International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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v.21
no.2
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pp.163-167
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2010
[ $\alpha$ ]Glucosidase (EC 3.2.1.20) is a glycosidase that hydrolyzes disaccharides, oligosaccharides, and polysaccharides resulting in the release of α-D-glucose. In this study, $\alpha$-glucosidase activity in the hemolymph and midgut of the mulberry silkworm Bombyx mori and Japanese oak silkmoth Antheraea yamamai was measured using maltose, sucrose, trehalose, and p-nitrophenyl $\alpha$-D-glucopyranoside as substrates. In general, hemolymph $\alpha$-glucosidase activity was higher in B. mori than in A. yamamai. In contrast, midgut $\alpha$-glucosidase activity was higher in A. yamamai than in B. mori for all of the substrates tested. $\alpha$-Glucosidase activity in the midgut of both B. mori and A. yamamai showed similar responses to changes in pH and temperature for all of the substrates tested. Native (7.5%) PAGE of hemolymph and midgut proteins from B. mori and A. yamamai followed by staining with 4-methylumbelliferyl $\alpha$-D-glucoside (MUG) indicated that the $\alpha$-glucosidases of these related lepidopterans are functionally similar but structurally different. In comparison to $\alpha$-glucosidase activity from A. yamamai, $\alpha$-glucosidase activity from B. mori was generally less sensitive to the $\alpha$-glucosidase inhibitors, 1-deoxynojirimycin (DNJ), acarbose, and voglibose when the activity was determined using maltose, sucrose, and trehalose.
We have already cloned an extracellular $\alpha$-glucosidase gene from Aspergillus niger with oligonucleotide probe synthesized on the basis of the peptide sequences determined previously. The DNA sequence revealed an open reading frame of 895 amino acids split by three introns. We are attempting to construct an A. niger strain deficient in the $\alpha$-glucosidase enzyme activity, which would be useful for the glucoamylase production without contamination by the industrially undesirable $\alpha$-glucosidase. For destruction of the $\alpha$-glucosidase gene, we try to make transformations. A cloned partial $\alpha$-glucosidase gene was introduced into Aspergillus niger, and transformants with suppressed $\alpha$-glucosidase activity were isolated. The transformants were cultured on YPD medium which contained Hygromycin B at 30$\circ$C. The activity of $\alpha$-glucosidase of the suppressed transformants was compared to that of wild type activity. As shown by southern-hybridization, we detected that the transformant was a heterocaryon.
A thermophilic bacterium (strain DG0303) producing a thermostable $\alpha$-glucosidase was isolated from manure and identified as Bacillus sp. Strain DG0303 produced high level of $\alpha$-glucosidase compared with other thermophilic Bacillus strains. The cellular protein patterns were also compared with other Bacillus strains by sodium dodecyl sulfatepolyacrylamide gel electrophoresis(SDS-PAGE). On the basis of 16S rDNA analysis the Bacillus sp. DG0303 was found to be a member of Bacillus rDNA group 5. The optimum temperature for growth was 65$\circ$C and no growth was obtained at 40$\circ$C or 75$\circ$C. The optimum pH for growth was 5.5 to 8.5. $\alpha$-glucosidase activity was produced during growth and most activity was detected in the culture supernatant. The $\alpha$-glucosidase production was constitutive in the absence of carbohydrates. High level of enzyme activity was detected when the culture was grown on medium containing starch. Addition of glucose resulted in the repression of the $\alpha$-glucosidase production. The optimum pH and tempoerature for enzyme activity were pH 5.0 and 65$\circ$C, respectively. When analyzed by zymogram, the culture supernatant showed a single $\alpha$-glucosidase band with a molecular weight of approximately 60,000.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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v.34
no.2
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pp.38-44
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2017
Mulberry leaves containing 1-deoxynojirimycin (DNJ) have been recognized as a potentially important source for prevent or treat hyperglycemia. However, DNJ content of natural mulberry leaf are as low as 0.1%. Thus, the most effective method for increasing ${\alpha}$-glucosidase inhibitory activity with the DNJ high-production is needed. In this study, we investigated the influence of ${\alpha}$-glucosidase inhibitory activity according to different pH values (6-9) and inoculation amounts (0.1-0.5%) when Bacillus subtilis cultured on mulberry leaf powder media. We confirmed that ${\alpha}$-glucosidase inhibitory activity was difference according to culture conditions of different pH values, inoculation amounts, and fermentation times. The results of mulberry leaf fermentation according to pH values and inoculation amounts were shown that the optimal conditions for ${\alpha}$-glucosidase inhibitory activity were defined as pH 7 and 9, inoculation amount 0.4%, and incubation until 2 to 4 days. These results can be provided a basic data for the optimal culture conditions increasing ${\alpha}$-glucosidase inhibitory activity from mulberry leaf fermentation.
We investigated the fibrinolytic and ${\alpha}-glucosidase$ inhibitory activity of 55 wild mushroom methanol extracts. Among them, 14 mushrooms showed fibrinolytic activity. In particular, Amanita virgineoides showed the greatest enzyme activity (3.9 plasmin units/ml) by a fibrin plate assay. The fibrinolytic activities of Suillus pictus and Polypolellus varius were 3.8 plasmin units, and the activity of Gomphus fujisanensis was 2.8 plasmin units. Leccinum extremiorientale and Xerocomus nigromaculatus had the same activity with 2.3 plasmin units. In a ${\alpha}-glucosidase$ inhibitory activity test, Lactarius sp. showed the greatest inhibitory activity at 97.3%. The ${\alpha}-glucosidase$ inhibitory activities of Clitocybe odora, Xerocomus nigromaculatus, Melanoleuca melaleuca, Suillus pictus, and Gyroporus castaneus were 84.3%, 77.9%, 74.6%, 68.7%, and 65.4%, respectively. According to the results, because Suillus pictus and Xerocomus nigromaculatus have strong fibrinolytic and ${\alpha}-glucosidase$ inhibitory activities, the two mushrooms will be used as materials for the development of new biofunctional food.
