간세포내 두가지 microsome효소인 HMG-CoA reductase와 cholesterol-$7{\alpha}$-hydroxylase는 콜레스테롤 합성과 담즙산으로의 분해의 조절효소임은 이미 알려진 사실이다. 본 실험에서는 콜레스테롤의 대사산물인 4종류 담즙산들이 간세포내의 콜레스테롤 합성 및 HMG-CoA reductase활성에 미치는 효과를 조사하였다. 간세포의 배양에서 간세포로의 담즙산 흡수는 배지내 농도(1mM~10mM)와 배양시간(1/2~3hr)의 차이에 따라 비례적으로 증가하였다. 콜레스테롤 합성저해에 대한 담즙산의 효과는 배지내 담즙산의 농도 및 배양시간에 따라 크게 감소하였다. 분리시킨 microsome내 HMG-CoA reductase의 활성에 대한 담즙산의 저해효과는 insulin 투여에 의하여 효소활성을 촉진시킨 경우에서도 뚜렷하였으며 콜레스테롤 합성 역시 저하되었다. 분리시킨 간세포막 내 $Na^+$,$K^+$-ATPase의 활성은 1.8~2.5mM정도의 배지내 담즙산 농도까지 증가함을 보였으나 cholic acid 흡수는 상기 효소의 활성에 거의 영향을 주지 않는 것으로 나타났다. 이러한 이유는 아직 불분명하나 1차 대사산물인 cholic acid의 흡수는 단순확산에 의한 것으로 사료되며 이에 대한 더 많은 연구가 요구된다.
Benzyl alcohol is known to have dual effect on the red blood cell shape change. At low concentration up to 50 mM benzyl alcohol transformed the shape from discocyte to stomatocyte by preferent binding to the inner hemileaflet, however, at higher concentratransformed the shape from discocyte to stomatocyte by preferential binding to the inner monolayer, however, at higher concentration above 50 mM benzyl alcohol transformed to echinocyte by affecting both monolayers. These results suggest that the effect of benzyl alcohol on the red blood cell shape and $Ca^{++}$ transport across cardiac cell membranes to assess the effects of the drug on the structures and functions of the biological cell membranes. The results are as follows: 1) Benzyl alcohol up to 40 mM caused progressive stomatocytic shap change of the red blood cell but above 50 mM benzyl alcohol caused echinocytic shape change. 2) Benzyl alcohol up to 40 mM inhibited both osmotic hemolysis and osmotic volume change of the red blood cell in hypotonic and hypertonic NaCl solutions, respectively. 3) Benzyl alcohol inhibited both Bowditch Staircase and Wood-worth Staircase phenomena at rat left auricle. 4) Benzyl alcohol at concentration of 5 mM increased $Ca^{++}-ATPase$ activity of red blood cell ghosts slightly but above S mM benzyl alcohol inhibited the $Ca^{++}-ATPase$ activity. 5) Benzyl alcohol at concentrations of 5 mM and 10 mM increased $Ca^{++}-ATPase$ activity slightly at rat gastrocnemius muscle S.R. but above 10 mM benzyl alcohol inhibited the $Ca^{++}-ATPase$ activity. Above results indicate that benzyl alcohol inhibit water permeability and $Ca^{++}$ transport across cell membranes in part via effects on the fluidity and transition temperatures of the bulk lipid by preferential intercalation into cytoplasmic monolayer and in part via other effect on the conformational change of active sites of the $Ca^{++}-ATPase$ molecule extended in cytoplasmic face.
