in the osteoporosis mouse tibia. These findings suggest that the active fractions of H. rhamnoides fruit significantly promoted osteoblast differentiation in mesenchymal stem cells and increased osteogenic gene expression, resulting in an improvement in bone mineral density in the osteoporosis mouse model. Taken together, H. rhamnoides fruits are promising candidates for the prevention and treatment of osteoporosis.
Pantothenate kinase (PanK) catalyzes the first step in the biosynthesis of the essential and ubiquitous cofactor coenzyme A (CoA) in all organisms. Here, we report the identification, cloning, and characterization of panK-sp from Streptomyces peucetius ATCC 27952. The gene encoded a protein of 332 amino acids with a calculated molecular mass of 36.8 kDa and high homology with PanK from S. avermitilis and S. coelicolor A3(2). To elucidate the putative function of PanK-sp, it was cloned into pET32a(+) to construct pPKSP32, and the PanK-sp was then expressed in E. coli BL21(DE3) as a His-tag fusion protein and purified by immobilized metal affinity chromatography. The enzyme assay of PanK-sp was carried out as a coupling assay. The gradual decrease in NADH concentration with time clearly indicated the phosphorylating activity of PanK-sp. Furthermore, the ca. 1.4-fold increase of DXR and the ca. 1.5-fold increase of actinorhodin by in vivo overexpression of panK-sp, constructed in pIBR25 under the control of a strong $ermE^*$ promoter, established its positive role in secondary metabolite production from S. peucetius and S. coelicolor, respectively.
This experiment was carried out to investigate the effect of several organic fertilizers on the growth and root yield of Liriope platyphylla was planted 30 cm ${\time}$ 10 cm in field from 1998 to 1999. Six treatments of organic fertilizers applied : N.P.K, NPKC (N,P,K+Compost), NPKCO (N.P.K+Compost+Oilcake),NPKCOF (N.P.K+Compost+Oilcake+Fowldropping), NPKCOFP (N.P.K+Compost+ Oilcake+Fowldropping+plant ash), CO (Compost+Oilcake), COF (Compost+Oilcake+fowldropping). Organic matter, available phosphate, and MgO are NaO of soil increased in all of plots with the addition of organic fertilizers. The leaf length, number of leaves and of tillers were increased by the use of organic fertilizers compared to N.P.K fertilizers compared with N.P.K fertilization. The number of tubers were increased by using the organic fertilization N.P.K fertilization and showed higher in the soil depth of 0${\sim}$20 cm. The dry root yield was showed higher in organic fertilizers than in N.P.K fertilizer and highest dry root yield resulted from NPKOF 39% and NPKCOFP 49%.
Kim, Il-Chool;Kim, Jung-Hyun;Lee, Yoon-Won;Kim, Young;Hur, Sang-Sun
Journal of the Korean Applied Science and Technology
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v.37
no.2
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pp.374-384
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2020
This study was carried out to investigate the food value of Dae Hong(Prunus mume Siebold et Zucc), and also to analyzed contents of general component, free sugar, organic acid, amino acid, mineral element, and vitamins. The carbohydrate of Dae Hog showed the highest content of 46.8±0.92%, followed by crude protein(18.9±0.01%), moisture content(11.8±0.13%), and crude fiber, crude fat, ash(5.7±0.94~6.7±0.52%). In case of free sugar contents, 5 types were found. Most of them were mannitol and fructose. 6 mineral contents were also found, too; K and P showed the highest level. The total phenol content was 615.99±0.52 mg/100 g. Including seven different type of essential amino acids, the total amino acid content of Dae Hong was 121.42 mg/g. These results point out the potential of Dae Hong as innovative food for health or to be incorporated in new products as natural food preservatives and supplements.
Kim, Joung-Hee;Kim, Jong Guk;Kim, Sun-Gun;Jeong, Seung-IL;Jang, Min-Jung;Kim, Kil-Soo;Kim, Keuk-Jun;Kwack, Seung-Jun
Journal of Life Science
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v.27
no.4
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pp.383-389
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2017
This study intends to analyze the contents of rutin, procyanidin B3, quercetin, kaempferol, known to have antioxidant, anti-inflammatory and anti-carcinogenic effects, among the polyphenol type contained in the grape pruning stem extracts (GPSE), utilizing grape stems being discarded after harvest, measure the effects on the skin moisture, inhibition of skin cell proliferation, anti-inflammatory on the damaged skin of a HR-1 mice induced with UVB, and verify the applicability as a material for functional food and functional cosmetics. The results of verifying the photoprotection effects through the skin proliferation control through of GPSE showed similar result to suncream was achieved at the GPSE concentration of 2,000 mg/kg on the epidermis (p<0.05). The results showed anti-inflammatory effects on all groups applied with GPSE as compared to the control group irradiated with UVB, but at the GPSE concentration of 1,000 mg/kg, a lower COX-2 protein expression at 8%, lower than the 22% of suncream, was observed to achieve an excellent anti-inflammatory effect (p<0.05). The results of this study confirmed the existence of active polyphenol type, such as rutin, kaempferol, querocetin and procyanidin B3, within the GPSE, and GPSE has improvement effects on moisturizing effects, skin proliferation control effect, inflammatory control effect and improvement effects on the skin barrier function through UV ray damage. GPSE is a functional ingredient with a potential for skin protection effects, and has high utilization as an ingredient for functional food and functional cosmetics.
