항암제 내성 위암 세포주 SNU-1의 내성생성기전에 관한 연구

Study for Metabolism of Resistant Production in Anticancer drug Resistant Stomach Cancer Cell SNU-1

암의 화학요법에 있어서 내성생성으로 인한 치료의 장애가 암 치료 실패의 중요 원인이 되며, 분 연구는 암세포의 항암제에 대한 내성 생성에 대한 특성을 연구 보고하였다. 사람의 위암 세포주 SNU-1에 대한 내성 유발을 위하여 세포배양액에 adriamycin(ADR) 농도를 $10^{-8}M$에서 $10^{-7}M$에 까지 적용시켜 내성세포주를 얻어 SUN-1/ADR로 나타내었으며 세포 성장은 SUN-1에서는 2일부터 6일까지 서서히 상승하였고 SNU-1/ADR은 $5{\times}10^3$celles/ml 농도 이상에서 상승을 보였다. 각 세포의 doubling 시간과 doubling 수를 비교하였으며 SNU-1은 doubling 시간이 평균 27.2 시간 doubling 수가 3.56번 이었으며, SNU-1/ADR은 52.2 시간 1.85번으로 내성세포가 더욱 성장이 왕성한 것을 관찰할 수 있다. MTT assay를 위하여 4일간의 성장으로 세포의 적절한 생존도를 관찰하였다. SNU-1과 내성세포주 SNU-1/ADR을 각각 항암제에 대한 약제 감수성 검사를 실시하였으며 약제농도 50%에서 생존도($IC_{50}$)를 비교하여 상관내성도(relative resistance : RR)을 측정 하였으며 vinblastine이 31.62이상으로 가장 높고, vincristine이 29.5, dactinomycin 21.37, epirubicin 17.78, daunorubicin 14.12였고, adriamycin 7.76이었으며 etoposide 4.46 이었다. 그 외의 약제 5-fluorouracil, cisplatin, cyclophosphamide, methotrexate, aclarubicin은 감수성이 낮았다. 위의 결과로 RR가 높은 약제들에 대해서는 multidrug resistance(복합내성)의 존재를 의미한다고 할 수 있으며 내성생성 SNU-1/ADR 세포주의 염색체의 검사에서 double minute chromosome(DMs)을 확인함으로서 내성 생성 세포를 확인 하였다.

Development of drug resistance in tumors during treatment is a major factor limiting the clinical use of anticancer agents. When tumor cells acquire resistance to anticancer drug, they show cross-resistance to other antitumor agents. In the present study, SNU-1 cell was induced adriamycin $10^{-7}M$ drug resistance, SNU-1/ADR, in vitro culture system. We got the doubling time and number for viability test during 96 hours by MTT assay. To investigate the cross resistance of various anticancer drugs in human stomach cancer cell SNU-1 and SNU-1/ADR. We compared $IC_{50}$ (drug concentration of 50% reduction) and the relative resistance(RR). SNU-1/ADR was expressed multidrug resistant with vinblastine(RR ; 31.62), vincristine(RR ; 29.50), dactinomycin(RR ; 21.37), epirubicin(RR ; 17.78), daunorubicin(RR ; 14.12), adriamycin(RR ; 7.76), and etoposide(RR ; 4.46), and other drugs, 5-fluorouracil, cisplatin, cyclophosphamide, methotrexate, and aclarubicin, have not cross resistant with adriamycin. There was double minute chromosome in SNU-1/ADR by karyotyping although this change was not seen in SNU-1.