Phytochemical examination of the barks of Actinidia arguta led to the isolation of five flavonoids. Structures of compounds were elucidated as catechin (1), (-)-epicatechin (2), quercetin (3), $quercetin-3-O-{\beta}-D-glucopyranoside$ (4), $quercetin-3-O-{\beta}-D-galactopyranoside$ (5) by comparison with previously reported spectral evidences. To investigate the anti-oxidative effect and nitric oxide (NO) production inhibitory activity of these compounds, DPPH radical scavenging activity and nitric oxide production inhibitory activity in $IFN-{\gamma}$, LPS stimulated RAW 264.7 cell were examined. The $IC_{50}s$ were determinied as follows : $1\;$IC_{50}=26.61\;{\mu}g/ml$, $2\;IC_{50}=25.30\;{\mu}g/ml$, $3\;IC_{50}=20.41\;{\mu}g/ml$, $4\;IC_{50}=18.23\;{\mu}g/ml$ , $5\;IC_{50}=30.46\;{\mu}g/ml$, $6\;IC_{50}=28.0;{\mu}g/ml$, $7\;IC_{50}=27.24\;{\mu}/ml$. These NO production inhibitory effects were significantly different compared with the positive control, L-NMMA $(IC_{50}=20.77\;{\mu}g/ml)$, respectively. Compound $1\;(IC_{50}=6.19\;{\mu}g/ml)$, $2\;(IC_{50}=8.98\;{\mu}g/ml)$, $3\;(IC_{50}=7.30\;{\mu}g/ml)$ and $4\;(IC_{50}=7.64\;{\mu}g/ml)$ also showed potent antioxidative activities similar level to ascorbic acid $(IC_{50}=9.22\;{\mu}g/ml)$. These results suggest that barks of A. arguta have a potent anti-oxidative and anti-inflammatory activity.
Phytochemical examination of the fruits of Actinidia arguta has led to the isolation three organic acids, one coumarin, and three flavonoids. Structures of these compounds were elucidated as protocatechuic acid (1), caffeic acid (2), $caffeoyl-\beta-D-glucopyranoside$ (3), esculetin (4), quercetin (5), quercetin $3-O-\beta-D-galactopyranoside$ (6), and quercetin $3-O-\alpha-L-rhamnopyranosyl$$(1\rightarrow6)-O-\beta-D-glucopyranoside$ (7) by comparisons with previously reported spectral data. To investigate the anti-inflammatory and anti-oxidative effects of these compounds, nitric oxide production inhibitory activity in LPS-stimulated RAW 264.7 cells and DPPH radical scavenging activities were examined. Nitric oxide productions were reduced significantly by the addition of compounds $[1(IC_{50}=59.27{\mu}g/ml),\;2(IC_{50}=27.95{\mu}g/ml),\;3(IC_{50}=73.09{\mu}g/ml),\;4(IC_{50}=67.44{\mu}g/ml),\;5(IC_{50}=17.40{\mu}g/ml),\;6(IC_{50}=41.99{\mu}g/ml),\;7(IC_{50}=54.46{\mu}g/ml)]$, and extracts $(IC_{50}=56.21{\mu}g/ml)$ compared with positive control, L-NMMA $(IC_{50}=14.48{\mu}g/ml)$. The phenolic compounds also showed anti-oxidative activities. Especially, Compounds $1(IC_{50}=8.87{\mu}g/ml),\;4(IC_{50}=3.41{\mu}g/ml),\;and\;5(IC_{50}=6.06{\mu}g/ml),\;$, showed potent anti-oxidative activities similar to L-ascorbic acid $(IC_{50}=5.89{\mu}g/ml)$.
