Intersubgeneric Protoplast Fusion of Pelargonium aridum (Ligularia) and P.zonale(Ciconium)

Pelargonium aridum과 P. zonale 아속간의 원형질체융합

In an attempt to obtain intersubgeneric somatic hybrids of Pelargonium aridum and P.zonale, protoplast isolated from the two species were fused by using polyethylene glycol(PEG) and electorfusion methods. Protoplast were isolated from cotyledon and leaf tissues using MS medium containing 550 mM sucrose, 0.7% cellulase (Onozuka R-10) and 0.4% Macerozyme. The optimum number of protoplasts per mL of culture medium was 6 x 10$^4$. Protoplast fused by the electrofusion method were more active than by PEG method. Heterokaryotically fused protoplasts formed calli when cultured in MS medium containing 550 mM glucose, 1 to 2 mg/L NAA and 0.5 to 1 mg/L BA.

Pelargonium aridum과 P. zonale 아속간의 체세포 잡종을 얻기 위하여 이들로부터 원형질체를 유리하여 polyethylene glycol (PEG)와 electrofusion 방법으로 융합시켰다. 원형질체는 자엽과 본엽을 550 mM sucrose, 0.7% cellulase (OnozukaR-10), 0.4% Macerozyme이 함유된 MS 배지로 유리하였다. 배양밀도는 배지 mL당 원형질체수는 6 x $10^4$이 배양에 적당하였다. Electrofusion 방식으로 융합된 원형질체는 PEG방식으로 융합된 것보다 세포분열이 덜 활발하였다. 두종간의 원형질융합체는 550mM glucose, 1~2 mg/L NAA와 0.5~l mg/L BA가 함유된 M 배지에서 배양하였을 때 캘러스를 형성하였다.