A total of 1033 Brown Swiss and 610 Canadienne cows were phenotyped for the genetic variants ${\alpha}_{s1}$-casein, ${\beta}$-casein, ${\kappa}$-casein, ${\beta}$-lactoglobulin and ${\alpha}$-lactalbumin. In Brown Swiss, frequency distributions were: 97.3% B and 2.7% C variant of ${\alpha}_{s1}$-casein; 31.6% $A^1$, 51.8% $A^2$, 0.5% $A^3$ and 16.1% B variant of ${\beta}$-casein; 70.4% A, 29.3% B, and 0.3% C variant of ${\kappa}$-casein; 41.7% A and 58.3% B variant of ${\beta}$-lactoglobulin; and 100% B variant of ${\alpha}$-lactalbumin. Corresponding frequencies in Canadienne for those five milk proteins were: 98.6 and 1.4%;58.5, 33.5, 0.08 and 7.9%; 78.8, 21.1 and 0.1%, 42.4 and 57.6%; and 100%. Analysis of variance by least squares showed possible association between milk protein phenotypes and some lactational production traits. There were no significant association of phenotypes of ${\alpha}_{s1}$-casein, ${\beta}$-casein and ${\beta}$-lactoglobulin with milk yield, fat yield, protein yield, fat percentage and protein percentage in both breeds during the three lactations. In the Brown Swiss, ${\kappa}$-casein phenotype was associated with 305-day fat yield and protein yield during the first lactation. ${\kappa}$-Casein AB was associated with higher milk, fat and protein yield during the second lactation. During the third lactation, ${\beta}$-lactoglobulin AA in Canadienne cows was associated with higher protein content in the milk (3.70%) when compared to phenotypes AB (3.54%) and BB (3.64%).
Whey proteins in milk were analyzed by polyacrylamide gel electrophoresis and compared with respect to electrophoregrams, densitograms and concentrations of whey proteins in raw and market milk classified according to 3 kinds of pasteurization by low temperature long time. high temperature short time and ultra-high temperature short time. Relative composition of major whey protein constituents such as bovine serum albumin, ${\alpha}\;-\;lactalbumin\;and\;{\beta}-lactoglobulin$ in raw milk were 3.71:11.44:84.85 and not affected by low temperature long time and high temperature short time pasteurization, even though there were the tendencies of some declining in the actual concentrations. But by ultra-high temperature short time pasteurization compositions of whey protein were changed to 0: 64.75: 35 in which reflected the disapprearance of bovine serum albumin and the extensive decrease of ${\beta}-lactoglobulin$. Storage of low temperature pasteurized milk at $5^{\circ}C$ resulted in a slight decrease of ${\alpha}\;-\;lactalbumin\;a\;{\beta}-lactoglobulin$, but storage at $25^{\circ}C$ did not make any changes until3rd days of storage. Most of whey proteins in high temperature short time pasteurized milk were not affected during storage at $5^{\circ}C\;and\;25^{\circ}C$, but bovine serum albumin and ${\alpha}\;-lactalbumin$ diminished in 2-3 days of storage. Whey proteins of milk treated with ultra-high temeperature were not affected during storage at $5^{\circ}C\;and\;25^{\circ}C$ except a slight decrease of ${\alpha}\;-lactalbumin$ in 2nd day of storage at $5^{\circ}C$.
Ha, Ho-Kyung;Kim, Jin Wook;Lee, Mee-Ryung;Jun, Woojin;Lee, Won-Jae
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.28
no.3
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pp.420-427
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2015
It is necessary to understand the cellular uptake and cytotoxicity of food-grade delivery systems, such as ${\beta}$-lactoglobulin (${\beta}$-lg) nanoparticles, for the application of bioactive compounds to functional foods. The objectives of this study were to investigate the relationships between the physicochemical properties of ${\beta}$-lg nanoparticles, such as particle size and zeta-potential value, and their cellular uptakes and cytotoxicity in Caco-2 cells. Physicochemical properties of ${\beta}$-lg nanoparticles were evaluated using particle size analyzer. Flow cytometry and confocal laser scanning microscopy were used to investigate cellular uptake and cytotoxicity of ${\beta}$-lg nanoparticles. The ${\beta}$-lg nanoparticles with various particle sizes (98 to 192 nm) and zeta-potential values (-14.8 to -17.6 mV) were successfully formed. A decrease in heating temperature from $70^{\circ}C$ to $60^{\circ}C$ resulted in a decrease in the particle size and an increase in the zeta-potential value of ${\beta}$-lg nanoparticles. Non-cytotoxicity was observed in Caco-2 cells treated with ${\beta}$-lg nanoparticles. There was an increase in cellular uptake of ${\beta}$-lg nanoparticles with a decrease in particle size and an increase in zeta-potential value. Cellular uptake ${\beta}$-lg nanoparticles was negatively correlated with particle size and positively correlated with zeta-potential value. Therefore, these results suggest that the particle size and zeta-potential value of ${\beta}$-lg nanoparticles play an important role in the cellular uptake. The ${\beta}$-lg nanoparticles can be used as a delivery system in foods due to its high cellular uptake and non-cytotoxicity.
