Phage Particle Proteins and Genomic Characterization of the Lactobacillus plantarum Bacteriophage SC 921.

Lactobacillus plantarum Bacteriophage SC 921의 phage particle protein 및 genome의 특성

Bacteriophage SC 921 of Lactobacillus plantarum, isolated from kimchi, showed high lytic effects at 0.2 M.O.I. level. The phage particle contained 4 major proteins (48, 34, 32, 29 kDa). Intact DNA of phage SC 921 is a double stranded linear molecule, and the genomic size is approximately 66.5 kilobase pairs (kbp). Restriction analysis of the genome showed that Sma I gave single site cut and Xba I gave 2 site cuts, while Cla I, Kpn I, and EcoR I formed 4, 5, and 6 cuts, respectively. Hind III digested phage DNA to many fragments. A restriction map of genomic DNA was constructed using the restriction endonuclease Kpn I, Sma I, and Xba I. Bacteriophage SC 921 was compared with B2 phage which had been reported to infect Lactobacillus plantarum ATCC 8014(KCCM l1322). Bacteriophage SC 921 differs from B2 phage at least in thr size of its genome and phage particle proteins.

김치로부터 분리한 Lactobacillus plantarum bacteriophage SC 921은 M.O.I가 0.2일 경우 용균효과가 빠르게 진행됨을 알 수 있었고, SDS-PAGE를 실시하여 phage particle protein을 조사해 본 결과 4개의 major protein으로 구성되어 있는데 이들은 각각 48, 34, 32, 29 kDa으로 구성되어 있다. Exo III로 30분간 반응시킨 후 S1 nuclease를 처리하여 DNA의 형태를 조사해 본 결과 intact DNA는 linear form의 double strand를 유전전달 물질로 가지고 있었다. 제한효소에 대한 절단 효과를 조사한 결과, Sma I에 대해서 1개, Xba I, Cla I, Kpn I, EcoRI에 대해서 각각 2, 4, 5, 6개의 절단부위를 가지고 있으며, Hind III에 대해서는 절단부위가 매우 많은 것을 알 수 있었다. Hind III를 이용하여 intact DNA의 genome size를 측정해본 결과 약 66.5 kbp정도였다. 위의 실험결과와 restriction enzyme mapping을 통해 기존에 알려진 bacteriophage B2와 비교해본 결과 숙주 균주는 같으나 단백질적인 구조나 유전전달물질로 본 구조는 서로 다름을 알 수 있었다.