We tried to extract bone morphogenetic protein (BMP) from the freeze-dried bovine cortical bone (FBCB) for bone graft, which were defatted with chloroform-methanol for 20 days, freeze-dried at $-80^{\circ}C$ for 7 days and sterilized by ethylene oxide gas. Two kg of FBCB were pulverized in a wheel mill to $0.5-2.0mm^3$ cubic in size. The bone particles were demineralized in 0.6N HCI for 10 days at chloroform-methanol$4^{\circ}C$ and defatted with chloroform-methanol for 6 hours at room temperature, which was going to be defatting and demineralized cortical bone (DDM). For extracting BMP, DDM was agitated continuously through 72 hours with magnetic stirrer at $4^{\circ}C$ into 12 times of volume of 6 M guanidine hydrochloride (Gdn-HCl) solution containing proteinase inhibitors to protect BMP such as 2mM N-ethylaleimide, 1mM iodoacetic acid, 1mM phenylmethylsulfonyl fluoride and a sterilizer, 1mM sodium azide. The extraction procedure was repeated for three times. All extracted solution was centrifuged at 10,000 rpm for 30 min and then, the supernatant was dialyzed with 12 times of volume of deionized water at $4^{\circ}C$ for 24-72 hours, which cut off below 6,000-8,000 molecular weight. The dialyzed specimen contained crude-BMP was centrifuged, freeze-dried, and weighted. Through these processing, we could obtained $84.9\%$ as FBCB, $17.8\%$ as DDM and $0.71\%$ as crude-BMP from the wet cortical bone without cancellous bone, marrow and muscles. The crude-BMP were obtained $68.3\%$ from the first extraction, $29.6\%$ from secondary and $2.1\%$ from tertiary, respectively. It was suggested that high yield of crude-BMP migth be explained by three-time repetition of the extraction processing for crude-BMP with Gdn-Hcl sol.
Although it has traditionally known that deer antler and medicinal herbs extract contain some functional components for health promotion, the nutritional significance remains to be elucidated. This study examined the efficacy of deer antler extract (DA) , medicinal herbs extract (MH) and their mixture (DAMH) on serum IGF-I, bone growth with growing rats in vivo and splenocyte proliferation with spleen cells in vitro. Three week-old young female rats (Sprague-Dawley) were divided into 4 groups and then fed basal diet (AIN-93G) or experimental diets containing DA, MH, DAMH, respectively, for 7 weeks. We collected blood, liver, kidney, spleen, femur and tibia from rats. There was no significant difference in weight gain, but food intake increased in DA- and MH-fed groups. There were no signs of liver and kidney damage in the DA, MH and DAMH-fed groups compared to basal diet group. In femur and tibia, wet weights: breaking forces and bone minerals (Ca, Mg and Zn) were significantly higher in the DA-fed group than in the other groups. Serum alkaline phosphatase (ALP) , bone-specific alkaline phosphatase (BALP) activities were significantly lower in the DA, MH, DAMH-fed groups than in basal diet group. Also, serum insulin-like growth factor-I (IGF-I) concentrations were significantly increased in DA-fed group compared to the other groups. Therefore DA was shown to have an activity of bone growth promotion by increasing the IGF-I, a major bone growth factor. The deer antler extract showed an enhanced immune action on the primary cultured-cells from spleen of rats, representing that splenocytes were proliferated by lipopolysaccharide (LPS), but not by concanavalin A (Con A). These results indicate that deer antler extract has beneficial effects on bone growth via IGF-I and on splenocyte activation.
