Sen, Ratna;Nataraju, B.;Balavenkatasubbaiah, M.;Premalatha, V.;Thiagarajan, V.;Datta, R.K.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제9권1호
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pp.35-40
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2004
Bombyx mori densonucleosis virus type 1 (BmDNV1)- a non occluded virus causes flacherie disease in the susceptible stocks of the silkworm, Bombyx mori. However, some stocks are non-susceptible. Non-susceptibility to BmDNV1 in B. mori is a unique case where the virus infection is completely inhibited by a single gene of the host. A survey conducted by this institute in some parts of Karnataka state has revealed that, 43.05% of the total incidence of flacherie disease caused by non-occluded viruses, are due to the synergistic infection of B. mori densonucleosis and infectious flacherie virus. Earlier study indicated that rearing of BmDNV1 resistant silkworm stock is effective in protecting silkworm against BmIFV also. In the present study the response of 78 silkworm stocks which include 42 of non-diapausing and 36 of diapausing groups, to BmDNV1 is investigated. Newly ecdysed third instar larvae were inoculated per-os with 10% inoculum of BmDNV1 extracted from the mid-gut of infected silkworm. One non-diapausing and three diapausing silkworm stocks were found to be resistant to BmDNV1. Eleven silkworm stocks were found to possess moderate resistance whereas rest sixty three were found to be susceptible to BmDNV1. Genetic analysis has shown that the resistance to BmDNV1 is autosomally inherited and controlled by a major dominant or a major recessive gene in different silkworm stocks. These resistant stocks can be utilized as the resource material to develop BmDNV1 resistant commercial hybrids. The selection strategies, depending upon the mode of inheritance of resistance in the resource material chosen, are discussed.
A flue-cured tobacco variety (Nicotiana tabacum cv. Wisconsin) was used for Plant transformation with the complementary DNA (cDNA) of potato virus Y-necrosis strain (PVY-VN) replicase gone (Nb) which was synthesized through reverse-transcription Primed with oligo(dT) and Polymerization using RNase H-digested template. The cDNA was cloned into Plant expression vector Plasmid (PMBP2), and introduced into tobacco plants by co-culturing tobacco leaf disks with Agrobacterium tumefaciens LBA4404 containing the plasmid before Plant regeneration. Eight Plants, in which the inserted cDNA fragment was detected by Polymerase chain reaction (PCR), out of 70 putative transformants inserted with sense-oriented Mb cDNA showed no symptom at 3 weeks after inoculation, while the other 62 plants, and all plants with vector gone only and antisense-oriented NIb cDNA had susceptible vein-necrosis symptoms. However, only 2 of the 8 resistant plants were highly resistant, which remained symptomless up to 10 weeks after inoculation. Among the first progenies (T1) from self-fertilized seeds of the two resistant transgenic plants, less than 10 % of 71 plants appeared highly resistant (with no symptom), 70% moderately resistant (with mild symptoms on 1 - 2 leaves), and about 20% susceptible (with susceptible symptoms on 3 or more leaves) at 3 weeks after inoculation. These results suggest that the PVY resistance was inherited in the 71 generation. Key words : potato virus Y. viral replicase gene, transgenic tobacco Plants, resistance.
Using the abundant available information about the tomato genome, we developed DNA markers that are linked to disease resistant loci and performed marker-assisted selection (MAS) to construct multi-disease resistant lines and varieties. Resistance markers of Ty-1, T2, and I2, which are linked to disease resistance to Tomato yellow leaf curl virus (TYLCV), Tomato mosaic virus (ToMV), and Fusarium wilt, respectively, were developed in a co-dominant fashion. DNA sequences near the resistance loci of TYLCV, ToMV, and Fusarium wilt were used for primer design. Reported candidate markers for powdery mildew-resistance were screened and the 32.5Cla marker was selected. All four markers (Ty-1, T2, I2, and 32.5Cla) were converted to cleavage amplification polymorphisms (CAPS) markers. Then, the CAPS markers were applied to 96 tomato lines to determine the phenetic relationships among the lines. This information yielded clusters of breeding lines illustrating the distribution of resistant and susceptible characters among lines. These data were utilized further in a MAS program for several generations, and a total of ten varieties and ten inbred lines were constructed. Among four traits, three were introduced to develop varieties and breeding lines through the MAS program; several cultivars possessed up to seven disease resistant traits. These resistant trait-related markers that were developed for the tomato MAS program could be used to select early stage seedlings, saving time and cost, and to construct multi-disease resistant lines and varieties.
