The development of pale chub oocyte from the immature oogonium to mature oocyte was investigated by light and electron microscope. The cytoplasm of pale chub oogonia was acidic and many vesicles were located at inner side of nuclear membrane. In primary oocytes, yolk vesicles were distributed in cytoplasm. Also, fibrous materials and protuberances were distributed on the surface of zona radiata. The nucleus of secondary oocyte was enlarged and yolk vesicles in cytoplasm migrated to zona radiata. In early egg, yolk mass are formed and yolk vesicles were located at inner side of zona radiata. Three-layered zona radiata was about $3{\mu}m$ in thickness. The three layers were an outer fibrous material layer, a middle nurse cell layer in which microvilli of early egg cytoplasm contact with processes of nurse cells, and an inner layer with high electron density. In mature egg, euchromatin and a germinal vesicle were developed, mitochondria, free ribosomes, and yolk mass were distributed in cytoplasm. But, yolk vesicles were disappeared. Specially, zona radiata of matured eggs were better thin than the one of immature eggs In conclusion, it is summerized that the oogenesis of pale chub were the increase of cell size, the formation and accumulation of yolk, the decrease in nucleat electron density, changes of zona radiata, and the development of microvilli.
미꾸리과 어류 2종 수수미꾸리 Niwaella multifasciata, 좀수수치 Kichulchoia brevifasciata의 성숙란에 대하여 난막구조를 조사하였다. 성숙란의 난막 (egg envelope)은 부착구조 (adhesive structure)가 부착하는 zona radiata externa와 여러 전자밀도층을 가지는 zona radiata interna층으로 구성되어 있다. 수수미꾸리의 zona radiata externa는 짧은 융모형태 (short villus-like protuberance)의 구조를 가지며 길이는 약 1.5~2.5 ${\mu}m$로서 2.0~2.5 ${\mu}m$ 간격으로 배열하고 있었다. 반면에 좀수수치는 물결모양 형태 (wave-like structure)를 가지는데 길이는 약 1.5~2.5 ${\mu}m$ 크기로 서로 2.5~3.3 ${\mu}m$ 간격으로 배열되어 있다.
lksookimia(신칭,참종개속) 어류 5종의 부착막 구조 (adhesive membranes)를 조사하기 위하여 전자현미경으로 성숙란을 조사한 결과, 난황형성시기인 난황구 후기의 zona radiata에는 다음과 같은 3가지 형태의 부착막이 구별되었다. Iksookimia koreensis, I pumila, 그리고 I. hugowolfeldi는 융모형(villous form)을 보였으며, I.longicorpus는 원추모양의 솜 형태(cotton form)을 보여주었으며, I. choii는 덩클모양 (vine form)의 독특한 부착막 구조를 가지고 있었다. I. koreensis와 I pumila,그리고 I. hugowolfeldi는 같은 융모형의 부착막구조를 가지고 있으나 난막의 미세구조는 종간에 뚜렷한 차이를 보여주었다. 또한 참개종속 어류의 난막과 부착막 구조는 그들의 서식처와 산란습성에 관련된 종의 특이성을 보여 주고 있어서 분류학적으로 주목되었다.
This study was carried out to investigate the histomorphological changes of ovaries obtained from 100 of 1-year-old female Korean loach(misgurnus anguillicaudatus). The light microscopic and ultrastructural changes ofooplasm and follicular membranes of oocytes, were observed by lightand transmission electron microscope during the reproductive cycle. All data were collected from November in 1991 to May in 1992. The results obtained in this study were as follows: The size of the nucleoli and number of the yolk granules increased as the oocytes grown. Yolk granules were loosely deposited in the oocytes as crystalline granules. Due to the presence of large early and late maturing oocytes, their ovaries were enlarged, transparent, granular and yellowish in color. The lattice was broken down at hydration, leaving the egg transparent. As the percentages of fish in LMO and RO stage increased from March to April, mean gonadosomatic index(GSI) values(18.49%) increased. Zona radiata change a squamous into cuboid shape in EMO stage. Processes from the granulosa cells and from the oocyte, microvilli grow and make contact with other in the pore canals of the zona radiata during vitellogenesis, but are withdrawn as the zona radiata becomes more compact and devoid of pore canals during oocyte maturation. Seasonal changes in the microscopic appearance of the ovaries were well correlated with those in both GSI and macroscopic appearance.