뽕나무(Morus alba L.) 열매 오디로부터 오디주스 및 오디와인 제조 중 부산물로 얻어지는 오디씨를 기능성식품 및 화장품의 신소재로 사용하기 위한 연구의 일환으로 먼저 오디씨로부터 11가지 폴리페놀화합물을 분리 및 동정하였으며, 아울러 그들의 항산화활성과 품종별 함량을 측정하였다. 먼저 탈지오디씨박의 메탄올추출물을 노르말-헥산으로 탈지한 후 디클로로메탄, 에틸아세테이트 및 노르말-부탄올로 용매분획하고, 이중 항산화활성이 강한 에틸아세테이트 분획물을 silica-gel, Sephadex LH-20 및 ODS-A column chromatography를 순차적으로 실시하여 11가지 폴리페놀 화합물을 각각 순수하게 분리 및 정제하였으며, 그들의 화학 구조를 NMR을 이용하여 동정하였다. 오디씨로부터 분리한 11가지 폴리페놀화합물의 항산화활성을 DPPH radical을 이용하여 측정한 결과, rutin($IC_{50}=20.2\;{\mu}M$)이 가장 강한 항산화활성을 나타내었으며, 그 다음으로 isoquercitrin ($IC_{50}=22.5\;{\mu}M$)> quercitrin($IC_{50}=24.6\;{\mu}M$)> quercetin($IC_{50}=27.8\;{\mu}M$)> (+)-dihydroquercetin($IC_{50}=28.9\;{\mu}M$)> chlorogenic acid($IC_{50}=30.6\;{\mu}M$) 순으로 나타내었다. 반면, (+)-dihydrokaempferol($IC_{50}=33.8\;{\mu}M$), trans-resveratrol($IC_{50}=36.2\;{\mu}M$), moracin($IC_{50}=47.6\;{\mu}M$) 및 4-prenylmoracin($IC_{50}=48.2\;{\mu}M$)은 위의 폴리페놀화합물보다 낮은 항산화활성을 나타내었으며, procatechuic acid($IC_{50}=68.2\;{\mu}M$)는 가장 낮은 항산화활성을 나타내었다. 한편, 3가지 뽕나무 품종별 오디씨의 11가지 폴리페놀화합물의 함량을 측정한 결과, rutin이 31.1~60.0 mg/100 g으로 가장 높았으며, 그 다음으로 quercitrin(7.2~34.2 mg/100 g)> dihydroquercetin(13.2~33.1 mg/100 g)> quercetin(15.8~19.5 mg/100 g)> 4-prenylmor acin(10.5~43.3 mg/100 g)> isoquercitrin(5.8~15.4 mg/100g)> chlorogenic acid(0.0~15.3 mg/100 g)> moracin(4.7~7.2 mg/100 g)> procatechuic acid(0.0~11.6 mg/100 g) 순으로 낮게 나타났으며, (+)-dihydrokaempferol 및 transresveratrol의 함량은 미량(< 0.1 mg/100 g)으로 나타났다. 또한, 3가지 품종 중 대성뽕 오디씨는 폴리페놀화합물 중 rutin 및 quercetin 유도체의 함량이 높았으며, 반면 익수뽕 오디씨는 procatechuic 및 chlorogenic acid의 함량이 높았고, 특히 moracin 및 4-prenylmoracin의 함량이 다른 오디품종에 비해 높았으나, 반면 청일뽕은 3가지 품종 중 폴리페놀화합물의 함량이 가장 낮았다. 따라서 오디씨는 항산화성 폴리페놀화합물을 많이 함유하고 있기 때문에 암, 고혈압, 당뇨 및 노화를 예방하는 기능성식품 및 화장품의 신소재로 널리 활용할 수 있을 것으로 예상된다.