The coat protein mediated resistance to potato virus Y is assessed here in transgenic potato plants (Solanum tuberosum L., cv Claustar). Therefore, the corresponding cDNA from tunisian isolate of the virus was cloned into Agrobacterium tumefaciens binary vector. The transgenic lines were subsequently analysed for the presence and expression of the transgene. The CP cDNA copy number was determined for kanamycin resistant plants. Three selected transgenic lines and their S1 progeny resulting from tuber germination showed a high protection level against the virus. These data appear to support the hypothesis that the virus resistance is mediated by the translated viral coat protein expressed in transgenic potato lines.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제6권2호
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pp.145-149
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2003
Seeing inadequate disinfection and unhygenic condition in rearing area, use of disease resistant silkworm variety is the best option. In order to this, an attempt has been made to develop the resistance to Bombyx mori densonucleosis virus (BmDNV-2) into a susceptible silkworm breed Zhenon1 by cross breeding with a resistant silkworm breed SU12 and exposing the subsequent generations to BmDNV-2 followed by the selection of individuals from the surviving batches. After seven generation the evolved DNV-2 resistant strain showed the significantly higher resistance to BmDNV-2 than control Zhenon1. The economic characters of both of the breeds were almost on par.
Viral coat protein (CP) encoding cDNA with artificial start and stop codons was synthesized by reverse-transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) from the Korean isolate of potato virus Y-vein nectrosis strain (pVY-VN). To make PVY CP cDNA to untranslatable form, three stop codons were inserted near the start codon by "megaprimer-PCR" method. The untranslatable CP cDNA was subcloned to plant expression vector and transferred to N. tabacum cv. NC82 by Agrobacterium-mediated transformation. Highly resistant plants to PVY infection were screened, based on symptom development after mechanical virus inoculation. By genomic PCR and Southern blot analysis, one or more copies of the untranslatable CP gene were found in all transformants. From northern blot analysis, highly resistant transgenic lines had very low level of CP transcript but susceptible lines had high level, suggesting resistance to PVY infection should be related to RNA-mediated mechanism.mechanism.
The occurrence of potato(Sotanum tuberosum) viral diseases caused by Potato virus X(PVX), Potato virus Y (PVY), Potato leafroll virus(PLRV), Potato vims S(PVS), Potato virus M(PVM), Potato virus A(PVA), Potato virus T(PVT), Alfalfa mosic virus(AIMV), Tobacco mosic virus(TMV), Potato mop top virus(PMTV) Tobacco rattle virus(TRV) and Potato spindle tuber viroid(PSTVd), potato witches' broom phytoplasma, have been identified so far in Korea. Major viral diseases such as PVX, PVY and PLRV had been studied more deeply, however, the others are just identified and only partially characterized since the first study on the relation between PVX nucleic acid and virus protein by Kim in 1961. The most studies on potato viral diseases are mainly focused on the problems of seed potato production. The National Alpine Agricultural Experiment Station(NAAES), since it began its activities in 1961, has given special attention to this problem by doing studies to identify, characterize and control potato virus diseases. This effort resulted in the development of new potato virus detection methods as a basis for elaborating new method of control, such as the production of seed potato free of virus and the selection of new virus-resistant transgenic potatoes. The further studies of potato viral diseases required would be fallowings: the continuous monitoring for the occurrence of identified or not identified potato viruses in Korea, the isolation of resistant viral genes, the development of control method for the non-persistently transmitted viruses like PVY, special vectors such as nematode and fungus transmitted viruses, TRV and PMTV and the development of control methods against potato viral diseases by viral cross protection, therapy, transgenic plant, and the use of the agents or molecules, such as virus inhibitors and antiviral proteins, etc., blocking viral replication.
