한국환경보건학회 2005년도 Proceedings of KSEH.Minamata Forum
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pp.95-102
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2005
For decolorization of synthetic dyes, Isolate fungi were investigated for the decolorization of 8 industrial dyes. One fungus isolated from textile wastewater collected from Banweol industrial complex, Korea showed excellent ability for removing synthetic dyes. Internal Transcribed Spacers (ITS) sequencing result was confirmed as the new Basidomycetes species. HUE05-1 The optimal decolorizaton conditions were pH5, 30$^{\circ}C$ and aerobic condition. HUE05-1 was completely decolorized all dyes in both solid and liquid condition. The result is decolorization effect at Reactive Orange 16; 97.12%, Reactive Blue 19; 92.09%, Reactive Blue 49; 97.04%, Reactive Yellow 145; 95.53%, Acid Orange 10; 99.18%, Acid Violet 43; 98.73%, Acid Blue 350; 94.71%, Disperse Blue 106; 90.07%.
A screening has been performed to find hyper-ligninolytic fungi, which degtrade beech and pine lignin extensively in order to broaden the understanding of the ligninolytic enzymes elaborated by various white-rot fungi. One hundred and twenty two ligninolytic strains were selected from decayed woods with a selective medium for screening ligninolytic wood-rotting fungi. Two of them, Phanerochaete sordida YK-624 and YK-472, showed much higher ligninolytic activity and selectivity in beech-wood degradation than typical lignin-degrading fungi, phanerochaete chrysosporium and Coriolus versicolor. They also degraded birch dioxane lignin and residual lignin in unbleached kraft pulp(UKP) much more extensively than P. chrysosporium and C. versicolor. During fungal treatment of beech wood-powder, the fungus strain P. sordida YK-624 showed higher activity of extracellular manganese peroxidase (MnP) in the medium than P. chrysosporium. It also showed MnP activity, which would not be lignin peroxidast during treatment of oxygen-bleached kraft pulp(OKP) and under enzyme-inducing conditin.
Whole-genome sequencing of Flammulina ononidis, a wood-rotting basidiomycete, was performed to identify genes associated with carbohydrate-active enzymes (CAZymes). A total of 12,586 gene structures with an average length of 2009 bp were predicted by the AUGUSTUS tool from a total 35,524,258 bp length of de novo genome assembly (49.76% GC). Orthologous analysis with other fungal species revealed that 7051 groups contained at least one F. ononidis gene. In addition, 11,252 (89.5%) of 12,586 genes for F. ononidis proteins had orthologs among the Dikarya, and F. ononidis contained 8 species-specific genes, of which 5 genes were paralogous. CAZyme prediction revealed 524 CAZyme genes, including 228 for glycoside hydrolases, 21 for polysaccharide lyases, 87 for glycosyltransferases, 61 for carbohydrate esterases, 87 with auxiliary activities, and 40 for carbohydrate-binding modules in the F. ononidis genome. This genome information including CAZyme repertoire will be useful to understand lignocellulolytic machinery of this white rot fungus F. ononidis.
Kim, Da-Woon;Nam, Junhyeok;Nguyen, Ha Thi Kim;Lee, Jiwon;Choi, Yongjun;Choi, Jaehyuk
Mycobiology
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제49권1호
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pp.86-88
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2021
The monokaryotic strain, Schizophyllum commune strain IUM1114-SS01, was generated from a basidiospore of dikaryotic parental strain IUM1114. It even showed the decolorizing activities for several textile dyes much better than its parental strain. Based on the results of a single-molecule real-time sequencing technology, we present the draft genome of S. commune IUM1114-SS01, comprising 41.1 Mb with GC contents of the genome were 57.44%. Among 13,380 protein-coding genes, 534 genes are carbon hydrate-active enzyme coding genes.
season of 2000. The disease infection usually started from flower, peduncle and young fruits, then moved to flower stalk, stem and leaves. At first, the lesions started with water-soaked, rapidly softened, and then the area gradually expanded. In severely affected film house, the rate of infected fruits reached to 28.6%. Numerous sporangiospores were formed on the diseased fruits, flower stalk, stem and leaves. Most of the sporangiospores were appeare to be rapidly dispersed in the air. The mycelia grew on the surface of host and formed stolons. Colonies on potato dextrose agar were cottony at first brownish black at maturity. Sporangia were 125.3${\times}$294.2 ${\mu}$m. globose or sub-globose with somewhat flattened base. White at first the black, many spored, and are never overhanging. Sporangiophores were 2.7-6.8${\times}$12.9-33.9 ${\mu}$m, smooth-walled, non-septate, light brown, simple, long, arising in groups of 3-5 from stolons opposite rhizoids. Sporangiophores were 8.6-21.1${\times}$6.41-1.7 ${\mu}$m, irregular, round, oval, elongate, angular and brownish-black streaked. Columella were 63.8${\times}$140.4 ${\mu}$m. brownish gray, umberella-shaped when dehisced. The causal organism was identified as Rhizopus stolonifer Lind on the basis of the morphological characteristics of the fungus. Rhizopus soft rot on squash (Cucurbita moschata) caused by the fungi has not been previously reported in Korea.
2011년부터 2013년까지 예산 지역의 농가포장에서 재배 중인 바질에서 균핵병으로 의심되는 증상이 지속적으로 관찰되었다. 초기에는 잎과 줄기가 갈색으로 변하기 시작하여 반점이 커지면서 점차 위쪽으로 진전, 위조하여 결국 전체적으로 썩어 죽는다. 잎과 줄기의 병반부에는 다량의 흰색 균사가 발생하며 $30-100{\mu}m$ 직경의 균핵이 형성하였다. PDA상에 균체는 흰색과 옅은 초콜릿 흑색으로 다양한 색을 나타내었고, 균핵은 검은색으로 대부분 불규칙한 구형이며 크기는 $5-50{\mu}m$였다. 병원균을 인위적으로 접종한 바질의 잎과 줄기에서는 자연 발생된 바질과 동일한 괴사와 위조증상을 보이며, 병반에서 역시 같은 균을 분리하였다. 이상과 같이 병원균의 균학적 특징, ITS 염기서열 분석, 병원성 검정 결과 본 병해는 Sclerotinia sclerotiorum에 의한 바질균핵병으로 명명할 것을 제안한다.
