A 16 kilobase (kb) HindIII fragment of alkalophilic Bacillus sp. YC-335 containing a gene for xylanase synthesis was inserted at the HindIII site of pBR322 and cloned in Escherichia coli HB101. After subcloning of recombinant plasmid pYS52, the 1.5 kb fragment was found to code for xylanase activity, and the hybrid plasmid was named pYS55. The DNA insert of the plasmid was subjected to restriction enzyme mapping, which showed that pYS55 had single site for PuvII and SstI in the 1.5 kb insert fragment. Southern hybridization analysis revealed that the cloned gene was hybridized with chromosomal DNA from alkalophilic Bacillus sp. YC-335. About 64% of the enzyme activity was observed in the extracellular and periplasmic space of E. coli HB10l carrying pYS55.
The useful fungi which secret extracellular enzymes was selected for deinking agent of old newsprint. Five fungal strains were isolated from a paper mill soil ground. The CMCase, FPase and xylanase activities of fungi on the liquid culture were investigated at optimal growth conditions. The results of this study were as follow: The optimal pH and temperature for culture growth were 4~8 and 27~$35^{\circ}C$, respectively. For screening of extracellular enzymes at optimal culture conditions the optimal culture period were less than 6-7 days. Fusarium pallidoroseum and Aspergiilus niger which shows relatively higher CMCase, FPase and xylanase activities than the other species were selected for further enzymatic deinking research.
Xylanase (EC 3.2.1.8) was purified approximately 4.3 fold from Aspergillus niger SFN-416 by ammonium sulfate fractionation, Sephadex G-100 gel filtration and DEAE-Sephacel ion exchange chromatography. Molecular weight of the enzyme was approximately 42,000 daltons. The optimum pH and temperature of the enzyme activity were 5.5 and 50$\circ$C, respectively. The enzyme activity was enhanced by Fe$^{2+}$, and inhibited by Hg$^{2+}$. The activity was decreased by addition of methanol, ethanol, isopropanol and 1-butanol at a concentration of 10%(v/v).
This study was carried out to investigate the characteristics of extracellular cellulase and xylanase from 4 selected different species, such as enzyme activity and stability by pH, temperature and metal ions, for application into enzymatic deinking system. The optimal temperature and pH for enzyme activity of Bacillus pumilus I, B. subtilis I, B. pumilus II and B. subtilis II were mainly $40{\sim}60^{\circ}C$ and pH $6.0{\sim}7.0$, respectively. Certain metal ions, calcium and cobalt, elevated enzyme activity, even though there were different results of enzyme activities based on various metal ions in 4 different species. With these results we suggest that enzymatic deinking system should be proceed at $50^{\circ}C$ with neutral pH condition.
An experiment was carried out to assess the effects of xylanase supplementation on the performance, net energy and gut microflora of broilers fed a wheat-based diet. Day-old male broiler chicks were allocated to two dietary treatments. Each treatment was composed of six replicate cages of seven broilers per cage. The diets were wheat-based and offered as mash. The treatments included i) basal diet deficient in metabolizable energy; and ii) basal diet supplemented with a commercial xylanase added at 4,000 U/kg feed. Bird performance, nutrient utilization and gut microbial populations were measured. Heat production and net energy were determined using an auto-control, open circuit respiration calorimetry apparatus. Results showed that exogenous xylanase supplementation improved feed conversion efficiency (p<0.05) and increased diet AME (+4.2%; p<0.05), as well as heat production (HP), net energy for production (NEp), production of $CO_2$, and consumption of $O_2$. The respiratory quotient (RQ) was also increased (p<0.01) by the addition of xylanase. NEp value was increased by 26.1% while daily heat production per kg metabolizable body weight was decreased by 26.2% when the xylanase was added. Xylanase supplementation numerically increased the ileal digestibility of protein and energy by 3 and 6 percentage units respectively (p>0.05). The ileal digestibility of hemicellulose was significantly improved by xylanase addition (p<0.05).
The objective of this study was to assess the effect of xylanase on net energy for production, performance, nutrient digestion and gut microflora of broilers fed corn/soy-based diet. Eighty-four day-old male broiler chicks were allocated to two groups receiving two treatments, respectively. Each treatment had six replicate cages with seven broilers per cage. The diets were based on corn and soybean. The treatments were: i) basal diet reduced in apparent metabolizable energy (-0.63 MJ/kg compared to commercial diet specifications); ii) basal diet supplemented xylanase at 4,000 u/kg feed. The experiment used the auto-control, open circuit respiration calorimetry apparatus to examine the heat production and net energy for production. The results revealed that xylanase supplementation did not affect growth performance and diet AME value, but increased $NE_p$ value by 18.2% (p<0.05) and decreased daily heat production per $kg^{0.75}$ by 31.7% (p<0.05). There was no effect (p>0.05) of xylanase supplementation on the ileal digestibility of N and hemicelluloses, but the ileum digestibility of energy was increased by 2% by xylanase supplementation (p<0.05). Xylanase supplementation increased (p<0.05) the count of lactobacillus and bifidobacterial in the caecum.