Ganciclovir(GCV)와 Vidarabine(ara-A)을 단독으로 또는 동시에 HSV-1에 작용시켰을때 HSV-1의 복제, DNA합성 및 단백질 합성에 미치는 영향을 관찰할 목적으로 본 연구를 시행하였다. 본 실험에서는 4가지의 다른 HSV-1(Wild type KOS, $VCV^r$, $IUdR^r$, 및 $PAA^r5$)를 사용하였다. Virus복제에 미치는 항 virus약의 효과는 Vero 세포단층 배양에서 Yield reduction assay에 의해서 관찰하였다. 항 virus약의 virus DNA 합성에 미치는 영향은 NaI 밀도 구배초원심침전후 $H^3-$표지 virus DNA의 방사능에 의해서 관찰하였다. Virus 단백질의 합성에 미치는 항 virus약의 효과는 $^{35}S$를 표지한 후 polyacrylamide 겔 전기영동법, 자가방사기록법 그러고 virus bands의 음영농도주사법을 이용, 관찰하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. GCV는 wild trype HSV-1 KOS와 $PAA^r5$의 복제를 강력하게 억제하였으나 $ACV^r$와 $IUdR^r$는 GCV에 대해서 중등도의 저항을 보였다. ara-A는 실험대상의 모든 HSV-(KOS, $ACV^r$, $IUdR^r$ 및 $PAA^r5$)의 복제에 대해서 거의 비슷하게 억제효과를 보였다. GCV와 ara-A 동시첨가는 KOS와 $PAA^r5$의 복제에 대해서 상승적인 억제효과를 보였고 $ACV^r$와 $IUdR^r5$의 복제에 대해서는 상가작용이하의 억제 효과를 보였다. 2. GCV또는 ara-A는 HSV-1감염 Vero세포에서 virus DNA의 합성을 유의하게 억제하였다. GCV와 ara-A의 동시첨가는 KOS 또는 $PAA^r5$ 감염세포에서 virus DNA 합성을 GCV 또는 ara-A를 단독 첨가하였을때 보다 현저하게 억제하였다. $ACV^r$ 또는 $IUdR^r$ 감염세포에서는 이런 현상을 관찰할 수 없었다. 3. Wild type HSV-1 감염세포에서 virus-단백질의 합성은 GCV, ara-A의 단독 첨가 또는 GCV와 ara-A의 동시첨가에 의해서 변경되지 않았다. Wild type HSV-1 감염말기에 GCV 또는 ara-A 단독 혹은 동시첨가에 의해서 virus 단백질의 합성은 경미하나마 유의성있게 증가하였다. Wild type HSV-1과 $PAA^r5$에 의한 단백질의 합성은 GCV 또는 ara-A 단독 첨가에 의해서 유의성있게 억제되었다. GCV또는 ara-A의 동시첨가는 GCV또는 ara-A를 단독으로 첨가했을 경우보다 단백질의 합성을 더욱 억제하였다. 이상의 실험결과로 보아 GCV와 ara-A의 동시사용은 HSV-1 혹은 ACV저항 DNA polymerase변이주인 $PAA^r5$에 대해서 상승적인 억제작용을 나타냈으며 이 효과는 virus DNA 합성 억제에 의한 것으로 생각된다. ACV저항 thymidine kinase 변이주인 $ACV^r$ 및 $IUdR^r$에 대해서는 ara-A가 유효하였다. 항 virus 약물에 의한 virus 단백질합성의 변화는 virus DNA 합성에 대한 억제효과에 인한 것으로 사려된다.
Kim, Hong-Sik;Baek, Seong-Bum;Kim, Dea-Wook;Hwang, Jong-Jin;Kim, Si-Ju
The Plant Pathology Journal
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제27권4호
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pp.324-332
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2011
Soil-borne barley yellow mosaic disease caused by Barley yellow mosaic virus (BaYMV) or Barley mild mosaic virus (BaMMV) gives a serious threat to the winter barley cultivated in the southern regions in Korea. It is important to develop resistant varieties for stable and high-yield production. The objectives of this study were to evaluate 22 genotypes of exotic barley germplasms carrying the resistance genes rym1 through rym12, with the exception of rym10, and to determine the genes that confer resistance to BaYMV or BaMMV in Korea. Using the traditional visual scoring of symptoms at 4 locations over 3 years, average disease rate values differed (P < 0.001) among the genotypes. ELISA test revealed the presence of both BaYMV and BaMMV in all of the field sites but Jinju and significantly different rates of infection among genotypes and years. Barley genotypes differed in how virus quantities and pathogen-induced symptoms were correlated, especially in response to BaYMV. Disease incidence was affected by the climatic conditions present during the early growing stage before overwintering. A Chinese landrace, 'Mokusekko 3', carrying rym1 and rym5 was comparatively resistant at all locations studied. The barley genotypes carrying either rym6 or rym9 were susceptible to the viral strains. The genotypes carrying rym5 were resistant in Jinju and Milyang but susceptible in Iksan and Naju. The resistance genes rym2 and rym3 were effective in local strains and would be potent contributors to disease resistance.
Potato Virus Y(PVY), vein necrosis strain, in Korea causes severe symptoms on burley tobacco(Nicotiana tabacum L.). As the results, programs to incorporate PVY resistance into commercial cultivars were initiatEd. But the development of the homozygous fertile line resistant to PVY is time consumming. This study was conducted whether the Fl hybrid could be used to reduce the yield losses caused by PVY. Four F1 hybrids were made between male - sterile(ms) NC 107 and KB 107 as maternal parent, and TC 612 and TC 613 as Pollen donor, respectively, and were evaluated for their PVY resistance and negatively associated traits. (ms NC 107 X TC 612) F1, named as KB 109, Ivas applied to yield trial and compared with commercial cultivars for the level of disease resistance, agronomic characteristics, chemical contents and physical properties. All Fl hybrid could be used commercially as the PVY resistant cultivar. Especially KB 109 have the resistance against PVY, tobacco mosaic virus and black shank(Phytophthora parasitica var. nicotianae). It had wider leaves, flowered one day later, and yield of acceptable quality was higher than that of Burley 21, standard cultivar in Korea.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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