This study investigated the inhibitory activities of 2-hydroxyquinoline and its analogs against ${\alpha}$-glucosidase and ${\alpha}$-amylase. Based on the $IC_{50}$ values of 2-hydroxyquinoline analogs tested against ${\alpha}$-glucosidase and ${\alpha}$-amylase, 2-hydroxyquinoline had potent inhibitory activity (64.4 and $130.5{\mu}g/mL$, respectively), while 2-methyl-8-hydroxyquinoline showed weakly inhibitory activity (90.7 and $215.4{\mu}g/mL$, respectively). 2-Methylquinoline demonstrated no activity against ${\alpha}$-glucosidase and ${\alpha}$-amylase. In conclusion, 2-hydroxyquinoline analogs, with the existence of a methyl group and hydroxyl on quinoline, can be useful as a new diabetes treatment.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.44
no.7
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pp.993-999
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2015
For the purpose of investigating the in vitro antidiabetic activity of a medicinal herb and herb mixture extracts prepared through traditional antidiabetic prescription, this study examined ${\alpha}$-glucosidase inhibitory activity. Tyrosinase, a type I membrane glycoprotein, is synthesized and glycosylated in the endoplasmic reticulum (ER) and Golgi. The enzyme is subsequently transported to melanosomes, where it participates in melanogenesis. Previous studies showed that disruption of early ER N-glycan processing by an ${\alpha}$-glucosidase inhibitor suppresses tyrosinase enzymatic activity and melanogenesis. According to the results, most oriental medicinal herbal extracts were stronger than acarbose and N-butyldeoxynojirimycin, known as an ${\alpha}$-glucosidase inhibitor. Interestingly, ethyl acetate layer of enzyme hydrolyzed Cheongsimyeonjaeum had an inhibitory effect on melanin synthesis in B16F1 cells, although it did not inhibit tyrosinase activity directly. Together, ${\alpha}$-glucosidase inhibition activity could be used to evaluate anti-melanogenesis, although cross-checking with melanin inhibitory assay is recommended.
For the production of nonprotein $\alpha$-glucosidase inhibitor from the Streptomyces sp. NS15 strain, effects of initial optimum pH, nitrogen sources, carbon sources, cationic metal ions, agitation speed and aeration rate were investigated. Initial optimum pH of medium was 7.0. The most effective nitrogen and carbon sources were soybean meal 2.0%(w/v) and glucose 1.6%(w/v), respectively. The cationic metal ins had no stimulating effect on inhibitory activity of $\alpha$-glucosidase except Fe2+. Agitation speed and aeration rate were effective at 400rpm and 1vvm, respectively. In the jar-fermenter cultivation for 4 days under optimal culture conditions, the culture broth showed the inhibitory acitivity of 3,200units/ml, which is 25 times higher than that of basic medium (CYM) for porcine intestinal $\alpha$-glucosidase. The inhibitory activity of $\alpha$-glucosidase reached about 3,200units/ml after 4 days of cultivation and decreased gradually for a further two days.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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v.15
no.2
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pp.161-164
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2007
While searching for ${\alpha}$-glucosidase inhibitors, the active compound was found in a methanol extract of Burthus martensi Kirsch. The separation of the active compound was performed using various chromatography methods and the physico-chemical properties of the purified compound were characterized. The compound showed very potent inhibitory activity against ${\alpha}-glucosidase$ with an $IC_{50}$ value of $5.3\;{\mu}g/ml$. Lineweaver-Burk plot indicated that its inhibition of ${\alpha}-glucosidase$ was competitive.
Kim, Misook;Kim, Eunji;Kwak, Han Sub;Jeong, Yoonhwa
Nutrition Research and Practice
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v.8
no.5
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pp.602-606
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2014
BACKGROUND/OBJECTIVES: We investigated total 26 ingredients of Saengshik which will be commercially produced as an anti-diabetic dietary supplement. SUBJECTS/METHODS: Thirteen vegetables, nine cereals, three legumes and one seed were extracted with aqueous ethanol for 2 h at $60^{\circ}C$, and evaluated for their inhibitory effects against ${\alpha}$-amylase and ${\alpha}$-glucosidase and for total phenolic and flavonoid contents. RESULTS: All ingredients inhibited ${\alpha}$-amylase activity except cabbage. Strong inhibitory activity of ${\alpha}$-amylase was observed in leek, black rice, angelica and barley compared with acarbose as a positive control. Stronger inhibition of ${\alpha}$-glucosidase activity was found in small water dropwort, radish leaves, sorghum and cabbage than acarbose. All Saengshik ingredients suppressed ${\alpha}$-glucosidase activity in the range of 0.3-60.5%. Most ingredients contained total phenols which were in the range of 1.2-229.4 mg gallic acid equivalent/g dried extract. But, total phenolic contents were not observed in carrot, pumpkin and radish. All ingredients contained flavonoid in the range of 11.6-380.7 mg catechin equivalent/g dried extract. CONCLUSIONS: Our results demonstrate that Saengshik containing these ingredients would be an effective dietary supplement for diabetes.
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