Korean Journal of Microbiology (미생물학회지)

The Microbiological Society of Korea (한국미생물학회)
권호 표지

Identification of Secretion Signals of Target Proteins in Salmonella enterica serovar Typhimurium and Construction of Secretion Vector using this Signal

Salmonella enterica serovar Typhimurium에서 Type III 분비장치의 표적단백질들의 분비신호 확인 및 Type III 분비장치를 이용한 Secretion Vector의 개발

  • Choi, Hyuk-Jin (Graduate School of Biotechnology, Korea University) ;
  • Eom, Joon-Ho (Graduate School of Biotechnology, Korea University) ;
  • Cho, Jung-Ah (Graduate School of Biotechnology, Korea University) ;
  • Lee, Sun (Dept. of Microbiology, Hannam University) ;
  • Lee, Kyoung-Mi (Dept. of Microbiology, Hannam University) ;
  • Lee, In-Soo (Dept. of Microbiology, Hannam University) ;
  • Park, Yong-Keun (Graduate School of Biotechnology, Korea University)
  • 최혁진 (고려대학교 생명공학원) ;
  • 엄준호 (고려대학교 생명공학원) ;
  • 조정아 (고려대학교 생명공학원) ;
  • 이선 (한남대학교 미생물학과) ;
  • 이경미 (한남대학교 미생물학과) ;
  • 이인수 (한남대학교 미생물학과) ;
  • 박용근 (고려대학교 생명공학원)
  • Published : 2000.12.01
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Abstract

Invasion process of bacterial cell into intestinal epithelium is important in Salmonella infection. The invasion is induced by the proteins secreted by type III secretion appratus of Salmonella. It has been known that the proteins do not have N-terminal signal peptide existing in general secreted proteins. Recent studies on Yersinia reported that secretion signal of type III appratus may lie on 5'end secondary structure of mRNA of secreted protein. In this study, we constructed translational fusion of ompR and sopE, encoding type III secretion protein of Salmonella, and observed secretion of the fusion protein for investigating the secretion signal of Salmonella type III appratus. The sopE DNA fragments of the translational fusion contain the region of promoter and from start code to tenth or to fifth code. These translational fusions indicate that type III secretion signal of Salmonella is located on 5'end of mRNA encoding secreted protein. We constructed prototype of secretion vector using this signal to produce useful foreign protein.

소장의 상피세포내로 세균 세포가 들어가는 과정(invasion)은 Salmonella의 감염에서 중요한 단계이다. invasion은 Salmonella type III 분비장치에 의해 분비되는 단백질들에 의해 유도된다. type III 분비단백질들은 특이하게, 일반적인 분비단백질들이 가지는 N-말단 분비 신호 펩타이드를 가지고 있지 않는 것을 알려져 있다. Yersinia에서의 최근 연구에서 type III 분비장치에 의해 인지되는 분비신호는 분비 단백질을 암호화하는 mRNA의 5'말단부의가 형성하는 2차 구조에 있을 것이라는 보고가 있다. 본 연구에서는 Salmonella type III 분비장치의 분비신호를 조사하기 위해 type III 분비단백질중 하나인 sopE를 택하여 ompR과의 translational fusion을 만들었다. translational fusion을 위해 사용된 sopE DNA절편은 프로모터와 시작 콘돈으로부터 10, 15 코돈을 포함하는 절편이다. Immunoblot으로 확인한 결과, OmpR을 포함하는 fusion 단백질이 형질전환 Salmonella 세포로부터 분비되었다. 이러한 결과는 Salmonella의 type III 분비신호가 분비단백질을 암호화하는 mRNA의 5'말단에 위치할 가능성을 제시하고 있다. 또한, 이러한 분비신호를 활용하여 유용한 외래 단백질을 세균 세포 내에서 효과적으로 생산, 분비할 수 있는 secretion vector의 원형을 개발하였다.

Keywords

References

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