우골대체 Ca공급원으로서 참다랑어 골분과 이의 가공처리된 형태에 따른 Ca이용성을 흰쥐의 골격대사에 근거하여 비교하였다. 실험군은 \circled1 정상칼슘(0.5%)을 급여한 CC(CaCO$_3$; 대조군) \circled2 TB(bluefin tuna bone powder) \circled3 CT(citrated bluefin tuna bone powder) \circled4 BB(bovine bone powder) \circled5 CL(calcium lactate, 유산칼슘) \circled5 저칼슘을 급여한 LC(0.15% CaCO$_3$, 탄산칼슘)으로 구별하였다. 우골분을 섭취한 BB군의 체중 증가가 유의하게 높았으며, 구연산 처리된 참다랑어 골분(CT) 및 칼슘부족 식이를 급여한 LC군에서 체중증가가 낮았다. 식이 섭취량도 우골분(BB)군에서 가장 높았으며, 구연산처리된 참다랑어 골분(CT)군과 유산칼슘(CL)군에서 유의하게 낮은 섭취량을 보였다. 저칼슘식이인 LC군은 변으로 배설되는 양이 다른 정상식이군에 비해 최소화되어 흡수율이 최고치를 나타냈으나 칼슘 보유량은 가장 낮았다. 뇨 칼슘배설량은 정상칼슘군 중 참다랑어 골분(TB)군에서 유의하게 낮았고 유산칼슘(CL)군에서 높은 값을 보였지만 체내 칼슘보유량은 칼슘급원에 따른 차이를 보이지 않았다. 칼슘급원에 따른 변 칼슘 배설량과 칼슘흡수량은 차이가 없었다. 혈중의 calcitonin농도는 저칼슘군(LC)을 비롯한 탄산칼슘(CC)군과 유산칼슘(CL)군에서 유의하게 낮았으며, 참다랑어골분(TB)군, 구연산처리된 참다랑어골분(CT)군, 우골분(BB)군에서는 높은 수치를 보였고, PTH와 osteocalcin 농도는 실험군 간에 차이를 보이지 않았다. 뇨의 DPD 수치는 LC군(저칼슘식이군)에서 유의하게 높았고, 정상수준의 칼슘을 섭취한 각 군에서는 차이를 나타내지 않았다. 대퇴골의 습윤무게는 참다랑어골분(TB)군과 구연산처리 된 참다랑어 골분(CT)군에서 높은 수치를 나타내었고, 건조후의 무게는 저칼슘군(LC)을 제외한 정상수준의 칼슘 투여군 간에 차이가 없었다. 대퇴골의 회분 함량은 정상수준의 칼슘식이군들에 비해 저칼슘식이인 LC군에서 유의하게 낮았다. 체중 100g 당의 대퇴골의 칼슘함량은 저칼슘식이(LC)군에서 유의적으로 낮았고 칼슘급원에 따라 차이를 나타내지 않았다. 대퇴골의 골밀도 측정 결과 저칼슘식이인 LC군은 정상식이군에 비해 골밀도가 유의하게 낮았으며, 동일한 정상수준의 칼슘이 공급된 실험군 사이에서는 참다랑어골분(TB)군의 골밀도가 가장 높은 수치를 보였다. 본 연구결과 여러 가지 칼슘급원에 따른 흰쥐의 골격대사는 큰 차이를 나타내지 않았으며, 저칼슘군과의 차이가 두드러져 양적인 면에서의 칼슘공급의 중요성을 지적할 수 있겠다. 대퇴골의 중량이나 회분, 칼슘 및 대퇴골의 골밀도 결과로 보아 참다랑어 골분은 탄산칼슘군이나, 기존에 칼슘 급원으로 사용해 오던 우골분수준으로 뼈의 건강유지 면에서 긍정적인 가치를 부여할 수 있는 것으로 사료된다.