Genetic variants of ${\alpha}s_1$-casein, ${\beta}$-casein, ${\kappa}$-casein and ${\beta}$-lactoglobulin were investigated by starch urea gel electrophoresis in milk samples of 280 Korean native cattle. A new ${\beta}$-casein variant, designated ${\beta}$-casein $A^4$, was found in milk samples of Korean native cattle. It has a much slower electrophoretic mobility than the ${\beta}$-casein $A^3$ variant in acid gel. This new variant appeared together with either ${\beta}$-casein $A^1$, $A^2$ or B variant. Gene frequencies and genotypic frequencies were estimated. Gene frequencies of four milk protein loci in Korean native cattle were compared with those of imported cattle breeds raised in Korea and Japanese brown cattle. Gene frequencies were ${\alpha}s_1$-casein B .846, ${\alpha}s_1$-casein C .154; ${\beta}$-casein $A^1$ .216, ${\beta}$-casein $A^2$ .666, ${\beta}$-casein $A^4$ .048, ${\beta}$-casein B .070; ${\kappa}$-casein A .648, ${\kappa}$-casein B .352; ${\beta}$-lactoglobulin A .148, ${\beta}$-lactoglobulin B .852. The population was in Hardy-Weinberg equilibrium at all milk protein loci. Gene frequencies of Korean native cattle were very similar to those of Japanese brown cattle. Interestingly, a new variant, ${\beta}$-casein $A^4$, was found only in Korean native cattle and Japanese brown cattle. These results support the hypothesis that Korean native cattle were used in the development of the Japanese brown cattle.
The aims of this research were to produce oil-in-water ${\beta}$-lactoglobulin/alginate (${\beta}$-lg/Al) nanoemulsions loaded with coenzyme $Q_{10}$ and to investigate the combined effects of heating temperature and alginate concentration on the physicochemical properties and encapsulation efficiency of ${\beta}$-lg/Al nanoemulsions. In ${\beta}$-lg/Al nanoemulsions production, various heating temperatures (60, 65, and $70^{\circ}C$) and alginate concentrations (0, 0.01, 0.03, and 0.05%) were used. A transmission electron microscopy was used to observe morphologies of ${\beta}$-lg/Al nanoemulsions. Droplet size and zeta-potential values of ${\beta}$-lg/Al nanoemulsions and encapsulation efficiency of coenzyme $Q_{10}$ were determined by electrophoretic light scattering spectrophotometer and HPLC, respectively. The spherically shaped ${\beta}$-lg/Al nanoemulsions with the size of 169 to 220 nm were successfully formed. The heat treatments from 60 to $70^{\circ}C$ resulted in a significant (p<0.05) increase in droplet size, polydispersity, zeta-potential value of ${\beta}$-lg/Al nanoemulsions, and encapsulation efficiency of coenzyme $Q_{10}$. As alginate concentration was increased from 0 to 0.05%, there was an increase in the polydispersity index of ${\beta}$-lg/Al nanoemulsions and encapsulation efficiency of coenzyme $Q_{10}$. This study demonstrates that heating temperature and alginate concentration had a major impact on the size, polydispersity, zeta-potential value and encapsulation efficiency of coenzyme $Q_{10}$ in ${\beta}$-lg/Al nanoemulsions.
Objective: The aim of the study was to find a possible association between the ${\beta}-$ and ${\kappa}-casein$ and ${\beta}-lactoglobulin$ genotypes and important milk physiochemical and technological characteristics such as acidity, alcohol stability, the contents of some minerals and the parameters of acid fermentation ability (FEA) in Czech Fleckvieh Cattle. Methods: Milk and blood samples were collected from 338 primiparous Czech Fleckvieh cows at the same stage of lactation. The genotypes of individual cows for ${\kappa}-casein$ (alleles A, B, and E) and ${\beta}-lactoglobulin$ (alleles A and B) were ascertained by polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism, while their ${\beta}-casein$ (alleles $A^1$, $A^2$, $A^3$, and B) genotype was determined using melting curve genotyping analysis. The data collected were i) milk traits including active acidity (pH), titratable acidity (TA), alcohol stability (AS); calcium (Ca), phosphorus (P), sodium (Na), magnesium (Mg), and potassium (K) contents; and ii) yoghurt traits including active acidity (Y-pH), titratable acidity (Y-TA), and the counts of both Lactobacilli and Streptococci in 1 mL of yoghurt. A linear model was assumed with fixed effects of herd, year, and season of calving, an effect of the age of the cow at first calving and effects of the casein and lactoglobulin genotypes of ${\beta}-CN$ (${\beta}-casein$, CSN2), ${\kappa}-CN$ (${\kappa}-casein$, CSN3), and ${\beta}-LG$ (${\beta}-lactoglobulin$, LGB), or the three-way interaction between those genes. Results: The genetic polymorphisms were related to the milk TA, AS, content of P and Ca, Y-pH and Lactobacilli number in the fresh yoghurt. The CSN3 genotype was significantly associated with milk AS (p<0.05). The effect of the composite CSN2-CSN3-LGB genotype on the investigated traits mostly reflected the effects of the individual genes. It significantly influenced TA (p<0.01), Y-pH (p<0.05) and the log of the Lactobacilli count (p<0.05). Conclusion: Our findings indicate that the yoghurt fermentation test together with milk proteins genotyping could contribute to milk quality control and highlight new perspectives in dairy cattle selection.
