53 세 남자가 하부 식도에서 발생한 거대한 용종성 종괴에 의한 연하곤란을 주소로 내원하여 식도 절제술과 식도-위 문합술을 시행하였다. 현미경소견상 기저세포양 편평세포암과 연골 분화가 여러 곳에서 관찰되는 연골육종이 혼재하는 진성암육종이었다. 위장주위 임파절과 기도분기부하 임파절에 편평세포암이 전이되어 있었다. 면역조직화학적 검사상 편평세포 지역은 cytokeratin 에 강한 양성이었고 기저세포양 지역은 고분자량 cytokeratin 에 양성이었다. 방추세포육종은 vimentin 과 smooth muscle actin 에 양성이었고 연골육종 지역은 vimentin 과 S-100 단백질에 양성이었다. 술후 항암제 치료와 방사선 치료의 보조병용요법을 시행하였으며 술후 11 개월인 현재까지 재발의 소견 없이 정상 식사를 하고 있다.
The aim of this review was to understand the effects of ${\beta}$-adrenergic stimulation on oxidative stress, structural remodeling, and functional alterations in the heart and cerebral artery. Diverse stimuli activate the sympathetic nervous system, leading to increased levels of catecholamines. Long-term overstimulation of the ${\beta}$-adrenergic receptor (${\beta}AR$) in response to catecholamines causes cardiovascular diseases, including cardiac hypertrophy, stroke, coronary artery disease, and heartfailure. Although catecholamines have identical sites of action in the heart and cerebral artery, the structural and functional modifications differentially activate intracellular signaling cascades. ${\beta}AR$-stimulation can increase oxidative stress in the heart and cerebral artery, but has also been shown to induce different cytoskeletal and functional modifications by modulating various components of the ${\beta}AR$ signal transduction pathways. Stimulation of ${\beta}AR$ leads to cardiac dysfunction due to an overload of intracellular $Ca^{2+}$ in cardiomyocytes. However, this stimulation induces vascular dysfunction through disruption of actin cytoskeleton in vascular smooth muscle cells. Many studies have shown that excessive concentrations of catecholamines during stressful conditions can produce coronary spasms or arrhythmias by inducing $Ca^{2+}$-handling abnormalities and impairing energy production in mitochondria, In this article, we highlight the different fates caused by excessive oxidative stress and disruptions in the cytoskeletal proteome network in the heart and the cerebral artery in responsed to prolonged ${\beta}AR$-stimulation.
Oligosaccharide modification by N-acetylglucosaminyltransferase-V (GnT-V), a glycosyltransferase encoded by the Mgat5 gene that catalyzes the formation of ${\beta}1$,6GlcNAc (N-acetylglucosamine) branches on N-glycans, is thought to be associated with cancer growth and metastasis. Overexpression of GnT-V in cancer cells enhances the signaling of growth factors such as epidermal growth factor by increasing galectin-3 binding to polylactosamine structures on receptor N-glycans. In contrast, GnT-V deficient mice are born healthy and lack ${\beta}1$,6GlcNAc branches on N-glycans, but develop immunological disorders due to T-cell dysfunction at 12-20 months of age. We have developed Mgat5 transgenic (Tg) mice (GnT-V Tg mice) using a ${\beta}$-actin promoter and found characteristic phenotypes in skin, liver, and T cells in the mice. Although the GnT-V Tg mice do not develop spontaneous cancers in any organs, there are differences in the response to external stimuli between wild-type and GnT-V Tg mice. These changes are similar to those seen in cancer progression but are unexpected in some aspects. In this review, we summarize what is known about GnT-V functions in skin and liver cells as a means to understand the physiological roles of GnT-V in mice.
Park, Ji-Hyun;Kim, Nam-Hyung;Hosup Shim;Kim, Teoan
한국수정란이식학회:학술대회논문집
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한국수정란이식학회 2002년도 국제심포지엄
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pp.100-100
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2002
As an preliminary experiment for making transgenic animals producing human follicle stimulating hormone (hFSH), we tried to express recombinant hFSH gene in vitro. hFSH is a heterodimeric glycoprotein hormone produced in the anterior pituitary gland. The hormone is essential in the regulation of reproductive processes, such as follicular development and ovulation. Genes encoding the common gonadotrophin alpha subunit and FSH-specific beta subunit were inserted into retroviral vectors under the control of the rat beta actin promoter. Gene transfer to the Chinese hamster ovary (CHO) cells was done by infection of the retroviruses harvested from PT67 packaging cells transfected with recombinant retrovirus vector DNA. After selection with G4l8, PCR and RT-PCR analyses of the G4l8-resistant CHO cells showed successful transfer and expression of both ${\alpha}$ and ${\beta}$ fragments of the FSH gene.