Possibility whether lead ingestion can cause selective toxicity to central serotonergic nervous system in rats was tested. Three groups of wistar rats; 1)Control, 2) Low dose and 3) High dose groups, were prepared. In prenatally lead-exposed rats, until parturition from dams, rat pups were intoxicated via placenta of mother rats having received drinking water containing either 0%(control ), 0.05%(low dose) or 0.2%(high dose) of lead acetate respectively, In postnatally lead-exposed rats, right after parturition from dams rat pups received drinking water containing either 0% (control), 0.05%(low dose) or 0.2%(high dose) of lead acetate. At 2, 4, 6 and 8 weeks of age, tryptophan hydroxylase (TPH) activity and Na$\^$+//K$\^$+/-ATPase activity were measured in 4 areas of rat brain; Telencephalon, Diencephalon, Midbrain and Pons/Medulla. TPH activities were assayed by modified method of Beevers et al. (1983) using L-(5-$^3$H)-tryptophan as substrate. TPH activity was determined as a criterion of lead poisoning to central serotonergic nervous system and Na$\^$+//K$\^$+/-ATPase activity as a criterion of non specific lead poisoning to any kinds of tissues. Selective toxicity of lead poisoning to central serotonergic nervous system was evaluated by the changes of TPH activities without concomitant changes of Na$\^$+//K$\^$+/-ATPase activities. In prenatally lead-exposed rats. this selectivity was found in Telencephalon (2 weeks of age), Diencephalon/Midbrain (2 weeks of age), Midbrain (4 and 6 weeks of age), Pons/Medulla (2, 4 and 6 weeks of age) In rats exposed to low dose of lead and Pons/Medulla (2 weeks of age) to high dose of lead. In postnatal Iy lead-exposed rats, this selectivity was found in Telencephalon (8 weeks of age), Diencephalon(8 weeks of age), Pons/Medulla (6 and 8 weeks of age) in rats exposed to low dose of lead and Pons/Medulla (8 weeks of age) to high dose of lead. These results suggest that lead poisoning may exhibit selective toxicity to central serotonergic nervous system.
Neuronal growth regulator 1 (NEGR1) is a GPI-anchored membrane protein that is involved in neural cell adhesion and communication. Multiple genome wide association studies have found that NEGR1 is a generic risk factor for multiple human diseases, including obesity, autism, and depression. Recently, we reported that Negr1-/- mice showed a highly increased fat mass and affective behavior. In the present study, we identified Na/K-ATPase, beta1-subunit (ATP1B1) as an NEGR1 binding partner by yeast two-hybrid screening. NEGR1 and ATP1B1 were found to form a relatively stable complex in cells, at least partially co-localizing in membrane lipid rafts. We found that NEGR1 binds with ATP1B1 at its C-terminus, away from the binding site for the alpha subunit, and may contribute to intercellular interactions. Collectively, we report ATP1B1 as a novel NEGR1-interacting protein, which may help deciphering molecular networks underlying NEGR1-associated human diseases.
Kang, Min Sook;Yang, Hun Mo;Kang, Ja Young;Ryou, Sung Hee;Kang, Jung Sook
Nutrition Research and Practice
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제6권5호
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pp.414-420
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2012
Forty guinea pigs were divided into four groups and fed 0.04% cholesterol based control diet, plus 0.05% simvastatin, and statin plus 0.1% CoQ10 or 10% Ardisia Japonica Blume (AJB) leave powder for 4 weeks. Plasma total cholesterol levels decreased significantly in all groups fed the statin-containing diet compared with that in guinea pigs fed the control diet (P < 0.01). Plasma and liver triglycerides decreased significantly in the statin plus CoQ10 group compared with those in the control (both P < 0.05). Maximum platelet aggregation was significantly higher in the statin plus CoQ10 group than that in the other groups (P < 0.05). Na-K ATPase activity increased in the statin group and decreased in the statin plus CoQ10 group (P < 0.01). Na-K co-transport and Na passive transport decreased significantly in the control group compared with those in the other groups (both P < 0.05). Intracellular Na was highest in the statin group and lowest in the statin plus CoQ10 group and was correlated with Na-K ATPase activity. Thiobarbituric acid reactive substance production in platelet-rich plasma and liver tended to decrease in the statin plus CoQ10 group compared with those in the other groups. Plasma glutamic-pyruvic transaminase and glutamic-oxaloacetic transaminase increased significantly in the statin group compared with those in the control (P < 0.05). These result suggest that antioxidant rich AJB did not have positive effects on cardiovascular disease parameters. The statin plus CoQ10 seemed to decrease cholesterol more efficiently than that of statin alone.
