• Applied Biological Chemistry
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• 제44권3호
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• pp.197-201
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• 2001

우슬(Achyranthis radix)중 ${\beta}-ecdysone$의 초임계추출법과 용매추출법의 비교를 위해 초임계유체추출(SFE) 및 용매추출 후 초임계유체크로마토그래피(SFC)에 의한 우슬 중 ${\beta}-ecdysone$ 분석을 실시하였다. SFE에 있어서 추출 최적압력은 300 atm이었으며, 온도는 $80^{\circ}C$, 추출량은 100 ml, 보조제인 methanol 함량비율은 20%였다. 우슬에서 ${\beta}-ecdysone$의 분석시 SFC의 최소검출량은 5 ng이었고, SFE의 회수율은 줄기에서는 $90.7{\sim}93.5%$였으며, 뿌리에서는 $77.8{\sim}81.9%$였다. 용매추출의 회수율은 줄기에서는 $76.4{\sim}93.0%$였고 뿌리에서는 $80.6{\sim}93.1%$였다. 우슬의 생육기별 조사에서 ${\beta}-ecdysone$은 주로 뿌리에서 많이 검출되었고 1년생이면서 8월에 수확한 것이 654.9 ppm으로 가장 많이 함유한 것으로 나타났다.

• Applied Biological Chemistry
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• 제41권4호
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• pp.251-256
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• 1998

The analytical method of ${\beta}-ecdysone$, the insect moulting hormone, by high performance liquid chromatograph (HPLC) with UV detector was developed using boronic ester derivatization and applied to the extracts of Ajuga iva, Silene otites and Schistocerca egg. Derivatization of yield with methyl-, butyl-, and phenyl-boronate was completed under mild conditions with 20-hydroxyecdysone. The conversion ratios of boronate were estimated to be 70% in methylboronic acid, 89% in butylboronic acid and 93% in phenylboronic acid. Phenylboronate showed a high sensitivity and demonstrated an effective separation on HPLC. The optimum temperature and reaction time for derivative formation were $25^{\circ}C$ and 20 min. respectively. ${\beta}-Ecdysone$ was effectively identified in extracts of Ajuga iva, Silene otites and Schistocerca egg by the HPLC method.

• 한국식품저장유통학회지
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• 제12권3호
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• pp.275-281
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• 2005

우슬이 민간요법으로 관절염 치료에 우수한 한약재로 알려진 바 우슬 추출물이 cathepsin B 에 대한 저해력을 검토하기 위하여 각종 용매로 우슬 추출물을 순차 분획하고 분획 추출물에 대하여 cathepsin B에 대한 저해활성을 검토하였으며 우슬의 지표물질인 20-hydroxy ecdysone이 추출분획에 검출되는지 TLC 및 HPLC를 이용하여 분석하였으며 우슬의 지표물질이 cathepsin B에 대한 저해활성여부를 확인한바 다음과 같은 결과를 얻었다. 우슬 뿌리에 대해 methanol/water(4:1, v/v) 추출물을 ethyl acetate, chloroform, chloroform/methanol(3:1, v/v), methanol의 각 용매로 분획한 결과, 분획 F4(methanol 분획)에서 수율이 가장 높아 $8.27\%$를 나타내었다. 각 분획별에 따라 cathepsin B에 대한 저해활성을 측정한 결과 F4분획물에서 가장 저해활성이 높았으며 F1분획에서도 높은 저해활성을 나타내었다. F4분획물 중 우슬의 지표물질인 20-hydroxy ecdysone이 검출되었으며 우슬에 함유되어있는 함량은 $0.33\%$이었다. 20-hydroxy ecdysone에 대하여 cathepsin B저해활성을 보기 위하여 cathepsin B저해활성제로 알려진 leupeptin과 활성을 비교해본 결과 기질을 BANA로 사용하였을 경우 leupeptin은 저해율이 $92\%$인데 비하여 20- hydroxy ecdysone은 $88\%$이었으며 F4분획물은 $97\%$를 나타내었고 기질을 CLN으로 사용하였을 경우 leupeptin은 저해율이 $62\%$인데 비하여 20-hydroxy ecdysone은 $36\%$이었으며 F4추출물은 $67\%$를 나타내었다.