Lee, Seobihn;Park, Myung Soo;Lee, Hanbyul;Kim, Jae-Jin;Eimes, John A.;Lim, Young Woon
Mycobiology
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제47권1호
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pp.50-58
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2019
Agarum clathratum, a brown macroalgae species, has recently become a serious environmental problem on the coasts of Korea. In an effort to solve this problem, fungal diversity associated with decaying A. clathratum was investigated and related ${\beta}$-glucosidase and endoglucanase activities were described. A total of 233 fungal strains were isolated from A. clathratum at 15 sites and identified 89 species based on morphology and a multigene analysis using the internal transcribed spacer region (ITS) and protein-coding genes including actin (act), ${\beta}$-tubulin (benA), calmodulin (CaM), and translation elongation factor (tef1). Acremonium, Corollospora, and Penicillium were the dominant genera, and Acremonium fuci and Corollospora gracilis were the dominant species. Fifty-one species exhibited cellulase activity, with A. fuci, Alfaria terrestris, Hypoxylon perforatum, P. madriti, and Pleosporales sp. Five showing the highest enzyme activities. Further enzyme quantification confirmed that these species had higher cellulase activity than P. crysogenum, a fungal species described in previous studies. This study lays the groundwork for bioremediation using fungi to remove decaying seaweed from populated areas and provides important background for potential industrial applications of environmentally friendly processes.
미세주입법에 의한 형질전환 마우스 제작에는 대량의 전핵기란을 필요로 한다. 본 실험에서는 심플한 형질전환 마우스 제작방법을 확립하기 위해 초급속 동결한 전핵기란을 공시했다. 초급속 동결법으로 동결한 전핵기 체외수정란 139개를 융해 후 공시하고, ${\beta}-actin/luc^+$ 융합유전자를 미세주입하였다. 주입 조작 후, 형태학적으로 정상적인 수정란 101개(72.6%)를 5마리의 수란암컷 마우스에 이식하였다. 그 결과, 이식한 모든 마우스가 임신하고, 최종적으로 15마리(14.8%)의 산자가 태어났다. 한편, 450개의 체외수정란에 대해 동일한 배아조작 후에 338개(75.1%)가 생존하고 14마리의 수란암컷 마우스에 이식 하였다. 그 중에 78%의 수정암컷 마우스가 임신하고, 54마리(19.1%)의 산자가 태어났다. 태어난 산자에 대해서는 southern blot 법에 의해 염색체 내의 도입유전자의 도입을 확인한 결과, 동결수정란 처리구와 체외수정란구에서 각각 6.6%(1/15), 5.5% (3/54)의 마우스에서 도입유전자의 도입이 확인되었다. 더욱이 두 처리구 전부의 형질전환 마우스의 미부조직에서 도입유전자인 루시페라제 유전자의 발현이 관찰되었다. 이상의 결과에 의해 체외수정란 초급속 동결보존법을 사용한 Tg 마우스 제작방법의 확립을 확인하였고, 이러한 결과들로부터 실험기간의 단축과 작업의 간소화에 크게 이바지할 것으로 사료된다.
목적: 알칼리 화상 후 초기 임상적 손상반응의 진행과 치료를 위한 각막 재생의 이해를 높이기 위하여, 화학적 손상 후 동반하는 다양한 인자에 대한 면역조직화학적 변화를 조사하였다. 방법: 알칼리 화상을 입은 각막의 자가치유과정을 면역형광염색법과 H-E 염색, 그리고 TUNEL assay를 통해 면역조직화학적 측면에서 관찰하였다. 결과: 화상 후 각막의 치유는 진행되었지만 각막기질(stroma)과 내피세포의 세포사는 지속적으로 관찰되었다. 각막가장자리의 혈관신생과 손상된 각막의 ${\alpha}$-SMA의 발현은 알칼리 화상 3일 후부터 나타났으며, 각막기질에서의 콜라젠 III(collagen III)의 형성과 콘드로이친황산(chondroitin sulfate)의 발현은 ${\alpha}$-smooth muscle actin(${\alpha}$-SMA)와 transforming growth factor-${\beta}$(TGF-${\beta}$)의 발현증가와 일치하는 결과를 얻었다. 결론: 각막혼탁을 막기 위해서는 알칼리 화상 후 3일 이내에 혈관신생, 콜라젠 및 콘드로이친황산의 형성을 억제하는데 주력하는 치료가 효과적일 것이라 사료된다. 이 연구는 알칼리 화상을 입은 각막의 치유과정에 있어서의 면역조직화학적 지식을 제공함으로써, 각막의 재생을 촉진하는 치료제의 개발과 이용에 초석이 되리라 사료된다.
