The present study was carried out in order to assess the protective effects of calycosin-7-O-$\beta$-D-glucopyranoside, isolated from Astragali radix (AR), on hyaluronidase (HAase) and the recombinant human interleukin-$1\beta$ (IL-$1\beta$)-induced matrix degradation in human articular cartilage and chondrocytes. We isolated the active component from the n-butanol soluble fraction of AR (ARBu) as the HAase inhibitor and structurally identified as calycosin-7-O-$\beta$-D-glucopyranoside by LC-MS, IR, ${1}^H$ NMR, and ${13}^C$ NMR analyses. The $IC_{50}$ of this component on HAase was found to be 3.7 mg/ml by in vitro agarose plate assay. The protective effect of ARBu on the matrix gene expression of immortalized chondrocyte cell line C28/I2 treated with HAase was investigated using a reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR), and its effect on HAase and IL-$1\beta$-induced matrix degradation in human articular cartilage was determined by a staining method and calculating the amount of degraded glycosaminoglycan (GAG) from the cultured media. Pretreatment with calycosin-7-O-$\beta$-D-glucopyranoside effectively protected human chondrocytes and articular cartilage from matrix degradation. Therefore, calycosin-7-O-$\beta$-D-glucopyranoside from AR appears to be a potential natural ant-inflammatory or antii-osteoarthritis agent and can be effectively used to protect from proteoglycan (PG) degradation.
Hossein, Mohammad Shamim;Kim, Yeun Wook;Park, Seon Mi;Koo, Ok Jae;Hashem, Md Abul;Bhandari, Dilip P;Jeong, Yeon Woo;Kim, Sue;Kim, Ji Hye;Lee, Eu Gine;Park, Sun Woo;Kang, Sung Keun;Lee, Byeong Chun;Hwang, Woo Suk
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.20
no.3
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pp.334-339
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2007
Reactive oxygen species (ROS) generate during electrical activation of oocytes which has detrimental effects on embryo survival when overwhelmed. The present study was designed to investigate the ability of L-ascorbic acid, a novel water soluble antioxidant, to reduce the ROS level in developing embryos and their subsequent effects on embryo development in vitro. The compact cumulus oocyte complexes (COCs) were cultured in tissue culture medium (TCM)-199 supplemented with 10 ng/ml epidermal growth factor, 4 IU/ml pregnant mare serum gonadotropin (PMSG), and human chorionic gonadotropin (hCG) and 10% (v/v) porcine follicular fluid (pFF) for 44 h. After maturation culture, the denuded oocytes were activated with a single DC pulse of 2.0 kV/cm in 0.3 M mannitol solution containing 0.5 mM of HEPES, 0.1 mM of $CaCl_2$ and 0.1 mM of $MgCl_2$ for $30{\mu}s$ using a BTX Electro-cell Manipulator. The activated oocytes were cultured in modified North Carolina State University-23 (mNSCU-23) medium for 168 h. The level of $H_2O_2$ in each embryo was measured by the dichlorohydrofluorescein diacetate (DCHFDA) method at 48 h after activation. The blastocyst formation rate was significantly higher when culture medium was supplemented with 50 and $100{\mu}M$ L-ascorbic acid (31.2 and 38.7%, respectively) compared to non-supplemented (16.1%) group. Accordingly, significantly more cells in blastocyst were found for 50 and $100{\mu}M$ L-ascorbic acid (50.0 and 56.4, respectively) compared to 0 and $200{\mu}M$ L-ascorbic acid (36.5 and 39.8, respectively). L-ascorbic acid reduces the $H_2O_2$ level in developing embryos in a dose-dependant manner. The $H_2O_2$ level (pixels/ embryos) was 191.5, 141.0, 124.0 and 163.3 for 0, 50, 100 and $200{\mu}M$ L-ascorbic acid, respectively. So, we recommend to supplement 50 or $100{\mu}M$ L-ascorbic acid in porcine in vitro culture medium.
