Cu,Zn-superoxide dismutase (SOD) was purified from horseradish by using Mono Q and Superose 12 FPLC column chromatography. The native molecular mass of the purified enzyme was approximately 33 kDa, as determined by gel filtration. The subunit molecular weight, as estimated by SDS-PAGE, was 16 kDa. These results indicated that the native enzyme is a homodimer. We investigated the free radical-generating function of horseradish Cu,Zn-SOD by using a chromogen, 2,2'-azinobis-(3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonate) (ABTS) which reacts with ${\cdot}OH$ radicals to form $ABTS^{+{\cdot}}$ The formation of $ABTS^{+{\cdot}}$ was required for both active Cu, Zn-SOD and $H_2O_2$. The optimal pH for the free radical-generating activity of this enzyme was 6.0-8.0, and it retained about $40^{\circ}C$ of its maximum activity when exposed at $40^{\circ}C$ for 15 min. A neutral scavenger, ethanol, inhibited the $ABTS^{+{\cdot}}$ formation by horseradish Cu, Zn-SOD more effectively than that by the mammalian enzyme. These results suggest that the active channel of horseradish enzyme is slightly larger than that of the mammalian enzyme.
Lee Jun-Won;In Jun-Gyo;Lee Bum-Soo;Choi Yong-Eui;Kim Jin-Ju;Yang Deok-Chun
Plant Resources
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v.8
no.1
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pp.52-59
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2005
A cDNA, PSOD1, encoding cytosolic copper/zinc superoxide dismutase (CuZn-SOD) was cloned and characterized from a full length cDNA library prepared from Populus alba${\times}$Populus glandulosa cultured in vitro. A PSOD1, is 725 nucleotides long and has an open reading frame of 459 bp with 152 amino acid residues (pI 5.43). The deduced amino acid sequence of PSOD1 perfect matched to the previously reported CuZn-SOD (CAC33845.1). Consensus amino acid residues (His-45, -47, -62, -70, -79, -119) were involved in Cu-, Cu/Zn-, and Zn- binding ligands. The deduced amino acid sequence of PSOD1 exhibited the high level of similarity from 100 to $85\%$ among previously registered SOD genes. The expression of PSOD1 in poplar increased at the 1 mM $H_{2}O_2$ and drought stress during 30 min and 60 min, but the ozone treated poplar increased at 30 min in the early time and then decreased at 60 min.
Flavonoids are class of polyphenolic compounds widely distributed in the plant kingdom, which display a variety of biological activities, including antiviral, antithrombotic, antiinflammatory, antihistaminic, antioxidant and free-radica 1 scavenging abilities. The antioxidant enzyme (AOE) system plays an important role in the defense against oxidative stress insults. To determine whether flavonoid, myricetin can exert antioxidative effects not only directly by modulating the AOE system but also scavenging free radical, we investigated the influence of the flavonoid myricetin on cell viability, different antioxidant enzyme activities, ROS level and the expression of different antioxidant emzyme in B16F10 murine melanoma cells. Myricetin in a concentration range from 6.25 to $50\;{\mu}M$ decreased superoxide dismutase (SOD) and glutathione peroxidase (GPx) enzyme activities, but catalase (CAT) activity was increased. In the myricetin-treated group, ROS levels were decreased dose-dependently. Antioxidant enzyme expression was measured by RT-PCR. Myricetin treatment of B16F10 cells increased catalase expression. Expression levels of copper zinc superoxide dismutase (CuZn SOD) were not affected by exposure of myricetin. Manganese superoxide dismutase (Mn SOD) and GPx expression levels decreased slightly after myricetin treatment. In conclusion, the antioxidant capacity of myricetin was due to CAT and free-radical scavenging.
Superoxide dismutase (SOD) was purified to homogeneity from fruiting bodies of edible mushroom, Lentinus edodes, by ammonium sulfate precipitation, diethylaminoethyl (DEAE)-Sepharose FF ion-exchange chromatography, Sephacryl S-200 gel filtration chromatography, and preparative PAGE. The molecular weight of the purified enzyme was estimated to be approximately 54 kDa by gel filtration chromatography, and the enzyme was shown to be consisted of two identical subunits of molecular weight 27 kDa by SDS-PAGE. The isoelectric point of the enzyme was 4.9 as determined by isoelectric focusing. The enzyme had optimal pH and temperature of pH 8.0 and $20^{\circ}C$, respectively. The activity of the enzyme was inhibited by hydrogen peroxide, but inhibited less by cyanide and azide. The native enzyme was found to contain 0.89g-atom of iron, 0.75g-atom of zinc, and 0.46g-atom of copper per mol of enzyme. Analysis of amino acids composition revealed that the SOD from L. edodes contained a relatively large amount of glutamic acid/glutamine, proline, cysteine, isoleucine, and leucine, but only a small amount of aspartic acid/asparagine, tyrosine, and tryptophan when compared to the other iron-containing SODs.
Kim, Younghwa;Jeon, Yoon-Jae;Ryu, Kang;Kim, Tae-Yoon
BMB Reports
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v.50
no.2
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pp.85-90
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2017
Recently, we demonstrated that superoxide dismutase 3 (SOD3) is a strong candidate for biomedicine. Anti-oxidant function of SOD3 was accomplished without cell penetration, and it inhibited the inflammatory responses via non-enzymatic functions. SOD3 has the heparin binding domain associating cell surface. Interestingly, we found that $Zn^{2+}$ promotes transduction effects of recombinant human SOD3 (rhSOD3) by increasing uptake via the heparin binding domain (HBD). We demonstrated an uptake of rhSOD3 from media to cell lysate via HBD, resulting in an accumulation of rhSOD3 in the nucleus, which was promoted by the presence of $Zn^{2+}$. This resulted in increased inhibitory effects of rhSOD3 on NF-{\kappa}B and STAT3 signals in the presence of $Zn^{2+}$, which shows elevated association of rhSOD3 into the cells. These results suggest that an optimized procedure can help to enhance the inflammatory efficacy of rhSOD3, as a novel biomedicine.