백색 부후균 Coriolus versicolor CV3 균주를 공시하여 laccase 생성을 위한 배양 조건을 검토하였다. 감자, 양파 또는 맥아의 추출물을 주재로 한 각종 백색 부후균용의 배지를 비교한 결과, 공시 균주의 laccase 생성은 potato-malt extract 배지에서 가장 높아서 배양 11일 후 배양액당 $1.50unit/m{\ell}$, 균체 건물 중당 119.5 unit/g 수준의 laccase 활성도에 도달하였다. potato-malt extract 배지에 각종 유기 및 무기 질소원 중 yeast extract 또는 $KNO_3$를 0.2% 첨가하였을때 laccase의 생성 수준이 높았으며, inducer로서 2.5-xylidine을 $4{\times}10^{-4}M$ 첨가한 경우 대조구에 비하여 3.1배 수준으로 laccase 생성이 유도 되었다. Laccase 생성을 위한 배양 최적 pH는 4~4.5 이었다.
A new wood-degrading fungus Trichophyton rubrum LKY-7 secretes a high level of laccase in a glucose-peptone liquid medium. The production of laccase by the fungus was barely induced by 2,5-xylidine. The laccase has been purified to homogeneity through three chromatography steps in an overall yield of 40%. The molecular mass of the purified laccase was about 65 kDa by sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis. The purified laccase had the distinct blue color and had basic spectroscopic features of a typical blue laccase: two absorption maxima at 278 and 610 nm and a shoulder at 338 nm. The N-terminus of the laccase has been sequenced, revealing high homology to laccases from wood-degrading white-rot fungi such as Ceriporiopsis subvermispora. The enzyme had a "low" redox potential (0.5 V vs normal hydrogen electrode), yet it was one of the most active laccases in oxidizing a series of representative substrates/mediators. Compared with other fungal laccases, the laccase has a very low Km value with ABTS [2,2'-azinobis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid] as a substrate and a very high Km value with violuric acid as a substrate. The laccase has the isoelectric point of 4.0. The laccase had very acidic optimal pH values (pH 3-4) while it was more stable at neutral pH than at acidic pH. The laccase oxidized hydroquinone faster than catechol and pyrogallol. The oxidation of tyrosine by the laccase was not detectable under the reaction conditions. The laccase was strongly inhibited by sodium azide and sodium fluoride. fluoride.
백색부후균 Phanerochaete chrysosporium으로부터 유래한 Manganese peroxidase (mnp5)를 methylotrophic yeast인 Pichia pastoris에서 이종 발현을 하였다. 이종발현으로부터 얻어진 단백질은 클로닝으로부터 예상되어지는 분자량보다 높은 분자량인 45 kDa으로 나타났다. 이것은 mnp5가 가지고 있는 glycosylation site에 의한 것이며, N-linked hyperglycosylation이 효소 활성에 영향을 미치는지를 site direct mutation에 의해 확인하였다. Sodium dodesyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE)와 Coomassie Brilliant Blue (CBB) 염색에 의해 분자량을 확인한 결과 약 37 kDa으로 나타났으며, 효소활성을 측정한 결과 glycosylation이 효소 활성에 영향을 미치지 않는 것으로 나타났다. 따라서 본 연구로부터 P. pastoris에서 mnp5의 이종발현이 성공적으로 이루어졌으며 이러한 결과로부터 heme을 포함하고 있는 단백질의 이종발현 생산의 가능성을 보여주었다.
큰느타리(Pleurotus eryngii)는 azo계 염료인 CR, heterocyclic계 염료인 MB, triphenyl methane계 염료인 CV와 MG를 고체와 액체 배양 상태에서 모두 분해할 수 있었으며 고체 배양 조건에서는 CR을, 액체 배양 상태에서는 MG을 가장 효과적으로 분해했다. MB는 고체와 액체 배양 조건에서 모두 가정 적게 분해되었다. 4 종류의 염료 모두 균사의 생장을 저해했으나 MG의 영향이 가장 크게 나타났다. 활성을 측정한 두 종류의 리그닌 분해 효소 중 모두 laccase의 활성이 훨씬 높았으며 MnP 역시 활성은 낮았으나 laccsse와 비슷한 경향을 보였다. 따라서 큰느타리는 주로 laccase를 사용하여 방향족 합성염료를 분해하는 것으로 추정된다. CR, MB, CV는 laccase의 활성과 염료 분해 정도가 양의 상관관계를 보인 반면 MG의 경우 높은 효소 활성을 나타낸 후 염료의 분해가 진행되었다. 또한 MG가 모두 분해되었을 때의 laccase 활성(0.07 U/ml)이 다른 염료가 가장 많이 분해되었을 때의 활성(0.10 U/ml)보다 낮았는데 이는 큰느타리의 균사체가 MG를 분해하는 기작이 CR, MB 및 CR 등의 염료를 분해하는 기작과 차이를 보인다는 것을 알 수 있었다. 본 연구에서는 큰느타리의 방향족 합성염료 분해 능력에 대해 밝힘으로써 앞으로 국내산 버섯균주를 이용한 친환경적인 합성염료 처리 기술 개발에 도움을 줄 것으로 기대된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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