In order to evaluate on the effect of kaempferol on the cytotoxicity of oxygen tree radicals, XTT assay was performed to determine the cell viability after skin fibroblasts derived from human (Detroit 51) that were treated with various concentrations of hydrogen peroxide $(H_2O_2)$. And also, the effect of kaempferol on the cytotoxicity induced by H202 that was examined by cell viability, lactate dehydrogenase (LDH) activity and 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging activity in these cultures. $H_2O_2$ decreased cell viability in dose-dependent manner in these cultures and the $XTT_{90}\;and\;XTT_{50}$ values were determined at concentration of $35{\mu}M\;and\;90{\mu}M$ of $H_2O_2$ after skin fibroblasts derived from human were treated with $15{\sim}90{\mu}M$ of $H_2O_2$ for 6 hours, respectively. $H_2O_2$ was highly toxic on cultured skin fibroblasts derived from human by toxic criteria of Brenfreund and Puerner (1984). In the protective effect of kaempferol on $H_2O_2$-induced cytotoxicity, kaempferol increased DPPH radical scavenging activity and significantly decreased LDH activity. From these results, it is suggested that oxygen tree radical, $H_2O_2$, was highly toxic on cultured skin fibroblasts derived from human, and also kaempferol of flavonoid showed the protection on $H_2O_2$-induced cytotoxicity.
In order to examine oxidative stress of reactive oxygen species and the antioxidant effect of Citri Reticulatae Pericarpium (CRP) extract, human skin melanoma cells were treated with various concentrations of hydrogen peroxide ($H_2O_2$). Antioxidant effect of CRP extract on $H_2O_2$-induced cytotoxicity, cell viability, DPPH-radical scavenging activity and superoxide dismutase (SOD)-like activity. In this study, $H_2O_2$ decreased cell viability of cultured human skin melanoma cells in dose- and time-dependent manners, and then, midcytotoxicity value (MCV) was determined at $60\;{\mu}M$ after human skin melanoma cells were cultured for 5 hours in the media containing $20{\sim}60\;{\mu}M$ of $H_2O_2$, respectively. The $H_2O_2$ was on cultured human skin melanoma cells because MCV of $H_2O_2$ was lower than $100\;{\mu}M$. In the antioxidant effect of CRP extract, CRP extract increased cell viability DPPH-radical scavenging activity and SOD-like activity. From these results, it is suggested that $H_2O_2$ was very toxic on cultured human skin melanoma cells. And also, CRP extract has the antioxidant effect on $H_2O_2$-induced cytotoxicity.
Water and methanolic extracts of Ecklonia cava, a marine brown alga, were prepared by ultrasonic extraction (UE) and conventional extraction (CE) methods. The radical-scavenging activity and the inhibitory effects against hydrogen peroxide ($H_2O_2$)-induced DNA damage of the extracts were investigated. All extracts prepared by CE exhibited higher total polyphenolic content than that in the extracts prepared by UE. Extraction yield and total phenolic content increased as the UE time increased. The radical-scavenging activities increased as the UE time increased. All extracts prepared by CE exhibited higher 1,1-diphenyl-2-pricrylhydrazyl (DPPH) and hydroxyl radical-scavenging activities than did those prepared by UE. Extracts prepared by UE showed stronger scavenging activities on alkyl radical and $H_2O_2$ than those prepared by CE did. Methanolic extract with UE 12 h (100MEU-12h) and methanolic extract with CE 24 h (100MEC-24h) were selected and evaluated by comet assay for their inhibitory effect against $H_2O_2$-induced DNA damage. 100MEU-12h showed slightly greater protective effect against $H_2O_2$-induced DNA damage than 100MEC-24h. Thus, UE can be effectively used as a seaweed extraction technique, and there is potential for scale-up of the extraction process.