식물 및 동물성 단백질 유래 펩타이드 형태의 단백질 가수 분해물들은 항산화, 고혈압 완화, 면역조절, 진통완화 및 항균작용 등 생리활성이 있는 것으로 알려져 왔다. 본 연구는 6가지 프로티아제를 이용하여 오계란 단백질 가수분해물을 생산하고, 생산된 펩타이드의 항산화 능력을 평가하였다. 그 결과 가수분해도의 최대값은 protamex(46.3%)이고, DPPH 라디칼 소거능 최대값은 bromelain(57.23%), 하이드록시 라디칼 소거능 최대값은 alcalase(30.21%), 슈퍼옥사이드 라디칼 소거능 최대값은 alcalase(58.07%), $Fe^{2+}$ 킬레이션 능력 최대값은 alcalase(72.06%)로 나타났다. 더 나아가 효소별 항산화 저해 능력 $IC_{50}$ 평가하였다. 그 결과 alcalase에 의한 최대값은 금속 킬레이션 능력($IC_{50}$, 1.24 mg/mL)이고, bromelain에 의한 최대값은 DPPH 소거능($IC_{50}$, 2.46 mg/mL)이고, flavourzyme에 의한 최대값은 금속 킬레이션 능력($IC_{50}$, 1.25 mg/mL)이고, neutrase에 의한 최대값은 DPPH 소거능($IC_{50}$, 3.64 mg/mL)이고, papain에 의한 최대값은 DPPH 소거능($IC_{50}$, 3.82 mg/mL)이고, protamex에 의한 최대값은 DPPH 소거능($IC_{50}$, 1.93 mg/mL)이었다. 따라서 protease를 이용하여 오계란 단백질에서 추출한 펩타이드는 항산화 기능성 식품소재로서 활용할 가치가 높을 것으로 기대한다.
중국 운남성 리장지방에 자생하는 리장설차의 화장품적 적용 가능성을 분석 하였다. 우선 리장 설차의 DNA 분석을 통해서 Nekemias grossedentata (N. grossedentata) 라는 종을 확인한 후, 대표적인 차인 녹차와 각 효능분석에 대표적인 대조군을 사용하여 실험하였다. 먼저 리장 설차는 70% (v/v)에탄올 수용액으로 추출하였다. 리장설차 추출물내의 폴리 페놀함량 (gallic acid equivalent, 23.9 ± 3.2 mg/mL)은 녹차(16.4 ± 2.3 mg/mL)보다 많은 양을 포함 하고 있었다. 한편 추출물내의 고형분을 기준으로 항산화 활성(라디칼소거, IC50 104 ㎍/mL), Tyrosinase 효소 억제 활성(미백, IC50 40.7 ㎍/mL), 대장균 성장 억제 활성(방부: IC50 2.85 mg/mL)을 분석한 결과 녹차(항산화, 라디칼 소거, IC50 234 ㎍/mL) 보다 우수한 것 확인 하였다. 또한 항산화 (비타민C, IC50 108 ㎍/mL), 미백 (비타민C: IC50 80 ㎍/mL), 방부(메틸 파라벤: IC50 4.35 mg/mL)등의 기존에 사용되던 활성물질과도 유사한 효능을 보여 주었. 그러나 콜라게네이즈 억제 활성(주름) 은 녹차가 더 우수한 것으로 나타났다. 이를 통해 리장 설차의 화장품적 적용 가능성이 높은 것을 확인할 수 있었다.
안정성이 확보된 식품에서 ACE저해 활성 물질을 검색하는 연구의 일환으로, 옥수수 글루텐을 Flavourzyme, Pescalase, 그리고 Thermolysine/Pescalase 등으로 가수분해하여 얻은 가수 분해물로부터 ACE 활성 저해 펩타이드를 다음과 같은 과정으로 분리, 정제하였다. 10% 에탄올로 평형화된 ODS chromatography를 이용 단백질 분획들을 얻고, Bio-Gel P-2 column과 reverse phase HPLC를 통해 5개의 ACE 저해 펩타이드를 분리, 정제하였다. 그 아미노산 서열은 LPF($IC_{50}$ = 40 $\mu$M), GPP($IC_{50}$ = 17.6 $\mu$M), PNPY($IC_{50}$ = 30.7 $\mu$M), SPPPFYL($IC_{50}$/ = 63 $\mu$M), and SQPP($IC_{50}$ = 17.2 $\mu$M)로 밝혀졌다. 이 펩타이드들은 경구투석 시 가수분해 효소에 대응하여 체내에서 안정성이 뛰어나고, 소장에서도 쉽게 흡수될 것으로 사료되어 상시 섭취하는 식품이나 음료에 첨가하여 이용한다면 그 유용성이 기대된다.
