Protoplast Isolation and Reversion from Agrocybe cylindracea

Agrocybe cvzindracea의 원형질체 분리 및 환원

The isolation and regeneration of protoplasts are necessary for protoplast fusion of edible mushrooms. In this study, over 5$\times$107 ml-1 protoplasts of Agrocybe cylindracea were isolated using the method described by Yanagi. Enzyme mixture of cellulase Onozuka R10(2%), chitinase (0.2%) and Novozym 234(0.1%) was most effective for the isolation of protoplasts and the yield of protoplasts was 4.85$\times$107 ml-1. 0.6M sucrose was the most effective osmotic stabilizer. The maximum amount of mycelia and yield of protoplasts were obtained from 5~7 days cultured mycelia. In the case of 5~7% days cultured mycelia, the digestion time with lytic enzyme was 4~6 hours. ACM and MCM medium were most effective for the regeneration and reversion of protoplasts, and reversion frequency was 6.9~7.0%. 0.6M sucrose was most stable osmotic stabilizer.

Pseudomonas elodea 에 의한 Gellan gum생산시 이에 관련된 기초자료를 얻기 위하여 회분식 및 연속식 발효를 하였다. 회분식 배양의 결과로부터 비성장 속도는 $0.16hr^-^1$이었으며 72시간 배양후의 점도는 4500cp, 생성물 농도 0.7g dry weught/100g broth, 및 생산성은 0.08g dry weight/1/hr이었다. 연속식 배양을 통하여 최적 탄소원과 질소원의 농도비(3.0mg-carbon/mg-nitrogen)를 결정하였으며 Gellan gum의 최대 생성속도는 희석율 $0.14hr^-^1$에서 0.6g dry weight/l/hr이었다. 이러한 조건에서 각종 metabolic paeameter값을 계산하였다. 또한 배양액의 유변학적 특성은 Casson equation에 잘 부합됨을 확인하였고, 배양액의 점도와 산소전달계수를 측정하여 고점도 배양시 산소전달의 장애현상을 조사하였다.