Objective: The goal of the current study was to investigate the impact of various concentrations of xylanase in energy-deficient corn-based diets on the growth performance, carcass characteristics, nutrient digestibility, and digesta viscosity in broilers from 7 to 35 days of age. Methods: A total of 280 seven-day-old Ross 308 broilers were randomly allocated to one of the five dietary treatments following a completely randomized design with 8 replicates and 7 birds per cage. The treatments were: i) positive control (PC, without xylanase); ii) NC-1 (80 kcal/kg ME reduced from PC); iii) NC-2 (100 kcal/kg ME reduced from PC); iv) NCX-1 (NC-1 + 2,000 U/kg xylanase); and v) NCX-2 (NC-2 + 3,000 U/kg xylanase). Body weight, weight gain, feed intake, and feed conversion ratio were determined weekly to evaluate growth performance. One bird per pen was sacrificed for ileal digesta collection to determine the viscosity and digestibility of energy, dry matter, crude protein on days 24 and 35, however breast and leg meat samples were obtained for proximate analysis (moisture, crude protein, fat, and ash) on day 35. Results: Birds fed diets supplemented with xylanase regardless of the amount had higher (p<0.05) body weights, daily gains, and improved feed efficiency compared to NC diets all throughout the experimental period. Feed intake was not affected (p>0.05) by the addition of xylanase. Moreover, lowered (p<0.05) viscosity of the ileal digesta were observed upon xylanase inclusion in the diets compared to the birds fed NC diets on day 24. Ileal nutrient digestibility and meat proximate composition were not affected (p>0.05) by xylanase. Conclusion: The present study indicated that the xylanase at 2,000 U/kg and 3,000 U/kg levels compensates for the 80 kcal/kg and 100 kcal/kg dietary energy levels, respectively, without having adverse effects on the growth performance, carcass characteristics, nutrient digestibility, and digesta viscosity of broilers.
Two endoxylanases from an alkaliphilic bacterium, Bacillus halodurans C-1, were purified 3.8- and 7.9- fold with specific activities of 9.4 and 19.8U/mg protein, respectively. The molecular masses of both purified enzymes were 23 and 47 kDa, respectively, and 23 kDa xylanase I (Xyl I) exhibited an optimum pH at 7.0, whereas 47 kDa xylanase II (Xyl II) showed a broad pH range of 5.0 to 9.0. The temperature optima of both xylanases were $60^{\circ}C\;and\;70^{\circ}C$, respectively. Both were stable in the pH range of 6.0 to 9.0 and 5.0 to 10.0, respectively, and they were stable up to $60^{\circ}C\;and\;70^{\circ}C$, respectively. The $K_m\;and\;V_{max}$ of Xyl I were 4.33mg/ml and $63.5{\mu}mol/min/mg$, respectively, whereas Xyl II had a $K_m$ value of 0.30 mg/ml and $V_{max}$ of $210{\mu}mol/min/mg$. Both xylanases hydrolyzed xylans from birchwood, oat spelt, and larchwood. However, they showed different modes of action; a series of xylooligosaccharides larger than xylotriose were released as the major products by Xyl I, whereas xylobiose and xylotriose were the main products by Xyl II. The maximum synergistic action of the two enzymes on hydrolysis of xylan was 2.16 with the ratio of Xyl I to Xyl II at 1:9.
This study was carried out to bleach the Pinewood kraft pulp without the elemental chlorine using the xylanase or wastewater(We:wastewater enzymes) effluented from the submerged biofilter reactor containing the fungi, Phanerochaete sordida YK-624. So in this research, the proper treatment conditions(pH, temperature, dosage and time) were investigated respectively. And after the various kinds of multistage bleaching of pulps, the properties of pulps were tested. From the experimental results, we can conclude as follows. In the treatments of Pinewood kraft pulps with xylanase, the proper pH, temperature, enzyme dosage and time were 8.0, $35^{\circ}C, 400EXU/kg and 3 hr. respectively. And in the case of treatment with a wastewater(We) effluented from the submerged biofilter reactor, the proper pH, temperature and time were 5.0, $37^{\circ}C and 3 hr. respectively. On the other hand, Pinewood kraft pulps were bleached by the method of a multistage bleaching using xylanase or We instead of elemental chlorine. Consequently, the strengthes and brightnesses of pulps bleached by the method mentioned above were lower than those of pulp bleached by the conventional method using the elemental chlorine. But it is possible to improve the brightnesses through the increase of chlorine dioxide dosage or use of hydrogen peroxide in the final bleaching stage.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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