본 연구에서는 Allium 속 식물인 달래, 대파, 양파의 물 추출물에 존재하는 항산화 활성과 tyrosinase 및 elastase 저해 효과를 확인하여 화장품 자원으로 이용 가능성을 확인하고자 하였다. DPPH 라디칼 소거능의 실험에 사용한 식물 물 추출물의 $IC_{50}$은 양파($IC_{50}=19.81mg/mL$) < 달래($IC_{50}=21.50mg/mL$) < 대파($IC_{50}=137.87mg/mL$) 순으로 높았다. 그리고 ABTS 라디칼 소거능의 경우에도 양파($IC_{50}=7.67mg/mL$) < 달래($IC_{50}=8.17mg/mL$) < 대파($IC_{50}=11.88mg/mL$) 순으로 DPPH 라디칼 소거능의 결과와 일치하였다. 그리고 달래 물 추출물의 총 폴리페놀 함량을 측정한 결과, 달래 물 추출물(43.03 mg/g)이 가장 높았으며, 그 다음으로 양파(38.27 mg/g), 대파(30.01 mg/g) 순이었다. Tyrosinase의 저해 효과를 측정한 결과, 대파 물 추출물($IC_{50}=36.95mg/mL$) < 양파($IC_{50}=37.31mg/mL$) < 달래($IC_{50}=51.97mg/mL$) 순으로 대파 물 추출물이 가장 높은 저해 활성을 나타냈다. 다음, elastase의 저해 효과를 측정한 결과, 달래 물 추출물($IC_{50}=298.37$ < 대파 $IC_{50}=323.75mg/mL$) < 양파($IC_{50}=367.21mg/mL$) 순으로 달래 물 추출물이 가장 높은 저해 활성을 나타냈다. 마지막으로 가열처리에 의하여 DPPH 라디칼 소거능과 tyrosinase 저해 활성이 일반 실험군보다 더 우수하게 나타났는데, elastase 저해 활성 실험에서는 반대로 가열 처리한 실험군이 일반 실험군보다 현저한 차이로 낮게 나타났다.
In continuous efforts for discovery of novel potent antitumor agents from natural products, fifty-seven methanolic extracts derived from indigenous Korean plants were primarily evaluated for in vitro cytotoxic activity in cultured human lung (A549) and colon (Col2) cancer cells. As a result, 16 plant extracts were found to be active against A549 cells and 15 extracts were active against Col2 cells in the criteria of $IC_{50}$<$50\;{\mu}g/ml$. In particular, the extracts of Calystegia soldanella $(IC_{50}$<$8.0\;{\mu}g/ml\;in\;A549;IC_{50}=27.4\;{\mu}g/ml\;in\;Col2)$, Heloniopsis orientalis $(IC_{50}=4.6\;{\mu}g/ml\;in\;A549; IC_{50}=4.5\;{\mu}g/ml\;in\;Col2)$, and Thuja koraiensis $(IC_{50}=1.2\;{\mu}g/ml\;in\;A549;IC_{50}=0.6\;{\mu}g/ml\;in\;Col2)$ showed a potent cytotoxic activity. Further study for the identification of active compounds from these lead extracts might be warranted.