Choi, Jang Sun;Lee, In Hye;Jung, Yu Jin;Kang, Kwon Kyoo
Journal of Plant Biotechnology
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v.43
no.2
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pp.231-239
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2016
To study the transcript levels of epigenetically regulated genes in tobacco, we have developed a transgenic line OX1 overexpressing NtROS2a gene encoding cytosine DNA demethylation and a RNAi plant line RNAi13. It has been reported that salt- and $H_2O_2$-stress tolerance of these transgenic lines are enhanced with various phenotypic characters (Lee et al. 2015). In this paper, we conducted microarray analysis with Agilent Tobacco 4 x 44K oligo chip by using overexpression line OX1, RNAi plant line RNAi 13, and wild type plant WT. Differentially expressed genes (DEGs) related to metabolism, nutrient supply, and various stressed were up-regulated by approximately 1.5- to 80- fold. DEGs related to co-enzymes, metabolism, and methylation functional genes were down-regulated by approximately 0.03- to 0.7- fold. qRT-PCR analysis showed that the transcript levels of several candidate genes in OX1 and RNAi lines were significantly (p < 0.05) higher than those in WT, such as genes encoding KH domain-containing protein, MADS-box protein, and Zinc phosphodiesterase ELAC protein. On the other hand, several genes such as those encoding pentatricopeptide (PPR) repeat-containing protein, histone deacetylase HDAC3 protein, and protein kinase were decreased by approximately 0.4- to 1.0- fold. This study showed that NtROS2a gene encoding DNA glycosylase related to demethylation could regulate adaptive response of tobacco at transcriptional level.
To compare the wear resistance of four kinds of commercial acrylic resin teeth [SR-Orthosit PosterioresR(Ivoclar Co., Liechtenstein), Endura PosteriorR(Shofu Inc. Japan), trubyte IPN teethR(Dentsply International Inc., York,), Trubyte BiotoneR(dentsply Inermational Inc. Brazil) by means of the toothbrush abrasion method, the artificial resin teeth were embedded in epoxy resin with the occlusal surfaces aligned in one plane for a total of 40 blocks. There after, each lock was mounted in the arm of the toothbrush abrasion machine(K 236, Japan). Wear measurements were made on the three preconditioned states. Those were as follows : no treatment specimens, thermocycled specimens, and thermocycled specimens which were immeresed applied load of 400g during the buring the brushing cycle. At the end of the 30,000-stroke cycle, each specimen was removed, and weighed. The microhardness of four kinds of commercial resin teeth were determined by means of microhardness tester. Microhardness tests were performed on te no treatment specimens, thermocycled specimens, and thermocycled specimens with immersion in the denture cleansing solution. Finally, the comparison of thermal properties were perfomed using differential scanning calorimeter(DSC-1500). The following results were obtained : 1. In the case of no treatment teeth, the wear amount of endura Posterior(EN) was the greatest among the others(p<0.01), and the wear amount of three kinds of artificial resin teeth was increased in the order of Trubyte IPN teeth(IN), Trubyte Biotone(BN), SR-Orthosit Posteriores(SN) but there was no statistic significance(p>0.01). 2. The wear amount of Trubyte IPN teeth(IT) and Trubyte Biotone(BT), was increased due to thermocycling effect, but that of Endura Posteriores(ET) was decreased conversely(p<0.01). 3. Except for the SR-Orthosit Posteriores(STC), the wear amount of three kinds of artificial resing teeth(that is, ETC, ITC, BTC) was increased due to denture cleansing solution$(Cledent^R)$, but there was no statistic significance(p>0.01). But the wear amount of the SR-Orthosit Posteriores(STC) was the greatest among the others(p<0.01). 4. The wear amount of toothbrush was the greatest in case of contact with occlusal surface of SROrthosit Posteriores resin teeth(p<0.01). 5. the microhardness values(KHN) of the SR-Orthosit Posteriores was the highest among the experimental artificial resin teeth(p<0.01). 6. There was no relationship between microhardness valuse(KHN) and wear amount of four kinds of experimental artificial resin teeth(p<0.01). 7. The differential canning calorimetric property of four kinds of artificial resin teeth did not show endothermal or exothermal peak in the range of $100^{\circ}C$
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[게시일 2004년 10월 1일]
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