건강기능성식품의 원료로 이용되고 있는 석류의 주요성분에 대한 효율적인 이용을 위하여 반응표면분석에 의하여 각 성분의 열수 추출조건을 분석하여 최적 추출조건을 확립하였다. 주요성분의 최적 추출조건 예측을 위하여 추출온도$(60{\sim}100^{\circ}C)$, 추출시간$(1{\sim}5hr)$을 독립변수로 하여 중심합성계획에 의해 10구의 추출조건을 설정하였다. 각 추출물의 주요성분 함량 즉, chlorogenic acid, kaempferol, $17-{\alpha}-estradiol$ 및 $17-{\beta}-estradiol$ 함량을 측정하여 SAS program에 의해 회귀분석을 하여 각각의 특성을 분석하였다. 그 결과 chlorogenic acid, kaempferol 및 $17-{\alpha}-estradiol$ 함량은 주로 추출온도에 영향을 받는 것으로 나타났으며, $17-{\beta}-estradiol$ 함량은 추출시간에 영향을 받는 것으로 나타났다. 각 변수에 대한 회귀식을 도출하여 공정인자별 석류 추출물의 chlorogenic acid, kaempferol, $17-{\alpha}-estradiol$ 및 $17-{\beta}-estradiol$ 함량에 대한 최적 추출조건을 superimpose한 결과 추출온도 $98{\sim}100^{\circ}C$, 추출시간 $3{\sim}4hr$로 각각 예측되었다.
본 연구는 임신 및 분만후 rat에 oxytocin을 투여후 혈장, 자궁 및 태반 조직에서 estradiol-17$\beta$, progesterone, prostaglandin F$_2$$_{\alpha}$ 및 prostaglandin E$_2$그리고 자궁 조직의 oxytocin 수용체의 함량 사이의 관계에 대하여 조사하였다. 임신 rat에 oxytocin 투여 후 혈장 estradiol-17$\beta$의 농도는 임신 말기에 서서히 증가하여 임신 22일에 최고를 기록하였고 분만 후 1일에는 임신 16일 수준으로 감소하였다. Progesterone 농도는 임신 18일부터 분만 후 1일에 유의성 있는(p<0.05) 감소를 보였다. Prostaglandin F$_2$$_{\alpha}$ 및 Prostaglandin E$_2$농도는 임신 14일에서 임신 22일에 공히 상승하여 임신 22일에 최고를 기록하였고 분만 후 1일에는 급격히 감소하였다. Estradiol-17$\beta$의 농도는 자궁 조직에서 임신 14일에서 20일까지 서서히 증가하다가 임신 22일에 급격한 증가를 기록하였고 분만 후 1일에는 급격히 감소하여 임신 14일 수준을 유지하였으며 progesterone 농도는 임신 16일에 상승을 보인 후 임신 20일까지 급격히 감소하였고 분만 후 1일까지 같은 수준을 유지하였다. Prostaglandin F$_2$$_{\alpha}$ 및 prostaglandin E$_2$농도는 자궁조직에서 임신 말기 전기간에 상승하여 임신 22일에 최고를 기록한 후 분만 후 1일에는 급격히 감소하여 임신 14일과 비교하여 70% 수준을 기록하였다. Prostaglandin F$_2$$_{\alpha}$ 농도는 태반 조직에서 임신 14일에서 임신 22일까지 지속적으로 증가하였고 분만 후 1일에는 급격히 감소하였으며 prostaglandin E$_2$의 농도는 임신 14일에서 20일에 증가한 후 분만 후 1일까지 감소하였다. Oxytocin 수용체의 농도는 자궁 조직에서 임신 20일에서 임신 22일 사이에 급격히 증가한 후 분만 후 1일까지 비슷한 수준을 기록하였다. 이상에서와 oxytocin투여에 의한 임신 rat에 있어서 progesterone 농도의 감소에 이은 estradiol-17 $\beta$, prostaglandin F$_2$$_{\alpha}$, prostaglandin E$_2$및 oxytocin 수용체 농도의 증가는 조기에 시작되었다.
