Induction of Ribosomal Ribonuclease during Catabolic Repression in Saccharomyces uvarum

Saccharomyces uvarum의 Catabolic Repression 시기에 유도되는 Ribosomal Ribonuclease에 대한 연구

In order to study subcellular locality and characteristics of ribonuclease in Saccharomyces uvarum, subcelllar fractions $45,000{\times}g$ pellet fraction, post ribosomal fraction and ribosome fraction were extracted during late log, stationary phase and sugar starvation conditions. Ribonuclease activity was significantly increased in ribosomal fraction under stationary and sugar starvation conditions. Ribosomal ribonuclease was extracted by EDTA plus streptomycin sulfate and ammonium sulfate precipitation. The amount of ribosome in stationary and sugar starvation condition was decreased three to six fold as compared to that in the early log phase. The end products of ribosomal ribonuclease were detected by thin layer chromatography. It is postulated that the increase of ribosomal ribonuclease activity under sugar starvation results from 5'-rRNase, while the increase of rRNase activity under stationary phase results from 3'-rRNase.

효모 세포(S. uvarum)를 재료로 하여 배양 시기 및 sugar starvation시기에 특이하게 출현 또는 유도되는 RNase의 localization과 특성을 조사하고자 하였다. 정상 배양 시기 및 sugar starvation시킨 효모 세포를 세포 분획구에 따라 RNase 활성도를 측정하는 한편 ribosome 양의 변화를 조사하였다. 특히 ribosomal 분획구에서 추출한 RNase들을 poly(C)와 반응시킨 후 생성물을 TLC에 적응하여 효소의 특성 및 유도 여부를 조사하였다. 그 결과를 요약하면 다음과 같다. 세포 분획구 중 $45,000{\times}g$ pellet 분획구 및 Postribomosal 분획구에서는 배양 시기나 sugar starvation에 관계없이 RNase의 활성도는 유의하게 증감하지 않았으나, ribosomal 분회구에서는 정체기와 sugar starvation시 활성도가 각각 2배, 10배 이상 급격히 증가하였다. ribosome의 양적 동태를 살펴보면 early log phase의 세포에 비하여, 정체기 세포와 sugar starvation시킨 세포에서는 $1/3{\sim}1/6$까지 급격히 감소하였다. TLC의 결과 rRNase의 종류는 early log phase에서는 oligonuclease와 3'-ribonuclease, 5'-ribonuclease,stationarf phase에서는 oligonuclease, 3'-ribonuclease, sugar starvation 시켰을 때는 3'-ribonuclease, 5'-ribonuclease의 활성이 나타났다. 그리고 완전 배지를 사용한 효모 세포에서는 공통적으로 oligonuclease의 활성이 나타난 반면, sugar starvation시킨 효모 세포에서는 oligonuclease의 활성은 나타나지 않았다.