흰쥐 부정소 정자의 성숙 전후에 일어나는 변화를 몇가지 효소를 중심으로 관찰하였고 그 성숙과정중에 일어나는 상피세포, 내강 및 정자 사이의 상호관계를 알아보기 위하여 실험군 별로 몇가지 효소의 활성도와 탄수화물 잔기의 함량을 측정하였으며, 전기영동을 이용하여 각 군의 차이를 관찰하고 이에 대한 웅성호르몬의 관련성을 알아보았다. 1. 부정소 두 정자와 부정소미 정자에서 활성도 측정시 lactate dehydrogenase, glucose-6-phosphatase 및 Na+ -K+ -ATPase의 경우는 유의한 차이가 없었으며, $Mg^2$+-ATPase의 경우만이 부정소미 정자가 부정소두 정자보다 유의성 있게 높은 활성도를 가지는 것으로 나타났다. 또한 부정소두와 부정소미 상피세포 , 내강 및 정자의 세군으로 나누어 각각 탄수화물 잔기를 정량하였을 때 hexosamine은 상피세포에서, sialic acid는 상피세포와 내강액에서 부정소미의 경우가 더 높은 함량이 존재하였으며, 내강액과 정자의 crude membrance fraction을 SDS-PAGE 했을 때 분자량이 33-37 KD 사이에 존재하던 band가 부정소미 내강액과 부정소미 정자의 crude membrance fraction에서 관찰되었으므로 흰쥐에서 정자의 성숙과정과 관련된 부정소내의 여러 변화를 비교하는 자료가 될 수 있었다. 2. 부정소 내강액에서 $\beta$ -glucuronidase와 $\beta$ -glucosidase의 활성도 및 웅성호르몬에 대한 의존성을 측정하였을 때 거세 후 5일째부터 이 두 효소의 활성도가 모두 유의하게 감소하기 시작하였고, tentosterone을 투여하였을 때는 $\beta$ -glucuronidase는 투여 5일, $\beta$ -glucosidase는 투여 10일 후부터 유의하게 증가하였으며 웅성호르몬에 대한 내강액의 의존성을 알아보기 위하여 SDS-PAGE하였을 때 tentosterone투여군의 부정소두에서 분자량이 약 21 KD에 해당하는 band를 새로이 관찰하였다.
According to the original documents, Sagungsan is considered as an effective drug for controlling the hypertensive epistaxis induced by tension of autonomic nerve and it's hyperfunction. The present experiment was designed to understand the effect of Sagungsan extract on the hemostatic action, intracranial pressure, blood pressure and cardiovascular system in experimental animals. And thus the bleeding time, prothrombin time, capillary dilation, blood pressure, Intracranial pressure, and enzymatic analysis of the ATPase activities were studied. The result obtained here were as followings: 1. Sagungsan water extract reduced the bleeding time in mouse, and prolonged the prothrombin time in rabbits. 2. The drug extract increased the tail volume by capillary dilation in rats. 3. The drug extract inhibited the increase of intracranial pressure and arterial blood pressure in rabbits. 4. At the early time, the increase of arterial blood pressure by the drug extract significantly inhibited by pretreated atropin and regitine in rabbits. 5. The drug extract relaxed the smooth muscle by stimulating the Mg2+-Ca2+-ATPase activities of gastric sarcoplasmic reticulum isolated from rabbit stomach. 6. The drug extract stimulated the heart contraction by inhibiting the $Mg^{2+}-Ca^{2+}-ATPase$ activities of cardiac sarcoplasmic reticulum isolated from rabbit heart. The inhibitory mechanism was reversible and noncompatitive. 7. The drug extract increased the hepatic blood volume by stimulating the hepatic total ATPase activities and hepatic metabolism. 8. The drug extract acted as a tranquilizer by inhibiting the neural Na+-K+-ATPase activity. According to the results, Sagungsan water extract dilated the capillaries, stimulated the heart beat, and thus increased the blood flow with decreasing the intracranial pressure and blood pressure. These effects stanches the epistaxis collectively.