• 한국잠사곤충학회지
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• 제37권2호
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• pp.127-131
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• 1995

비름과 다년생 초분류의 Acyranthes속 식물인 쇠무릎에서 phytoecdysone을 추출하여 누에에 첨식시킨 후 누에의 등족촉진효과에 관한 생물검정을 실시하였다. 1. 쇠무릎에서 추출정제한 phytoecdysone을 정량한 결과, 건물 1Kg당 355mg이 회수되었으며, TLC 동정 결과 $\beta$0ecdysone과 동일한 물질로 판명되었다. 2. Phytoecdysone 투여후 약 4시간째부터 처리구가 대조구에 비해 등족율이 높아졌으며, 등족완료시간도 짧았다. 3. Phytoecdysone 투여 효과는 춘잠기와 하잠기(불량환경)간에 차이를 보였다. 춘잠기에는 등족촉진효과 만이 인정되었을뿐 견질 및 화용비율은 대조구와 큰 차이가 없었으나, 하잠기에는 등족촉진효과 뿐만 아니라 화용 비율도 크게 향상되었다.

• Applied Biological Chemistry
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• 제44권3호
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• pp.162-166
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• 2001

미역고사리(Polypodium vutgare L.)와 쇠무릎(Achyranthes japonica Nakai)에 있어서 광과 methyl jasmonate(MJ), 6-benzylaminopurine(BA), thidiazuron(TDZ), 2,4-dichlorophenoxyacetic acid(2,4-D)가 식물체 중의 ecdysteroids (${\beta}$-ecdysone+polypodine B) 함량에 미치는 영향을 조사하였다. 수광량을 조절하여 재배한 미역고사리의 잎과 근경 모두 상대광도가 높을수록 ecdysteroids 함량이 감소하였고 쇠무릎 유묘의 배양시 광 조건일 때가 암 조건일 때 보다 ecdysteroids함량이 낮아 식물의 ecdysteroids 함량은 광에 의해 저하되는 것으로 나타났다. 미역고사리 전엽체와 쇠무릎 유묘의 배양계에서 식물체 중의 ecdysteroids 함량은 배지 중의 MJ와 BA 그리고 TDZ의 농도가 높아짐에 따라 증가된 반면 2,4-D의 농도와는 무관하게 일정한 수준으로 유지되어,식물의 ecdysteroids 함량은 MJ와 cytokinin처리에 의해 증가되지만 auxin처리에 의해서는 영향을 받지 않는 것으로 나타났다.

• 한국자원식물학회지
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• 제24권4호
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• pp.351-357
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• 2011

본 연구는 양치식물로부터 phytoecdysteroids의 추출 효율을 향상시키기 위하여 시행하였다. 청나래고사리와 고비의 잎(엽상체)을 동결건조 한 후 곱게 분쇄하여 MeOH, 80% EtOH, $H_2O$(nano pure grade)를 용매로 하여 50배 추출하였으며, 각 용매별로 6시간 동안 침지, 교반(200 RPM), 60$^{\circ}C$ 환류냉각추출하거나 42 kHz의 초음파수조에서 15, 30, 45분 동안 추출하였다. 추출물은 $C_{18}$ cartridge로 정제하여 분석하였으며, HPLC를 이용하여 각 추출물의 20-hydroxyecdysone(20E)과 ponasterone A(PonA)의 함량을 조사하였다. 3종류의 용매를 6가지 방법으로 추출한 결과, 청나래고사리와 고비의 추출물 모두 MeOH를 용매로 30분 동안 초음파 추출했을 때 20E와 PonA의 용출량이 증가하였으며, 엽상체 건물중 1 g당 청나래고사리와 고비의 20E 함량은 66.76과 104.48 ${\mu}g$, PonA의 함량은 53.43와 43.82 ${\mu}g$이었다.