기름종개속 Cobitis 어류 5종의 부착막의 미세구조(adhesive membrane)를 조사하기 위하여 전자현미경으로 성숙란을 조사한 결과, 난황형성시기인 난황구 후기의 zona radiata에는 다음과 같은 2가지 형태의 부착막 구조가 존재하였다. Cobitis lutheri, C. striata, C. sinensis 그리고 C. sinensis-longicorpus는 과립형(granular form)을 보였으며 C. melanoleuca는 융모형(villous form)을 보였다. 그러나 C. lutheri와 C. striata 그리고 C. sinensis, C. sinensis-longicorpus는 같은 과립형의 부착막구조를 가지고 있으나 이들 과립의 크기와 분포 수 그리고 난막의 미세구조에서 종간에 뚜렷한 차이를 보여주었다. 이러한 기름종개속 어류의 난막과 부착막 구조는 그들의 서식처와 산란습성에 관련된 종의 특이성을 보여 주고 있어서 분류학적으로 주목되었다.
무지개송어 (Oncorhynchus mykiss), 메기 (Silurus asotus) 그리고 미꾸리 (Misgurnus anguillicaudatus)의 성숙 난자의 방사대 (zona radiata) 및 난문의 미세구조적 특징을 광학, 주사 및 투과 전자현미경을 이용하여 조사하였다. 무지개송어와 메기의 난에 있는 난문은 깔대기 형태의 전정과 방사대를 통과하는 끝이 작아지는 통로로 구성되어 있었다. 무지개송어와 메기의 난문은 편평한 구멍과 긴 통로로 구성된 구조를 나타내었다. 메기 난문의 구조는 무지개송어 난문의 구조와 일치되었다. 무지개송어의 난문을 구성하는 내부 벽은 시계방향(우선형)의 구조를 나타내었다. 미꾸리의 난문은 짧은 통로를 지닌 얕은 구멍을 가진 형태를 나타내었고, 시계방향의 반대방향으로 난문의 벽은 방향성율 나타내었다. 미꾸리의 이러한 나선형의 방향은 무지개송어의 방향과 일치하지 않는 것으로 나타내었다. 개구부 바로 주변부에 있는 표면은 실험에 이용된 3가지 어류에서 모두 여러 가지 크기의 작은 구멍이 존재하였다. 상호 연결부위 (ridge)가 모든 어류의 미수정된 난자에서 관찰되었다. 본 논문에서는 난성숙시 난막과 난문의 형태를 알아보기 위해서 3가지 양식어종 난자의 표면형태와 난문의 미세구조를 상호 비교하였다.
This study was carried out to investigate the histomorphological changes and the electrophoretic patterns of egg components, obtained from 100 of 2-year-old female catfishes (Silurus asotus). Female Korean catfishes collected in the vicinity of Chollabukdo have synchronous ovaries which discontinously ovulate eggs during the breeding season (from late May until early July). The fishes were killed by severing the spinal cord just posterior to the head after immobilization with tricaine methanesulfonate (MS 222). Especially, the light microscopic and ultrastructural changes of ooplasm and follicular membranes of oocytes, were examined by means of light and transmission electron microscopy. The size of the nucleoli and number of the yolk granules increased as the oocyte groved. Yolk granules were deposited in the oocyte as fluid Due to tile presence of large early and late maturing oocytes, their ovaries were enlarged, transparent, granular and greenish in color. As the percentages of fish in late maturing oocyte (LMO) and ripe oocyte (RO) stage increased from March to April, mean gonadosomatic index (GSI) values (19.95%) increased. Zona radiata changed from squamous into cuboid in shape in the early maturing oocyte (EMO) stage. Processes, microvilli, from the zona radiata and from the oocyte grow, and make contact with each other in the pore canals of the zona radiata during vitellogenesis, but are withdrawn as the zona radials becomes more compact and devoid of pore canals during oocyte maturation. Seasonal changes in the microscopic appearance of the ovaries were well correlated with those in both gonadosomatic index and macroscopic appearance. The main cytological changes such as increase in size of cell, nucleus, nucleolus, and increase in number of nucleoli and mitochondria demonstrated with electron microscopy in the previtellogenic oocytes of Korean catfish, provided evidences for important synthetic processes in an early preparatory phase of oocyte development. The electrophoretic pattern of major band in mature stage was much thicker (24 k, 66 k, 90-110k dalton) than that in previtellogenic phase.