성장 촉진 호르몬제인 DES와 zeranol의 분석을 위한 조건을 검토한 결과는 다음과 같다. 질량분석기의 SIM에서 선택한 이온 중 DES는 $M^+$ 416, $D_8DES$은 $M^+$ 420, ${\beta}-estradiol$은 $M^+$ 416, zeranol은 $M^+$ 433이 가장 좋은 응신비를 나타내었고 이들 이온을 선택할 경우 효율적으로 분석이 가능하였다. 강 음이온 교환수지인 Dowex $2{\times}8$, 400 mesh 칼럼 1 cc에 통과시킨 경우 방해물질이 효율적으로 제거되었고 회수율이 가장 높았다. $D_8DES$을 내부표준물질로 사용하여 회수율을 측정한 결과 DES는 $85{\sim}110%$이었고, zeranol은 $75{\sim}110%$이었으며 ${\beta}-estradiol$을 내부표준물질로 사용한 경우 DES의 회수율은 $82{\sim}105%$, zeranol은 $65{\sim}120%$이었다. 또한 $D_8DES$ 대신에 ${\beta}-estradiol$을 내부표준물질로 사용하여 DES와 zeranol을 분석하는 것이 가능하였다. DES와 zeranol의 LOD를 측정한 결과 각각 0.05 ng/g, 0.2 ng/g었으며 LOQ를 측정할 결과 DES는 0.5 ng/g, zeranol은 1.0 ng/g이었다. 국내산과 수입산 쇠고기, 국내산 돼지고기, 닭고기, 오리고기, 양식광어와 양식 송어를 분석한 결과 DES와 zeranol은 잔류되지 않았다.
Kim, Ji-Eune;Ko, Ji-Yun;Kim, Young-il;Yoon, Yong-Dal;Cho, Byung-Nam
Animal cells and systems
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제4권1호
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pp.71-76
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2000
The aim of this study was to investigate expression patterns of the prolactin (PRL) and c-fos genes by 17$\beta$-estradiol (17$\beta$-E) and stress in the mouse pituitary. In the pituitary, the levels of PRL mRNA were found high with some fluctuation at 30, 50, and 90 min whereas the levels of PRL mRNA were low at 120 min when ovariectomized female mice were injected with 17$\beta$-E or vehicle. PRL mRNA levels began to increase again at 4 h and remained high up to 24 h only in the 17$\beta$-E- treated mice. The overall changes in c-fos mRNA by 17$\beta$-E were very similar to those in PRL mRNA in the pituitary. Subsequent study revealed that these high initial levels of PRL and c-fos mRNAs were caused by stress during Injection, not by 17$\beta$-E, since vehicle injection alone into the ovariectomized mice could increase the levels of PRL and c-fos mRNAs. The stress-induced elevations of PRL and c-fos mRNAs were inhibited by bromocriptin, a dopamine agonist, suggesting that the dopaminergic system is involved in the action route of injection stress. In addition, the induced levels of c-fos mRNA by 17$\beta$-E and stress in the pituitary were very low compared with those in the uterus. The time course changes in c-fos mRNA level were different between the pituitary and uterus. Taken together, these data indicate that PRL and c-tos gene expression in the pituitary are regulated by 17$\beta$-E and stress in a parallel manner, supporting the notion that c-Fos plays a role in regulation of PRL gene expression.