He, Mei Tong;Lee, Ah Young;Park, Chan Hum;Cho, Eun Ju
Nutrition Research and Practice
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v.13
no.4
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pp.279-285
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2019
BACKGROUND/OBJECTIVES: Excessive production of reactive oxygen species (ROS) such as hydroxyl (${\cdot}OH$), nitric oxide (NO), and hydrogen peroxide ($H_2O_2$) is reported to induce oxidative stress. ROS generated by oxidative stress can potentially damage glial cells in the nervous system. Cordyceps militaris (CM), a kind of natural herb widely found in East Asia. In this study, we investigated the free radical scavenging activity of the CM extract and its neuroprotective effects in $H_2O_2$-induced C6 glial cells. MATERIALS/METHODS: The ethanol extract of CM ($100-1,000{\mu}g/mL$) was used to measure DPPH, ${\cdot}OH$, and NO radical scavenging activities. In addition, hydrogen peroxide ($H_2O_2$)-induced C6 glial cells were treated with CM at $0.5-2.5{\mu}g/mL$ for measurement of cell viability, ROS production, and protein expression resulting from oxidative stress. RESULTS: The CM extract showed high scavenging activities against DPPH, ${\cdot}OH$, and NO radicals at concentration of $1,000{\mu}g/mL$. Treatment of CM with $H_2O_2$-induced oxidative stress in C6 glial cells significantly increased cell viability, and decreased ROS production. Cyclooxygenase-2 and inducible nitric oxide synthase protein expression was down-regulated in CM-treated groups. In addition, the protein expression level of phospho-p38 mitogen-activated protein kinase (p-p38 MAPK), phospho-c-Jun N-terminal kinase (p-JNK), and phospho-extracellular regulated protein kinases (p-ERK) in $H_2O_2$-induced C6 glial cells was down-regulated upon CM administration. CONCLUSION: CM exhibited radical scavenging activity and protective effect against $H_2O_2$ as indicated by the increased cell viability, decreased ROS production, down-regulation of inflammation-related proteins as well as p-p38, p-JNK, and p-ERK protein levels. Therefore, we suggest that CM could play the protective role from oxidative stress in glial cells.
Kim, Seonbaek;Kwon, Minhwan;Yoon, Yeojoon;Jung, Youmi;Hwang, Tae-Mun;Kang, Joon-Wun
Journal of Korean Society of Environmental Engineers
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v.36
no.8
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pp.534-541
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2014
This study investigated a method to determine an efficient operating condition for the $UV/H_2O_2$ process. The OH radical scavenging factor is the most important factor to predict the removal efficiency of the target compound and determine the operating condition of the $UV/H_2O_2$ process. To rapidly and simply measure the scavenging factor, Rhodamine B (RhB) was selected as a probe compound. Its reliability was verified by comparing it with a typical probe compound (para-chlorobenzoic acid, pCBA); the difference between RhB and pCBA was only 1.1%. In a prediction test for the removal of Ibuprofen, the RhB method also shows a high reliability with an error rate of about 5% between the experimental result and the model prediction using the measured scavenging factor. In the monitoring result, the scavenging factor in the influent water of the $UV/H_2O_2$ pilot plant was changed up to 200% for about 8 months, suggesting that the required UV dose could be increased about 1.7 times to achieve 90% caffeine removal. These results show the importance of the scavenging factor measurement in the $UV/H_2O_2$ process, and the operating condition could simply be determined from the scavenging factor, absorbance, and information pertaining to the target compound.
The antioxidative effect of Ecklonia cava, a brown marine alga, was investigated on radical scavenging, including 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH), and hydroxyl and alkyl radicals, using an electron spin resonance (ESR) technique, and on the inhibition of $H_2O_2$-induced DNA damage using comet assay. E. cava was enzymatically hydrolyzed with five food industrial proteases (Alcalase, Flavourzyme, Kojizyme, Neutrase and Protamex) to prepare water-soluble extracts. All the proteolytic hydrolysates exhibited strong dose-dependent radical scavenging activities (above 80%) at a concentration of $2.5\;{\mu}g/mL$. Kojizyme extract (obtained by proteolytic hydrolysation of E. cava with Kojizyme) showed the highest hydroxyl radical scavenging activity of around 98%. In addition, the $H_2O_2$-induced DNA damage was determined using a comet assay, which was quantified by measuring the tail length. Reduction of DNA damage increased with increasing concentrations of Kojizyme extract from E. cava. These results indicated that E. cava has a potential as a valuable natural antioxidative source.