Cirsium japonicum (CJ) leaf (L) alcoholic extracts were investigated for analysis their active components (flavonoids and flavanolignans; silymarins) and inhibitory effect on transforming growth factor (TGF)-${\beta}$ induced hepatic stellate cells (HSCs, LX-2 cells) activation. The CJ root (R) extracts were also analyzed and compared with leaf extracts. Total flavonoid and polyphenol contents of the leaf extracts showed higher than those of the root extracts. The content of each flavonoid compound, which was analyzed by HPLC, in CJ-L extracts was also higher than in CJ-R extracts. The results of flavanolignans content in CJ-L and CJ-R extracts were consistent in flavonoid and polyphenol. We studied inhibitory effect of two extracts against TGF-${\beta}1$ induced HSCs activation. The CJ-L extracts significantly suppressed overexpression of profibrogenic factor, ${\alpha}$-smooth muscle actin and collagen-${\alpha}1$(I). The CJ-R extract also showed inhibitory effect on TGF-${\beta}1$ induced HSCs activation, but the efficacy was lower than in CJ-L extract. These results suggest that CJ-L may contribute to the fibrotic liver treatment.
본 연구에서는 vesicular stomatitis virus G glycoprotein (VSV-G)를 envelope로 가지는 pantropic retrovirus vector system을 이용하여 재조합 human FSH 유전자가 전이된 형질전환 닭을 생산하고자 하였다. Human FSH $\alpha$ 및 $\beta$ 유전자와 CTP linker는 human pituitary gland cDNA library에서 RT-PCR 방법을 이용하여 cloning하였으며, 각각의 fragment는 FSH$\beta$-CTP-FSH$\alpha$ 순서의 단일사슬로 연결하였다. 연결된 FSH$\beta$-CTP-FSH$\alpha$는 retroviral vector 내의 $\beta$-actin promoter의 조절 하에 도입한 후, PT67 packaging cell line에 transfection하여 virus를 생산하였으며 생산된 virus는 pantropic한 virus producing cell인 GP293에 infection하여 FSH 유전자가 도입된 virus를 생산하였다. FSH 유전자의 발현을 in vitro에서 확인하기 위하여 CHO (chinese hamster ovary) 세포에 virus를 감염시킨 후, 세포의 배양액을 취하여 electrochemilumine-scence immunoassay 방법으로 정량하였다. In vitro에서 전이 후 발현이 확인된 FSH 외래유전자의 retroviral vector virus를 초원심분리로 고농축하여 stageX의 계란의 배반엽 층에 주입하였으며, 그 결과 18%의 부화율과 91%의 부화한 닭의 유전자 전이율을 확인할 수 있었다. 전이된 유전자의 확인은 FSH$\beta$와 Neo 유전자에 대한 primer를 이용한 RT-PCR의 방법을 이용하였다. In vitro에서와는 달리 in vivo에서는 FSH 유전자의 전이는 확인되었으나 발현을 확인하지는 못하였는데, 이는 적은 수의 실험군이 형질전환율에 비해 상대적이지 못하였거나, 외래 유전자인 FSH의 발현에 의한 생리적인 부작용이 유발되어 해당개체가 부화되지 못한 것으로 추정된다. 본 문제점을 해결하기 위하여 실험군의 수를 늘리고 외래 유전자에 대한 controllable expression system이 보완될 필요성이 요구되며, 이러한 점이 해결된다면 높은 유전자 전이율에 기인하여 retrovirus를 이용한 형질전환 방법은 형질전환 가금의 생산에 있어서 매우 효율적이고 주목할 만한 방법으로 사료된다.
Canine juvenile cellulitis (CJC) is a well-recognized lymphocutaneous disease that is seen in young dogs. CJC seemed to be immunologic disorder and may have a hereditary aspect. Exact pathogenesis and cytokine regulation on the immune system of CJC are not clear. CJC was diagnosed in two puppies hospitalized in Veterinary Teaching Hospital of Chungbuk National University. To investigate the cytokine regulation on CJC, RT-PCR was performed with CJC affected dogs. RT-PCR 1 was performed with whole blood sample (CJC-B) and fine needle aspirates of the inguinal lymph node (CJC-LN) from case 1-dog, which included $TNF-\alpha,$$IL-1\beta,$$IFN-\gamma,$ IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12 and $\beta-actin.$ Blood sample from a normal dog (N-B) served for a negative control of RT-PCR 1 (case 1). $IFN-\gamma,$ IL-2, IL-4, IL-5, IL-8, IL-10 and IL-12 transcripts were not expressed in all sample. $TNF-\alpha$ and $IL-1\beta,$ were not transcripted from CJC-B but from CJC-LN. On RT-PCR 2 (case 2), submandibular lymph node aspirates were used and $TNF-\alpha,$ IL-10, $IFN-\gamma$ and $IL-1\beta$ were expressed. $TNF-\alpha,$ 1L-10 and $IFN-\gamma$ were secreted from activated macrophages enhance the inflammation in tissue. These results imply that abnormally increased macrophages secret $TNF-\alpha$ and $IL-1\beta$ in the affected lymph nodes, which attract neutrophils and cause inflammation in CJC.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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