It has been reported that the luteal function may be regulated by the intracellular $Ca^{++}$ level which may be adjusted partially by the high affinity $Ca^{++}-ATPase$ in luteal cell membranes. Then, one may expect that luteotropic and/or luteolytic agents, such as gonadotropins, prostaglandin $F_{2{\alpha}}\;(PGF_{2{\alpha}})$ and ouabain, affect the intracellular $Ca^{++}$ level. In this present study, therefore, we examined the effects of luteinizing hormone (LH, or human chorionic gonadotropin, hCG), $PGF_{2{\alpha}}$ and ouabain on the kinetic properties of the high affinity $Ca^{++}-ATPase$ in light membrane, heavy membrane, and microsomal fractions from the highly luteinized ovary. LH (or hCG) increased the affinity and the Vmax for $Ca^{++}$ both in light membrane and heavy membrane. $PGF_{2{\alpha}}$ increased the Vmax in light membrane and decreased the Km in heavy membrane for $Ca^{++}$ at low concentration $(5\;{\mu}g/ml)$. At higher concentration, however, $PGF_{2{\alpha}}$ oppositly affected on kinetic properties, that shown at low concentration. Ouabain, a potent inhibitor of $Na^+-K^+-ATPase$, increased the Km at high concentration $(10^{-4}\;M)$, however, decreased the Vmax for $Ca^{++}$ in light membrane at low concentration $(10^{-6}\;M)$. Also, ouabain increased the Km for $Ca^{++}$ in heavy membrane without changes in the Vmax at both concentrations. It seems that LH and low dose of $PGF_{2{\alpha}}$ increase the intracellular $Ca^{++}$ level and cause in activation of $Ca^{++}-ATPase$, however, higher dose of $PGF_{2{\alpha}}$ and ouabain inhibit directly $Ca^{++}-ATPase$ activity and result in increase in intracellular $Ca^{++}$ level. According to the above results, we suggest that luteotropic and/or luteolytic agents regulate the luteal progesterone $(P_4)$ production through two different pathways; one is cyclic adenosine monophosphate (cAMP)-dependent and another is $Ca^{++}-dependent$. Intracellula. $Ca^{++}$ level regulated by the high affinity $Ca^{++}-ATPase$ may affect both pathways in a time-dependent fashion. LH (or hCG) acts on the luteal $P_4$ production via both pathways. The initial step is $Ca^{++}$ dependent, and the late step is cAMP dependent. $PGF_{2{\alpha}}$ and ouabain increase the intracellular $Ca^{++}$ concentration so that basal luteal $P_4$ production is increased and LH-stimulated $P_4$ production is inhibited by the inhibiting LH-dependent adenylate cyclase activity.
본 연구에서는 노계 가슴육의 단백질 식품 소재로서 활용도를 높이기 위하여 초음파를 이용한 근원섬유 단백질의 수용화에 대하여 검토하였다. 근원섬유에 0.1-0.8 M NaCl, pH 6.0-8.0이 되도록 조절한 후 20 kHz에서 초음파 처리를 하였다. 그런 다음 이들의 용해도, SDS-PAGE, 점도, Ca- 및 Mg-ATPase 활성을 측정하였다. 각각의 처리 조건에서 용해도를 검토한 결과 초음파에 의해서 용해도는 증가하였으며 0.1 M NaCl, pH 8.0에서 약 90%를 나타내었다. 용해된 성분을 SDS-PAGE를 이용하여 검토한 결과 대부분 myosin heavy chain 및 actin에 상당하는 성분이 검출되었으며, 초음파에 의한 단백질의 분리는 근원 섬유 구조의 붕괴에 의한 것으로 사료되었다. 한편, 초음파에 의한 점도의 변화는 용해도가 높을수록 점도도 증가하였다. 그러나, Ca- 및 Mg-ATPase 활성은 초음파에 의해서 급격히 저하하였으며, 초음파에 의해서 분리되는 단백질은 대부분 변성이 진행된 상태인 것으로 사료되었다.
The Na$^{+}$-K$^{+}$ pump, a plasma membrane Na$^{+}$-K$^{+}$ ATPase is plays a key role in the regulation and maintenance of Na$^{+}$ and $K^{+}$ ion concentration gradients across cell membranes. This enzyme pumps three Na$^{+}$ out of and two $K^{+}$ into the cell against their electrochemical gradient by utilizing the energy derived from ATP. Therefore, the Na$^{+}$-K$^{+}$ pump generates a net outward electrical current.(omitted)ted)
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[게시일 2004년 10월 1일]
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