In this study, we assessed the antioxidant properties of tidal pool microalgae, Halochlorococcum porphyrae and Oltamannsiellopsis unicellularis, from Jeju Island, Korea. Specifically, the antioxidant activity of fractions isolated from 80% methanol extract, and digests produced from five proteases and carbohydrases, were investigated. Almost all the fractions and the 80% methanol extract exhibited higher effects on 1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) free radical scavenging. The ethyl acetate fraction showed the highest superoxide anion scavenging activity, while both n-hexane and chloroform fractions exhibited higher $H_2O_2$ scavenging activity. Among the enzymatic digests from H. porphyrae and O. unicellularis, all the digests exhibited remarkable DPPH scavenging activities. In nitric oxide inhibition, all the digests recorded significantly higher effects than those of the commercial antioxidants (p < 0.05). Flavozyme and Neutrase digests from H. porphyrae, and Termamyl and Alcalase digests from O. unicellularis, showed significant effects in metal chelating. Lipid peroxidation was significantly inhibited in the ethyl acetate fraction, in the Celluclast and Protamex digests from H. porphyrae, and in the chloroform fraction from O. unicellularis. These findings suggest that the two tidal pool microalgae tested in this study are rich in potential antioxidative compounds, the specific properties of which can be considered for use in the food and pharmaceutical industries.
The nitrite scavenging effect of methanol extracts of marine algae were evaluated to discover new natural nitrite scavengers. Among the tested seaweeds, Ecklonia stolonifera, an edible brown algae, showed the strongest scavenging effect. The MeOH extract was then sequentially partitioned into $CH_2Cl_2,\;CH_2Cl_2$ insoluble interface, EtOAc, n-BuOH, and $H_2O$ layers. The EtOAc and n-BuOH fraction demonstrated high levels of nitrite-scavenging activity while the $CH_2Cl_2,\;CH_2Cl_2$ insoluble interface, and $H_2O$ fractions were inactive. A column chromatography of the EtOAc fraction through silica gel and Sephadex LH-20 yielded phloroglucinol and a new compound tentatively named phlorotannin A. The nitrite scavenging activity of phloroglucinol $(IC_{50}=3.9{\mu}g/ml)$ was more potent than that of L-ascorbic acid $(IC_{50}=65.0{\mu}g/ml)$. However, phlorotannin A $(IC_{50}=193.2{\mu}g/ml)$ showed only low levels of activity. From the above results, it is possible to suggest that both the MeOH extract and their fractions and isolated phloroglucinol and phlorotannin A obtained from E. stolonifera may be applicable as scavengers of nitrite, which is a precursor for the formation of carcinogenic N-nitroso compounds.
Objectives : To evaluate the neuroprotective effects of modified Bo-Yang-Hwan-O-Tang (BHT), we investigated the neuronal death protection effects to oxidative damages in N2a neuroblastoma cells. Methods : To study the cytotoxic effect of BHT on N2a neuronal cells, the cell viability was determined by MTT assay. To investigate the neuronal death protection of BHT, N2a neuronal cells were induced oxidative damages by H2O2, and assayed the cell viability and DNA fragmentation. We also investigated DPPH free radical scavenging effects of BHT by tube test. Results : In MTT assay, $500{\mu}g/ml$ of BHT was not showed cytotoxic effect on N2a neuronal cells. BHT protected N2a neuronal cells from H2O2-induced cell death in a dose-dependent manner. BHT also protected N2a neuronal cells from H2O2-induced DNA fragmentation. BHT scavenged DPPH free radicals in a dose-dependent manner. Conclusion : These data suggest that BHT may have strong anti-oxidant effects through the free radical scavenging and neuroprotective effects in neuronal cells.
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.22
no.2
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pp.328-332
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2008
The purpose of this study was to identify the protective effect of Codonopis pilosula extract on cell death induced by $H_2O_2$ in SK-N-MC neuroblastoma cells. We measured the antioxidant effect by DPPH radical scavenging analysis, BSA analyssis and examined the cell viability by crystal violet and cytochrome C, Bax, Bcl-2, p53, p21 by using Western blot analysis. Codonopis pilosula extract scavenged DPPH radical in a dose-dependent manner and shown direct free radical scavenging effect, suggested that Codonopis pilosula extract have antioxidant effect in vitro. Treatment of cells with hydrogen peroxide, a reactive oxygen species, was to induce cell death and pretreatment with Codonopis pilosula extract attenuated the occurrence of $H_2O_2-induced$ cell death. To elucidate the protective mechanisms of action of Codonopis pilosula extract, Western blot analyses for Bcl-2 and Bax expression and cytochrome c release were carried out. Pretreatment with Codonopis pilosula extract induced the expression of Bcl-2 and suppressed the release of cytochrome c and Bax into the cytosol, thereby arresting $H_2O_2-induced$ apoptotic cell death. Especially p21 and p53 were decreased prior to $H_2O_2$ treatment. These results suggest that Codonopis pilosula extract is associated with the cell cycle and anti-apoptotic cell death.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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