The objective of this study was to investigate the antioxidant enzyme (superoxide dismutase, SOD; glutathione, GSH; glutathione peroxidase, GPx) activities in liver and gill of rock bream, Oplegnathus fasciatus fed the experimental diets for 40 days. The experimental diets were prepared by adding with 30, 60 120 and 240 mg/kg to a commercial diet. In the liver, there were significant increases in SOD at 30~240 mg/kg. GPx activities of liver also were significantly increased at 30~120 mg/kg. The increased activities of SOD and GSH in the gills were observed in the 120 and 240 mg/kg, hence, GPx activity of gill exposed to lower concentrations of zinc (60~240 mg/kg) showed significant augmentation.
Park, Nam-Sook;Lee, Sang-Mong;Sohn, Hung-Dae;Jin, Byung-Rae
Proceedings of the Korean Society of Sericultural Science Conference
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2003.10a
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pp.71-74
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2003
Superoxide dismutase (SOD), one of the essential element of the antioxidant defense system, mainly removes $O^{-10}$$_2$ and also prevents $O^{-10}$$_2$ mediated reduction of iron and subsequent OH$^{-10}$ generation, which is highly toxic to the organism. Of these SOD enzymes, Cu, Zn-containing SOD (SODI) is an important component of the antioxidant defense system in eucaryotic cells. The SODI enzyme binds one copper and one zinc ion and displays the Greek Key $\beta$-barrel fuld. (omitted)
Trace elements play crucial role in the maintenance of genome stability in the cells. Many endogenous defense enzymes are containing trace elements such as superoxide dismutase and metalloproteins. These enzymes are contributing in the detoxification of reactive oxidative species (ROS) induced by ionizing radiation in the cells. Zinc, copper, manganese, and selenium are main trace elements that have protective roles against radiation-induced DNA damages. Trace elements in the free salt forms have protective effect against cell toxicity induced by oxidative stress, metal-complex are more active in the attenuation of ROS particularly through superoxide dismutase mimetic activity. Manganese-complexes in protection of normal cell against radiation without any protective effect on cancer cells are more interesting compounds in this topic. The aim of this paper to review the role of trace elements in protection cells against genotoxicity and side effects induced by ionizing radiation.
Over-expression of a copper/zinc superoxide dismutase (Cu/ZnSOD) resulted in substantially increased tolerance to cadmium exposure in Arabidopsis thaliana. Lower lipid peroxidation and $H_2O_2$ accumulation and the higher activities of $H_2O_2$ scavenging enzymes, including catalase (CAT) and ascorbate peroxidase (APX) in transformants (CuZnSOD-tr) compared to untransformed controls (wt) indicated that oxidative stress was the key factor in cadmium tolerance. Although progressive reductions in the dark-adapted photochemical efficiency (Fv/Fm) and quantum efficiency yield were observed with increasing cadmium levels, the chlorophyll fluorescence parameters were less marked in CuZnSOD-tr than in wi. These observations indicate that oxidative stress in the photosynthetic apparatus is a principal cause of Cd-induced phytotoxicity, and that Cu/ZnSOD plays a critical role in protection against Cd-induced oxidative stress.
Objective: This study was conducted to investigate effects of zinc (Zn) bearing palygorskite (ZnPal) supplementation on growth performance, hepatic mineral content, and antioxidant status of broilers at early age. Methods: A total of 240 1-day-old Arbor Acres broiler chicks were allocated into 5 treatments with 6 replicates of 8 chicks each. Birds in 5 treatments were fed a basal diet supplemented with 0 (Control group; Analyzed Zn content: 81 mg/kg), 20, 40, 60, and 80 mg/kg Zn as ZnPal for 21 days, respectively. Blood, liver and intestinal mucosa were collected at 21 days of age. Results: Treatments did not affect growth performance of broilers during the 21-day study (p>0.05). The contents of hepatic Zn and magnesium (Mg) were linearly increased (p<0.001) by ZnPal supplementation. ZnPal inclusion linearly (p = 0.007) reduced malondialdehyde (MDA) concentration in serum. The activity of total superoxide dismutase (T-SOD) in liver increased linearly (p = 0.001) with concentration of ZnPal in diet. ZnPal inclusion linearly (p = 0.036) and quadratically (p = 0.005) increased T-SOD activity, and linearly (p = 0.012) increased copper/zinc superoxide dismutase (Cu/Zn SOD) activity in jejunal mucosa. The maximum responses of hepatic and jejunal antioxidant enzymes activities (T-SOD and Cu/Zn SOD) were found when supplementing the basal diet with 60 mg/kg Zn as ZnPal. Furthermore, ZnPal supplementation quadratically (p = 0.001) increased Cu/Zn SOD activity in ileal mucosa, and its maximum activity was observed in the diet supplemented with 20 mg/kg Zn as ZnPal. Conclusion: ZnPal supplementation did not alter growth performance of broilers. Dietary ZnPal inclusion could increase concentrations of hepatic trace minerals (Zn and Mg) and inhibit lipid peroxidation by reducing serum MDA accumulation, with the optimal dosage of Zn from ZnPal being 80 mg/kg diet (analyzed Zn content in the diet: 165 mg/kg), and 60 mg/kg Zn as ZnPal (analyzed Zn content in the diet: 148 mg/kg) was the optimum dosage for broilers to achieve maximum antioxidant enzyme activities.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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