We investigated the effect of a lactic acid extract of Sargassum horneri (ExSL) as a calcium supplement on bone formation in 48 female Sprague-Dawley rats for 4 weeks of their growth phase. The rats were divided into four groups based on diet: two calcium-sufficient and two calcium-deficient diets. The normal control group (NC) was fed AIN-93G; the NCS group was fed the same diet containing 1% extract; the calcium-deficient control (DC) diet was based on AIN-93G; and the DCS group received the same calcium-deficient diet plus 1% extract. Bone formation in the rats was evaluated using the wet weight, length, diameter, and bone mineral density (BMD) of the femur. Serum parameters were also examined. The food intake among the groups did not differ significantly (P<0.05). The NCS group gained the most body weight, while the DC group gained much less weight than the other groups. The feeding efficiencies of the groups that received the extract (NCS and DCS) were slightly higher than those of the control groups (NC and DC). The calcium intakes of all groups depended on the amount of calcium in the feed; the NCS and DCS diets contained 12.15 mg more calcium than the NC and DC diets. The calcium absorption was lower in NCS than in DC and DCS, but significantly higher than in NC (P<0.05). The BMDs in the calcium-sufficient groups were not significantly different (P<0.05), while in the calcium-deficient groups the BMD was significantly higher in DCS than in DC (P<0.05). The serum calcium and phosphorus levels in all groups were not associated with markers of bone growth related to the extract. The osteocalcin content and alkaline phosphatase (ALPase) activity were higher in the calcium-deficient groups than in the normal groups (P<0.05). Ultimately, the osteocalcin content and ALPase activity were lower in DCS compared to DC. These results suggest that the addition of ExSL promotes bone formation and calcium absorption in growing rats.
Purpose: Frostbite can affect still soldiers. Initial clinical manifestations are similar for superficial and deep frostbite, so early treatment is identical. It is under-estimated by physicians. We try to identify the challenges of managing these complex tissue injuries. Methods: A retrospective analysis of 84 patients hospitalized at AFCH from 2009 to 2015 was conducted. We investigated differences of epidemiological characteristics, identification of soft tissue injury, treatment and complications between superficial (SF: 43; 51.2%) and deep (DF: 41; 48.8%) frostbite. Results: The major (94.0%) developed frostbite in dry circumstances (89.3%). Wet circumstances (66.7%) were more susceptible to DF rather than dry (46.7%). The 38 (45.2%) arrived to specialist within 7days. Most prone sites were feet, followed by hands. Toes had more deep injuries. DF presented more increased levels of ALT, CPK, CKMB, CRP. The bone scan of W+S+ was 48.3%, 87.1% and W+S- was 20.7%, 12.9%, respectively. The treatment resulted in improved or normalized perfusion scan with matching clinical improvement. It was a good tool to assess treatment response. Eighteen normal and 8 stenotic type of PCR resulted in normal with matching clinical improvement. One continuous obstructive waveform led to minor amputation. Twelve underwent both PCR and MRA. Among 6 normal PCR, 5 showed normal and one stenosis in MRA. All 5 stenosis and one obstruction showed the same findings in MRA. It was a good tool to evaluate vascular compromise. They were treated with rapid rewarming (11.6%, 22.0%), hydrotherapy (16.3%, 29.3%), respectively. Six (14.6%) underwent STSG, 2 (4.9%) had digital amputation in DF. Berasil, Ibuprofen, Trental were commonly administered. PGE1 was administered selectively for 6.8, 10.8 days, respectively. Raynaud's syndrome (16.3%), CRPS (4.7%), LOM (14.6%) and toe deformity (4.9%) were specific sequelae. Conclusion: We should recommend intensive foot care education, early rewarming and evacuation to specialized units. The bone scanning and PCR should allow for a more aggressive and active approach to the management of tissue viability.
This study was performed to identify the effect of constant direct current and to give us methods which can be applied easily in clinic. Six rabbits was used at this experiment. After each animal was fractured at left fibula, divided into experimental group(n=3) and central group(n=3). Experiment duration of electrical stimulation on experimental rabbits was 35 days. Direct current from fifteen microampere to twenty microampere was passed continously through the placed electrode between fracture area and thigh. Negative electrode was placed at fracture area and positive at thigh. Roentgenography was used to observe bone-healing progression wet three times-at 15days, 25days and 35days after electrical stimulation. The results obtained are as followings: 1. Both experimental group and control group do not obtain callus formation on the first roentgenography(15 days after ES). 2. On the second roentgenography(25 days after ES), experimental group achieves above $70\%$ on fracture-healing, but control group achieves about $20-30\%$ on fracture healing. 3. On the third roentgenegraphy(35 nays after ES), experimental group achieves above $85-95\%$ on fracture healing and control group achieves about $60-70\%$ of bone union. Thus, statistically significance(independent t-test) was occured ie the second and third roentgenography between experimental group and control group.