These studies were carried out to examine the estradiol-17$\beta$ levelsin plasma and ovarian tissues, as well as the contents of collagen and catecholamines in the uterus, and to determine the effects of GnRH administrations of uterine involution in postpartum Korean native goats. Plasma concentrations of estradiol-17$\beta$ were 63.81$\pm$8.00 pg/ml at day 1 of kidding, declined to 36.78$\pm$22.90 ng/ml at day 24 and decreased progressively to 27.81$\pm$17.06 and 12.46$\pm$8.13 pg/ml at days 30 and 36 postpartum, respectively. In ovarian tissues, the concentrations of estaiol-17$\beta$ were increased just before parturition and decreased immediately after parturition. The plasma estradiol-17$\beta$ levels were slightly higher on days 12 and then decreased gradually after parturition. The concentraitons of estradiol-17$\beta$ in the ovaries of postpartum goats were increased at day 36 after treatments with GnRH. The total hydroxyproline contents in the uterus was slightly higher prior to parturition and decreased gradually with the postpartum intervals after parturition. Hydroxyproline concentraitons in the uterus were decreased at days 24 and 36 postpartum after treatments with GnRH. The norepinephrine concentrations in myometrium from the pregnant and postpartum goats were correspondingly low both immediately before and after partuition. Norepinephrine concentrations in the pregnant horn of the uterus were increased from days 12 to 36 of postpartum and those levels of the non-pregnant horn were also increased from days 24 to 36 postpartum. Slightly higher concentrations were present in the non-pregnant horn in comparison to the pregnant horn but these differences were not significant. Postpartum, the uterine norepinephrine concentration was slightly increased at day 36 after treatments with GnRH. Dopamine concentrations were greater than those of norepinephrine. The concentrations of dopamine in the uterus of pregnant goats was not significantly different from that in the postpartum animals. Dopamine concentraitons of pregnant horn in postpartum goats were increased at day 24 after treatments with GnRH.
In our previous report, we showed that $PPAR{\gamma}$ does not influence adipogenesis in females with functioning ovaries, indicating that $PPAR{\gamma}$ activity on adipogenesis is associated with sex-related factors. Among the sex-related factors, estrogen has been recognized as a major factor in inhibiting adiposgenesis in females. Thus, we hypothensized that $17{\beta}$-estradiol (E) inhibits 3T3-L1 cell adipogenesis by preventing $PPAR{\gamma}$ activity. E decreased triglyceirde accumulation in differentiated 3T3-L1 cells compared with control group. E also decreased the expression of $PPAR{\gamma}$ mRNA as well as $PPAR{\gamma}$ dependent adipocyte-specific genes, such as adipocyte fatty acid binding protein and tumor necrosis factor $\alpha$. In addition, E not only decreased luciferase reporter activity by $PPAR{\gamma}$, but also transfection of estrogen receptor $\alpha$ ($ER{\alpha}$) or $ER{\beta}$ led to decreases in $PPAR{\gamma}$ reporter gene activation. Moreover, E-activated ERs significantly decreased the luciferase reporter gene activation induced by $PPAR{\gamma}$ transfection, suggesting that estrogen-activated ERs inhibit $PPAR{\gamma}$-dependent transactivation. Accordingly, our results demonstrate that E inhibits the action of $PPAR{\gamma}$ on adipogenesis through E activated ER, providing evidence that lack of estrogen may potentiate $PPAR{\gamma}$ action on adipogenesis.
Estrogen과 estrogenic endocrine disrupting chemicals(EDCs)는 주로 스테로이드 수용체와 작용하여 다양한 표적 단백질 유전자의 전사를 조절한다. 구조적으로 estrogen 수용체와 유사한 estrogen 수용체형 수용체(estrogen receptorrelated receptor, ERR)는 포유동물에서 배발생 후기에 외배엽 형성과 관련되어 있다고 알려진 고아핵수용체(orphan nuclear receptor)이다. 본 연구에서는 해양무척추동물인 둥근성게(Strongylocentrotus nudus)의 발생배를 재료로 estradiol-$17{\beta}(E_2)$과 EDCs의 일종인 nonylphenol(NP)이 발생과정의 형태학적 변화와 $ERR{\beta}$ like 1의 mRNA발현에 미치는 영향을 조사하였다. $E_2$와 NP가 처리된 발생배는 발생속도가 지연되었으며, 초기 유생기에 가까운 후기배의 비정상적인 발달형태가 관찰되었다. 수정란부터 초기 유생기까지 측정한 결과, 이들 화학물질에 의해 $ERR{\beta}$ like 1 mRNA는 포배기에 급격히 감소하는 패턴을 보였다. 이상의 결과는 둥근성게의 초기 배가 $E_2$와 NP에 의해 비정상적으로 발생되며, $ERR{\beta}$ like 1의 감소가 이 비정상적 배발생과 관련되어 있음을 시사한다.