Kim, Sang-Suk;Hyun, Chang-Gu;Lee, Jong-Sung;Lim, Ji-Hee;Kim, Ji-Young;Park, Deok-Hoon
Journal of Applied Biological Chemistry
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제50권4호
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pp.215-220
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2007
One of the important functions of skin is protection from harmful environments. Many studies have explored how to prevent skin from wrinkling and the occurrence of pigmentation changes. Skin wrinkling and pigmentation changes could be caused by unusual disruption of connective tissue, the formation of free radicals and ultraviolet radiation. In this study, extracts obtained from 254 different kinds of Jeju medicinal plants were screened for inhibitory effects on tyrosinase and elastase, and for free radical scavenging effects. Four herbs, Phormium tenax, Morus bombycis, Morus alba, and Cudrania tricuspidata, were potent inhibitors of tyrosinase ($IC_{50}$ values 4.62, 5.46, 8.17, and 64.17 ${\mu}g$/mL, respectively). Aleurites fordii [$IC_{50}$: 5.29 ${\mu}g$/mL, 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH)], Distylium racemosum ($IC_{50}$: 6.14 ${\mu}g$/mL), Acer palmatum ($IC_{50}$: 5.44 ${\mu}g$/mL), and Spiraea salicifolia ($IC_{50}$: 5.25 ${\mu}g$/mL) showed good antioxidative effects. Furthermore, Distylium racemosum ($IC_{50}$: 7.51 ${\mu}g$/mL), Diospyros kaki ($IC_{50}$: 15.1 ${\mu}g$/mL), Cornus macrophylla ($IC_{50}:$ 16.59 ${\mu}g$/mL), and Psidium guajava ($IC_{50}$: 40.25 ${\mu}g$/mL) exhibited potent inhibitory effects on elastase. These results suggest that medicinal plants possessing several biological activities may be potent inhibitors of the processes involved in pigmentation increases and aging. Further investigations will focus on in vivo assays and on the chemical identification of the major active components responsible for whitening and anti-aging activity in the screened efficacious extracts.
식물 및 동물성 단백질 유래 펩타이드 형태의 단백질 가수 분해물들은 항산화, 고혈압 완화, 면역조절, 진통완화 및 항균작용 등 생리활성이 있는 것으로 알려져 왔다. 본 연구는 연산오계란 단백질 가수 분해물을 Ultrafiltration를 이용하여 HDS(분획되지 않은 가수 분해물), 1 kDa, 5 kDa, 10 kDa, 50 kDa로 분획된 기능성 펩타이드의 DPPH radical scavenging activity, superoxide anion radical scavenging activity, hydroxyl radical scavenging activity 및 $Fe^{2+}$ chelation ability을 평가하였다. 그 결과 DPPH radical scavenging activity 최대값은 1 kDa(70.83 %), hydroxyl radical scavenging activity 최대값은 5 kDa (47.01 %), superoxide anion radical scavenging activity 최대값은 5 kDa(40.57 %), $Fe^{2+}$ chelation ability 최대값은 5 kDa(29.87 %)로 나타났다. Ultrafiltration를 이용하여 fractionation된 단백질 가수 분해물의 항산화 저해 능력 $IC_{50}$ 평가하였다. 그 결과 HDS의 최대값은 superoxide anion radical scavenging activity($IC_{50}$, 5.42 mg/ml)이고, 1 kDa의 최대값은 $Fe^{2+}$ chelation ability($IC_{50}$, 1.67 mg/ml)이고, 5 kDa의 최대값은 $Fe^{2+}$ chelation ability($IC_{50}$, 2.09 mg/ml)이고, 10 kDa의 최대값은 $Fe^{2+}$ chelation ability($IC_{50}$, 2.61 mg/ml)이고, 50 kDa의 최대값은 $Fe^{2+}$ chelation ability($IC_{50}$, 4.53 mg/ml)이다. 그러므로 본 연구 결과를 바탕으로 5 kDa를 이용하여 오계란 단백질에서 분획한 펩타이드는 항산화 기능성 식품소재로서 활용할 가치가 높을 것으로 기대한다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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