We carried out the melt copolymerization reactions of 1,2-bis(diethylamino)tetramethyldisilane with several aryldiols such as, 4,4'-biphenol, 4,4'-isopropylidenediphenol, 9H-fluoren-9,9-dimethanol, and 4,4'-(9-fluorenylidene) bis(2-phenoxyethanol) to afford poly[oxy(arylene)oxy(tetramethyldisilylene)]s containing fluorescent aromatic chromophore groups in the polymer main chain: poly[oxy(4,4'-biphenylene)oxy(tetramethyldisilylene)], poly[oxy{(4,4'-isopropylidene) diphenylene}oxy(tetramethyldisilylene)], poly[oxy(9H-fluorene-9,9-dimethylene) oxy(tetramethyldisilylene)], and poly[oxy{4,4'-(9-fluorenylidene)bis(2-phenoxyethylene)}oxy(tetramethyldisilnylene)]. These prepared materials are soluble in common organic solvents such as $CHCl_3$ and THF. The obtained polymers were characterized by several spectroscopic methods such as $^1H$, $^{13}C$, and $^{29}Si$ NMR. Further, FTIR spectra of all the polymers exhibited characteristic Si-O stretching frequencies at 1014-1087 $cm^{-1}$. These polymeric materials in THF showed strong maximum absorption peaks at 268-281 nm, strong maximum excitation peaks at 263-291 nm, and strong maximum fluorescence emission bands at 314-362 nm due to the presence of tetramethyldisilylene and several arylene chromophores in the polymer main chain. TGA thermograms indicated that most of the polymers were stable up to $200^{\circ}C$ with a weight loss of 3-16% in nitrogen.
2kg of the dried leaves of chamaecyparis obtusa Endlicher were ground, extracted with acetone-$H_2O$(7:3, v/v), concentrated, and fractionated with a series of hexane, $CH_2Cl_2$, EtOAc and water on a separatory funnel. Each fraction was freeze dried to give dark-brown powder and a EtOAc soluble portion of the powder was chromatographed on a Sephadex LH-20 column using a series of aqueous methanol and ethanol-hexane mixture as eluents. Spectrometric analyses such as NMR and FAB-MS including TLC were performed to characterize the structures of the isolated compounds. The leaves of chamaecyparis obtusa Endlicher contained a large amount of taxifolin-3-O-${\beta}$-D-xylopyranoside and (+)-catechin in addition to a small amount of quercetin-3-O-${\alpha}$-L-rhamnopyranoside.
Saururus chinensis (Lour.) Baill. (Saururaceae) has been used as a traditional medicine for the treatment of dysuria, leukorrhea, eczema, jaundice and ascites in Korea, China and Japan. Ethanol extract of S. chinensis was successively partitioned as methylene chloride, ethyl acetate, n-butanol and $H_2O$ soluble fractions. Among those fractions the ethyl acetate soluble fraction showed the most potent DPPH radical scavenging and superoxide quenching activities. To verify antioxidant activities of ethyl acetate fraction, we checked the activities of superoxide dismutase (SOD) and catalase, and intracellular ROS level and oxidative stress tolerance in Caenorhabditis elegans. Furthermore, to see if increased stress tolerance of worms by treating of ethyl acetate fraction was due to regulation of stress-response gene, we quantified SOD-3 expression using transgenic strain. Consequently, ethyl acetate fraction elevated SOD and catalase activities of C. elegans, and reduced intracellular ROS accumulation in a dose-dependent manner. Moreover, ethyl acetate fraction-treated CF1553 worms exhibited significantly higher SOD-3::GFP intensity.
Ketamine HC1(Phencyclidine derivative) is a white, crystalline substance with melting point 259℃. It is soluble in water to a 20% clear, colorless solution. a 10% aqueous solution has a pH 3.5. The chemical structure is 2-(O-chlorophenyl)-2-(methylamino) cyclohexanone hydrochloride. It is a rapid acting, nonhypnotic, nonbarbiturate drug with a wide safety margin. The author used the anesthetic ketamine hydrochloride for oral surgery procedure in 16 patients(2 to 33 years). Anesthesia was achieved with a single intramuscular injection by introduction of manufacture. Result obtained as follows :
1. It was easily administered.
2. Onset time was rapid and duration was short.
3. The mild cardiac stimulation resulted in moderate increase in the blood pressure and pulse.
4. There was no significant respiratory depression.
5. The airway can be maintained without artificial support or endotracheal intubation.
6. All protective reflex maintained, which was important in oral surgery.
7. The best results were achieved in pediatric patients than adults.
The chemical constituents of Acer komarovii Pojark. which belongs to Aceraceae has never been reported. The bark of A. komarovii was extracted with 70% aqueous acetone, and the concentrated extract was successively partitioned with n-hexane, dichloromethane, ethyl acetate and $H_2O$. From the ethyl acetate soluble fraction, four compounds were isolated by the repeated Sephadex LH-20 and RP C-18 column chromatography. From the results of spectroscopic methods including FAB-MS, 1D and 2D NMR, the structures of the compounds were determined as quercetin (1), guaijaverin (2), hirsutrin (3) and hyperin (4). These compounds (1-4) have not been reported in this tree yet.
