The Effects of Aprotinin Addition and Plastic Tube Usage for Glucagon Test Results

Glucagon 검사시 Aprotinin 첨가와 Plastic tube 사용이 미치는 영향

Purpose: There are 3 warnings for Glucagon tests. First, EDTA tubes that already contain Aprotinin must be used for plasma collection. Second, for freezer storage of centrifuged plasma, glass tubes must be used. Last, glass tubes must be used for testing procedure. So we compared the glucagon results of next 3 situation to those of control group. First, We compared to results by tubes without Aprotinin and with aprotinin. Second, we compared to results by tubes(plastic vs glass) for plasma storage. Third, we compared to results by tubes(plastic vs glass) for testing. We tried to evaluate the results of the 3 different condition. Materials and Methods: 40 healthy adults were studied with normal results on the general medical check up and laboratory tests. We compared the results of 3 different condition belows: Blood were collected in EDTA tube containing aprotinin and plasma was stored in the glass tube for 3 days in a freezer and results were obtained by tests in the glass tubes. Results from EDTA plasma without aprotinin, results from platic tubes for freezer stroage, results from plastic tube when testing. Simple linear regression analysis and paired t-test using SPSS were done for statistical analysis. Commercial glucagon kit(RIA-method)which made by Siemens company were used. Results: Correlation coefficient between results of EDTA tubes with Aprotinin vs without Aprotinin was r=0.783 (p=0.064). Result of specimen in plastic tubes stored 3 days in a freezer showed lower value compared to those in glass tube(r=0.979, p=0.005). Also, results of testing in plastic tubes showed lower values than those testing in glass tubes. (r=0.754, p<0.001). Conclusion: It is recommended for glucagon determination to use EDTA tube with Aprotinin which is a inhibitor of protein breakdown enzyme. Results of plastic tube when storage and testing showed lower value than those of glass tubes, so it is recommended to store and test in glass tubes.

Glucagon은 췌장 Langerhans섬 ${\alpha}$-세포에서 합성 분비되며, 기능으로는 간 당원분해, 지방분해, 인슐린분비 촉진 작용 등이 있다. Glucagon의 측정은 Glucagon 과잉증에 의한 당뇨병, 특발성 Glucagon 결손증, 불안정 당뇨병에서 저혈당의 진단을 하기위해 실시된다. Glucagon 측정시 세 가지 주의를 요하는데, 첫째, Aprotinin이 첨가된 EDTA tube에 채혈해야 하고 둘째, Plasma를 분리하여 Glass tube에 냉동 보관하여야 하고, 마지막으로 검사시에도 Glass tube에서 측정을 해야 한다. 이에 우리는 EDTA tube에 Aprotinin의 유무에 따른 결과 비교, 검체 보관 용기의 차이에 따른 비교(Plastic tube/ Glass tube), 측정용기에 따른 비교(Plastic tube/Glass tube)를 하여, 세 가지가 결과에 미치는 영향을 알아보고자 한다. 성별 구분 없이 건강검진에서 정상 소견을 보인 성인 40명을 대상으로 실험하여 대조군과 세가지 다른 실험군의 Glucagon 결과를 비교하였다. Aprotinin첨가한 EDTA 용기에 채혈 후, 검체를 Glass tube에 3일 냉동 보관하여 Glass tube에서 실험(대조군)한 결과와 Aprotinin첨가하지 않은 EDTA 용기에 채혈한 결과(실험군1), Plastic tube에 3일 냉동 보관한 후의 결과(실험군2), Plastic tube에서 실험(실험군3)한 결과를 비교하였다. 통계적인 분석은 SPSS를 이용한 paired t-test와 단순선형회귀분석을 실시하였고 시약은 상품화된 Siemens사의 Glucagon RIA kit를 사용하였다. Aprotinin이 첨가된 EDTA 용기에 채혈하여 실험한 결과와 Aprotinin이 첨가되지 않은 EDTA용기에 채혈하여 실험한 상관계수는 r=0.783(p=0.064)를 보였다. 검체 분리 후 Plastic tube에서 3일 냉동 보관하여 실험한 결과는 Glass tube의 결과에 비해서 유의하게 낮게 나타났다(r=0.979, p=0.005). 또 측정 시 Plastic tube를 사용한 결과도 Glass tube에서 실험한 결과보다 유의하게 낮게 나타났다(r=0.754, p<0.001). Glucagon 검사 시에는 단백 분해효소 억제제인 Aprotinin이 첨가된 EDTA tube 사용이 권장되며, Plastic tube 사용 시 환자의 결과가 유의하게 낮게 나타나므로 검체는 분리 후 Glass tube에 냉동 보관하고 Glass tube에서 실험하여야 한다.