한국수의병리학회 2005년도 Proceedings of The 2nd Asian Society of Veterinary Pathology Symposium(Vol.2) and 2005 Annual Meeting of The Korean Society of Veterinary Pathology(Vol.9)
비글개 6두에서 11회(임신견 7두, 비 임신견 4두)의 발정 주기 및 임신 기간 동안 질 상피 세포 검사 및 혈장 progesterone과 estradiol-$17{\beta}$ 농도를 측정하여 질 상피 세포상과 번식 호르몬의 관계를 조사하고 배란 및 교배 적기 판정을 위한 기초 자료를 제공하고자 본 실험을 실시하였다. 임신 예와 비 임신 예에 있어서 발정 전기, 발정기 및 발정 휴지기의 기간은 각각 $8.5{\pm}1.4(Mean{\pm}SD),\;10.0{\pm}1.4$ 및 $54.0{\pm}2.8$ 그리고 $7.9{\pm}2.1,\;9.5{\pm}0.7$ 및 $62.0{\pm}11.3$일이었다. 임선 예에 비해 비 임신견의 발정 휴지기가 길었으며, 발정 주기 사이의 간격은 임선 예가 $246.2{\pm}24.5$일, 비 임신 예은 $175.3{\pm}34.5$일을 나타내어 임신이 되었던 예가 임신이 되지 않았던 예보다 길었다. 발정 주기별 질 상피 세포상의 변화를 보면 발정 전기와 발정기에는 superficial cell, anuclear cell 및 적혈구가, 발정 휴지기에는 parabasal cell, small intermediate cell, large intermediate cell 및 백혈구가, 그리고 무발정기에는 parabasal cell과 small intermediate cell이 주종을 이루었다. Cornification index(CI)는 발정 주기와 발정기에 유의하게 높았다. 발정 주기 중 혈장 progesterone과 estradiol-$17{\beta}$의 농도 사이의 관계를 혈장 progesterone 농도가 최초로 4.0 ng/ml 이상으로 상승한 날을 기준(Day 0)으로 살펴보면, 혈장 progesterone 농도는 발정 출혈 개시 일에 1.0 ng/ml 이하였으나 Day -2에 2.0 ng/ml 이상으로 상승하였으며, 혈장 progesterone 농도가 최초로 4.0 ng/ml 이상으로 상승한 날은 최초 교배 허용 후 2일이었다. Day 20일 경에 임신 예 및 비임신 예 모두 40 ng/ml 이상으로 최고치를 나타내었으며 Day 35 일까지 임신 예와 비 임신 예 사이에 차이가 인정되지 않았으나 이후 임신 예가 비 임신 예에 비해 높게 유지된 기간이 걸었다. 혈장 estradiol-$17{\beta}$ 농도는 발정 출혈 개시 일에 9 pg/ml 이상을 나타냈으며 이후 급증하여 Day -2 에 26.4 pg/ml로 peak를 나타내었다. CI와 혈장 progesterone 및 estradiol-$17{\beta}$ 농도 사이의 관계를 살펴보면, 혈장 estradiol-$17{\beta}$ 농도는 최초 교배 허용 일(Day 0)에 peak를 나타냈고 혈장 progesterone 농도는 Day 2에 4.0 ng/ml 이상으로 처음 상승하였다. CI 는 혈장 estradiol-$17{\beta}$ peak 이후 l일(Day 1)에 최고치를 나타냈으며 80% 및 90% 이상으로 증가한 날은 각각 Day -1 및 Day 1이었다. CI가 80% 및 90% 이상을 지속한 기간은 각각 Day -1에서 Day 8(10 일간 ) 및 Day 1에서 Day 6(6 일간)이었다. CI가 최고치를 나타낸 후 l일 (Day 2)에 혈장 progesterone 농도가 4.0 ng/ml 이상으로 처음 증가하였다. 결과를 종합하면 본 연구에서 비글개의 배란은 혈장 estradiol-$17{\beta}$ peak 이후 3일 및 혈장 progesterone 농도가 4.0 ng/ml 이상으로 처 음 상승한 날에 일어나며, 교배 적기는 CI가 90% 이상으로 증가한 후 2일 이후와 혈장 progesterone 농도가 $2{\sim}25\;ng/ml$인 시기로 생각된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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