A strain of alkalophilic Bacillus sp. YC-335 has been isolated from soil. The strain was capable of producing large amount of cyclodextrin glycosyl transferase (CGTase) in the culture broth. The preferable medium composition has been determined to be as follows : 1.5% soluble starch, 5% corn steep liquor, 0.1% $K_2$HPO$_4$, 0.02%mgSO$_4$.7$H_2O$, 1% CaCO$_3$and 1% Na$_2$CO$_3$(pH 10.3). The highest enzyme production was observed after 48 hours of cultivation at 31$^{\circ}C$. The optimum pH and temperature for the activity of crude enzyme were 6.0 and 5$0^{\circ}C$, respectively. The enzyme was stable between pH 5 and 9, and upto 5$0^{\circ}C$. The enzyme converted starch into $\alpha$-, $\beta$- and ${\gamma}$-CD in the relative amounts of 1:10:1.5, respectively.
Cu(II) binding mechanisms with water soluble organic fractions (WSOF) extracted from an agricultural soil (W), a soil treated with sludge for 6 years ($WS_6$), a sludge-soil mixture incubated for one week ($WS_1$), and sewage sludge (SS) were studied by electron spin resonance (ESR) spectroscopy and potentiometric titrations. Cu(II)-WSOF complexes produced $g_{11}$ values which were larger than $g_{\perp}$ values, indicating that the coordination of Cu(II) complex was an elongated octahedron. At liquid $N_2$ temperature (77K), the Cu(II)-W complex showed an anisotropic ESR spectrum while the Cu(II)-SS complex showed an isotropic spectrum. These spectral results suggest that the oxygen donor ligands of W may form relatively strong bonds with $Cu^{2+}$ due to extensive chelation while ligands of SS may form little or no chelate bonds with $Cu^{2+}$. The ESR spectra of Cu(II)-SS complex also suggest that each of four in-plane ligands (e.g., $COO^-$, $H_2O$, $Cl^-$, etc.) may act independently as monodentate ligands. Oxygen donor ligands such as aromatic carboxyl groups were probably the major Cu(II) binding sites in W. Sulfonate, aliphatic carboxyl group, and N-containing ligands were probably the major binding sites in SS at pH 5. The Cu(II) complexation with N-containing groups increased as sludge was added to the soil. Much higher (6x) pyridine concentrations were required to displace W from Cu(II)-W complex as compared to the Cu(II)-SS complex.
Choi Eun Young;Oh Hyun Ju;Park Nang Kyu;Chun Hyun Ja;Ahn Jong Woog;Jeon Byung Hun;Han Du Seok;Lee Hyun Ok;Baek Seung Hwa
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.16
no.2
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pp.348-352
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2002
This study was carried out to evaluate cytotoxic effects of Atractylodes macrocephala Koidz. (A. macrocephala Koidz.) extract on NIH 3T3 fibloblast. SK-MEL-3 (HBT 69) and KB (ATCC No, OCL 17) cell lines. Disruptions in cell organelles were determined by 3-(4,5-dimethylthiazol-2-y1)-2,5-diphenyl-2H-tetrazoliumbromide (MTT) assay. 10.2 mg/ml Concentration of A. macrocephala Koidz. extracts in SK-MEL-3 showed that their susceptibility (sensitivity) to these compounds decreased in the following order ; adriamycin > H₂O > ethyl acetate > ethyl alcohol > chloroform > n-hexane in SK-MEL-3 cell lines ; 5-FU > H₂O > n-hexane > ethyl acetate > ethyl alcohol > chloroform in KB cell lines. In order to develop an antimicrobial agent, A. macrocephala Koidz. was extracted with solvents. The minimal inhibitory concentrations (MICs) of each solvent extract of A. macrocephala Koidz. against microogranisms were also examined. Antimicrobial activities of ampicillin and ketoconazole as references were compared to those of each solvent extract of A. macrocephala Koidz. The antimicrobial activity of the ethyl acetate soluble extract of A. macrocephala Koidz. had growth inhibition activity against S. mutans and P. putida (MICs. 500 ㎍/ml). These results suggest that the ethyl acetate soluble extract of A. macrocephala Koidz. possessed antitumorous and antimicrobial agents
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[게시일 2004년 10월 1일]
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