계절성 번식기 동안에 자성무지개송어 (Oncorhynchus mykiss)의 혈장내 $estradiol-17\beta$, 혈장성분, 전기영동상 그리고 미세구조 변화의 특징을 살펴보았다. 정상적인 자연조건에서 혈장내 $estradiol-17\beta$는 난황형성기(vitellogenic season)말인 9월에 peak를 나타내었고, 산란이 이루어진 시기 이후인 12월에는 서서히 감소하였으며, 난소의 재형성 초기인 2월과 3월에는 급격하게 감소하였다. 이러한 $estradiol-17\beta$의 변화 추이를 볼 때 이 호르몬은 자성 무지개송어에서 혈장내 calcium, phosphorus, glucose, albumin및 total protein수준의 증가에 의해서 증명된 것과 같이 난황전구물질(vitellogenin)의 생성을 자극하는 것으로 나타났다. Latematuring단계 혹은 산란중인 난모세포의 전기영동상(분자량이 각각 약 70,000과 200,000 Da)은 late perinucleolus단계의 난모세포의 전기명동상보다 훨씬 두껍고 진한 경향을 나타내었다. 이 단백질 2개의 전기영동상은 $estradiol-17\beta$ 호르몬 peak와 일치하는 추이를 나타내면서 SDS-PAGE에서 확인되었다. 생식소 숙도지수 일명 성성숙지수, [gonadosomatic indices(GSI)]는 10월로부터 그 이듬해 1월까지 유의성 있게 증가하는 경향을 나타내었고, 성숙난자의 급격한 수적인 증가와 일치하면서 1월에 가장 높은 peak를 나타내었다. 산란 전단계에서 estradiol-17 수준과 CSI간에는 정 (+)의 상관관계 (r=0.701, p<0.01)를 나타내었고, 간숙도지수 [hepatosomatic index (HSI)]는 번식시기인 12월에 가장 높은 수치를 나타내었다. 번식시기 (12월)에 생식소 자극호르몬 분비세포(gonadotropes)는 granules와 globules와 같은 생식소자극호르몬을 포함한 봉입체로 가득찬 상태를 나타내었다. 난황형성기에는 late perinucleolus 난모세포가 난황의 축적을 통해서 early maturing난모세포로 변형되는 과정이며, 이 시기의 난모세포는 late maturing단계로 되면서 난황으로 완전히 가득찬 상태로 확인되었다. 핵이주 단계에 있는 난모세포의 과립막세포의 미세구조를 살펴보면 팽창된 조면 내형질세망과 tubular cristae가 있는 간상의 미토콘드리아로 구성되어 있었다. 방사대 (zona radials)와 난황막 사이에 있는 미세융모(finger-like projections)는 각각 성장하면서 난황형성기에 pore canals을 이루면서 서로 연결되나, 난성숙기에 방사대가 더욱더 치밀하게 되면 수축되어 봉쇄되면서 위축되는 것으로 확인되었다. 방사대는 외측에 않은 homogeneous layer와 내측에 2개의 두꺼운 helicoidal layers (zona radiata interna and zona radials externa)총 3개의 구조물로 구성되어 있었다. 정상적인 환경조건에서 볼 때 난포는 난형성과 생식소에서 분비되는 스테로이드 흐르몬의 생성에 충분할 만큼 조직의 발달과 호르몬의 주기적인 분비에 영향을 주는 것으로 나타났다.
This study was carried out to investigate the histomorphological changes and the electrophoretic patterns of egg components, obtained from 100 of 1-year-old female catfish(Silurus asotus). Especially, the light microscopic and ultrastructural changes of ooplasm and follicular membranes of oocytes, were observed by light and transmission electron microscope. All data were collected from October in 1992 to May in 1993. The size of the nucleoli and number of the yolk granules increased as the oocyte grew. Yolk granules were deposited in the oocyte as fluid. Due to the presence of large early and late maturing oocytes, their ovaries were large, transparent, granular, and greenish in color. As the percentages of fish in LMO and RO stage increased from March to April, mean of GSI values(19.95%) increased. Follicle cells such as granulosa cell and thecal cell change a squamous into cuboid shape in LPO and EMO stage. Processes, microvilli, from the granulosa cells and from the oocyte grow and make contact with each other in the pore canals of the zona radiata during vitellogenesis, but are withdrawn as the zona radiate becomes more compact and devoid of pore canals during oocyte maturation. The electrophoretic pattern of major band in mature stage was much thicker(21k, 24k, 32k, 45k, 67∼110k, 170k dalton) than that in previtellogenic phase.
좀구굴치 성숙란의 난여포층은 외층인 theca cell과 내층인 granulosa cell로 구분되며 특히 원주형인 granulosa cell은 분비활동으로 인하여 세포질에 분비물이 축적되면서 난모세포를 둘러싸게 된다. 이러한 granulosa cell은 난황형성 초기인 난황포 시기에 입방형태를 보이지만 난황구시기에는 원주상세포로 바뀌면서 점액을 분비하는 특징을 보여 주고 있다. 이러한 부착물질은 형태가 없으며 전자밀도가 높다. 또한 이러한 분비물을 가지는 난막은 난황형성이 더욱 진행됨에 따라 동물극 부근이 식물극보다 더욱 두꺼워지고 커지게 된다. 이러한 점막여포층 아래에는 약 $7.8{\sim}11.5\;{\mu}m$ 두께의 방사대가 존재한다. 방사대는 전자밀도가 낮은 외층과 3~5층의 여러 전자밀도층을 가지는 내층으로 구성되어 있다. 한편 점막여포층은 방사대에 존재하지 않고 있기 때문에 이 물질은 난세포질이 여포상피로부터 기원된 것으로 생각된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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