Once the object has been excavated at underwater condition, it should be subjected to condition that may cause its deterioration. Therefore, it is important that the object immediately keeps stable environment. It means that the object was excavated at underwater and it exposed the deterioration condition, as soon as possible it was not dried on surface, especially metallic and organic material. Iron objects is particularly notorious for rapid disintegration that it kept wet or stored in a stable environment. Ceramics, glass and stone were handled carefully that it prevented physical damage by mishandling. Organic materials of wood, leather, rope, bone must not be allowed to dry out because the creaking, shrinking and warping are well known disintegration. Therefore objects is basis of keeping stable condition in on-site and then it will have to pass through a detailed conservation process in the laboratory.
A study was conducted to determine the macromineral status of grazing cattle in three climatic regions of the province of South Sulawesi, Indonesia. Soil, forage, blood and rib bone samples were collected within the Western, Central and Eastern regions, respectively, in February-March and August-September of 1987. Calcium and magnesium were not deficient in soil samples. For forages, calcium and phosphorus were deficient for all regions and forage sodium was deficient except for the western region in the dry season. Crude protein was deficient during the dry season. The overall percentage of deficient plasma phosphorus samples was 17 or 23% for the wet and dry seasons, respectively. Based on these analyses, macrominerals most likely deficient in both seasons were phosphorus and calcium in all regions, in addition to sodium in the Central and Eastern regions.
This study was performed to investigate the contents of heavy metals in Anguilla japonica habiting in Korea. The samples were collected along by Nak Tongriver, Young San river and culture farms. Lead, Cadmium, Copper, Zinc, Manganese, Chromium were tested by the Atomic Absoption Spectrop-hotometer after wet digestion, Mercury was tested by using mercury analyzer. The results were as follows: 1. Aresenic, Copper contents in the four parts were the higest values in liver 2. In total mercury contents of the each parts, the higest value was detected in muscle. 3. In all metals, Zinc and Manganese were detected with high contents, Mecury and Cadmium were detected with low contents. Lead, Cadmium, Zinc, chromiumi, Manganese were detected with high in bone. 4, The difference was not significant between natural and feeding Anguilla Japonica, but significant correlation with parts.
Following the extensive use of implant, the incidence of peri-implantitis increases. Guided bone regeneration has been used for the optimal treatment of this disease. Because implant surface was contaminated with plaque and calculus, cleaning and detoxification were needed for the reosseointegration when guided bone regeneration was performed. Various mechanical and chemical methods have been used for cleaning and detoxification of implant surface, air-powder abrasive and oversaturated citrate were known to be most effective among these methods. However, these methods were incomplete because these could not thoroughly remove bacteria of implant surface, moreover deformed implant surface. Recent studies for detoxification of the implant surface using laser were going on, $CO_2$ laser and Soft Diode laser were known to be effective among these methods. The purpose of this study was to obtain clinical guide by application these laser to implant surface. 15 experimental machined pure titanium cylinder models were fabricated. The $CO_2$ laser treatment under dry, wet and hydrogen peroxide condition or the Soft Diode laser treatment under Toluidine blue O solution condition was performed on the each of models. Each groups were examined with SPM and SEM to know whether their surface was changed. The results were as follows : 1. Surface roughness and surface form weren't changed when $CO_2$ laser was usedunder dry condition(P>0.05). 2. Surface roughness and surface form weren't changed when $CO_2$ laser was used under wet condition(P>0.05). 3. Surface roughness and surface form weren't changed when $CO_2$ laser was used under hydrogen peroxide condition(P>0.05). 4. Surface roughness and surface form weren't changed when Soft Diode laser was used under toluidine blue O solution condition(P>0.05). From the result of this study, it may be concluded that the $CO_2$ laser having relatively safe pulse mode and the Soft Diode laser used with photosensitizer can be used safely to treat peri-implantitis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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