The study was carried out on eight Bos indicus cattle breeds namely, Sahiwal, Tharparkar, Nimari, Khilari, Deoni, Amritmahal, Hariana and Hilly cattle; two Bos taurus cattle breeds namely, Jersey and Holstein Friesian and Indicine${\times}$Taurine crossbred cattle to find out the polymorphic pattern of beta-lactoglobulin gene. The polymorphism at beta-lactoglobulin gene was detected by conducting PCR-RFLP studies on 398 bp fragment spanning over 104 bases of exon IV and 294 bases of intron IV. Two alleles A and B and three genotypes AA, AB and BB were observed in all the cattle breeds. The frequency of B allele was comparatively higher than that of A allele. The allelic frequency of A varied from 0.20 to 0.30 in Bos indicus cattle breeds and 0.19 to 0.34 in Bos taurus breeds while in crossbred cattle the frequency was estimated as 0.21. The weighted frequency of A allele was highest in Indian cattle and lowest in crossbred cattle while the frequency in taurine cattle was found to be in between indicus and crossbred cattle. The non-significant differences of allelic frequency amongst Bos indicus, Bos taurus and crossbred cattle was observed. The effect of genotype on fat percentage was also found to be non-significant in cattle.
In order to study the reaction behaviors of bovine $\alpha$-lactalbumin ($\alpha$-La), $\beta$-lactoglobulin ($\beta$-Lg), and their mixtures during heat treatment, samples were analyzed using native-polyacrylamide gel electrophoresis (Native-PAGE), sodium dodecylsulfate (SDS)-PAGE, and two-dimensional (2-D)-PAGE. The electrophoresis demonstrated that the loss of native-$\alpha$-La increased as temperature increased, and that the loss of apo-$\alpha$-La was slightly higher than that of holo-$\alpha$-La. The tests also showed that during heat treatment, a mixture of $\alpha$-La and $\beta$-Lg was less stable than $\alpha$-La alone. As such, it was assumed that $\beta$-Lg induced holo-$\alpha$-La to be less stable than apo-$\alpha$-La during heat treatment. The reaction behavior of $\alpha$-La (holo-, apo-form) during heat treatment showed similar patterns in the 2-D-PAGE electropherogram, but the mixture of $\alpha$-La and $\beta$-Lg created new bands. In particular, the results showed a greater loss of native $\alpha$-La in the holo-$\alpha$-La and $\beta$-Lg mixture than in the apo-$\alpha$-La and $\beta$-Lg mixture. Thus, it can be concluded that the holo-$\alpha$-La and $\beta$-Lg mixture was more intensively affected by heat treatment than other samples, and that free sulphydryl groups took part in the heat-induced denaturation.
This study was analyzed by PCR technique with specific primer in order to investigate the characteristics of ${\beta}$-lactoglobulin (${\beta}$-LG) gene 5'flanking region in Korean native goat. This work confirmed amplified product of 1,077 bp fragments obtained from the amplification of ${\beta}$-LG promoter from genomic DNA using PCR in Korean native goat. The nucleotide sequence of ${\beta}$-LG gene 5'flanking region in Korean native goat as compared with that of sheep ${\beta}$-LG were different at 46 base of 897 nucleotides, and showed high homology as about 94.9% each breed. Especially we confirmed that the difference of nucleotide sequences between Korean native goat and sheep were consisted of $T{\rightarrow}C$ substitution and $C{\rightarrow}T$ substitution reversely. As a consequences, the sequences of ${\beta}$-LG gene 5'flanking region showed a high homology between Korean native goat and sheep. Furthermore we should be studied that relationships between the control of gene expression and nucleotide sequences of transcription factor in Korean native goat.
Immunoblotting and competitive indirect enzyme-liked immunosorbent assay(Ci-ELISA) was used for detection of ${\beta}$-lactoglobulin(BLG) in dairy products, such as milk, dried milk and fermented milk. In immunoblotting, human IgE weakly recognized proteins of fermented milk, but still responded to dried milk even though become weak. Rabbit polyclonal antibody to BLG, used as a model of antigen, and milk allergic patients' IgE was used in the ELISA. Reactivities of Abs were the highest in market milk. BLG in fermented milk was detected in a low content. This result indicates the fermented milk have the lowest BLG content and could be used as hypo-allergenic food for milk-allergic individual.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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