$Tomato$$spotted$$wilt$$virus$ (TSWV)-infected $Capsicum$$annuum$ plants were collected from open fields during June to July in 2010. The TSWV isolates were designated as Gneung, Ghang-Kjj, Gchang-Njc, Ghae, and Pap. The nucleotide sequence of the nucleocapsid protein (N) and movement protein (NSm) of the five isolates was determined. The pathogenicity of the five isolates was determined on 14 $C.$$annuum$ cultivars two times by using mechanical inoculation. The five isolates induced different response: Both Gneung and Gchang-Kjj did not infect any of the cultivars in the 2nd trial, while Gchang-Njc, Ghae and Pap infected 11, 6 and 13 of 14 cultivars, respectively. The five isolates also were tested on $Solanum$$lycopersicum$ breeding line TGC09-71 and three $Nicotiana$ species. $S.$$lycopersicum$ showed a similar response to the five isolates as did $C.$$annuum$. Both Gchang-Njc and Ghae infected systemically all three $Nicotiana$ species tested. While both Pap and Gneung did not infect any of the $Nicotiana$ species tested. In conclusion, five TSWV isolates induced different infection spectra in $C.$$annuum$ cultivars, $Nicotiana$ species and an $S.$$lycopersicum$ breeding line. Amino acid sequence analysis of the NSm gene could not support or explain the different infection spectra of the five isolates. This study indicated that various isolates must be used as virus inocula for evaluation of $C.$$annuum$ and $S.$$lycopersicum$ cultivars in breeding programs for TSWV resistance.
This study was carried out to acquire some basic biological informations on the granulosis virus (GV) of Pieris rapae and Pieris brassicae. Purified fractions of GV capsules in an sucrose density gradient centrifugation yielded on homogenous and sharp peak without a shoulder. Electron microscopy revealed that GV capsules were mostly ovalglove in shape. P. rapae and P. rapae GV isolated from P. rapae comprised granules($396\pm38\times238\pm25nm$ for P. rapae GV. $375\pm40\times255\pm28nm$ for P. brassicae GV) which contained single virus particle. The virus particles were 250- $275{\times}63$ -73nm for P. rapae GV and 243-250 $\times$ 63-75nm for P. brassicae GV containing a nucleocapsid 225 $\times$ 31nm for P. rapae, 225 $\times$ 29nm for P. brassicae within an envelope. The virulent difference between the two viruses was very small in their virulence for P. rapae larvae showing the $LC_{50}$( -log) with 5.5673 for P. rapae GV and 5.8104 for P. brassicae GV. Also the $LT_{50}$ of the 3rd instar P. rapae larvae against $10^{-6}$ inoculum was 8.17 days for P. rapae GV and 7.16 days for P. brassicae GV.
Newcastle disease virus (NDV) is a single-stranded negative sense RNA virus, which has been classified as a member of the Avulavirus genus of the Paramyxoviridae family. It is also one of the most important pathogens in the poultry industry. The glycoproteins, fusion (F) and hemagglutinin-neuraminidase (HN), determine the virulence of NDV, and the relevant molecular structures have already been determined. NDV isolates differ in terms of virulence, and at least 2 of 9 genotypes (I-IX) have been shown to co-circulate. Therefore, it is clearly important to differentiate between vaccine strains and field isolates. In vivo pathogenicity tests have been the standard protocol for some time, but molecular methods appear preferable in terms of the rapidity of diagnosis, as well as animal welfare concerns. In this study, we have designed primer sets from HN gene for phylogenetic analysis and restriction enzyme analysis, and from F gene for pathotype-specific RT-PCR. Via the combination of 2 methods, 106 Korean NDV isolates obtained from 1980 to 2005 were differentiated into vaccine strains, and virulent genotypes VI and VII. The genotype VI viruses were only rarely isolated after 1999, and genotype VII, after it was initially isolated from poultry in 1995, recurred in 2000, and then became the main NDV constituting a threat to the Korean poultry industry.
Jang, Mun Hee;Lee, Nam-Sil;Cho, Miyoung;Song, Jun-Young
Korean Journal of Fisheries and Aquatic Sciences
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v.54
no.5
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pp.668-675
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2021
The infection status of domestic farmed eels Anguilla japonica, Anguilla bicolor and Anguilla marmorata with Japanese eel endothelial cell-infecting virus (JEECV) and anguillid herpesvirus 1 (AnHV) was examined at the major eel farming areas in Korea. These viruses were detected in all areas examined, regardless of the eel species or age. Any farm with a history of viral infection in adult fish confirmed the infection to be transmitted to stocked fry within 3 to 5 months. It is proposed that both viruses are horizontally transmitted within a given farm. The primary symptoms and histopathological lesions produced by the two viral infections are similar, making it difficult to distinguish the two diseases through clinical symptoms. Both viruses displayed 100% detection in the gills, suggesting that the gills are an optimal tissue for JEECV and AnHV monitoring. This study concluded that JEECV and AnHV were prevalent on eel farms across the country and caused very high mortality when the two viruses co-infected fry. Additional studies, including experimental infections, are needed to clearly understand the pathogenicity of each virus and the risk of co-infection.
To investigate the etiology, pathogenicity and virological properties of NYJ-1-87 strain of Aujeszky's disease virus (ADV) that was isolated from the diseased piglet in Korea, the virus at $10^{6.0}TCID_{50}/0.1ml$ was inoculated intranasally and subcutaneously into 30 to 35 days-old piglets. Results obtained through the experiments were summarized as follows. 1. Ten of the infected piglets were clinically observed for 15 days. On the 2nd day post-inoculation(pi), the signs of pyrexia, anorexia and convulsion were noted. On the 4th to 7th days pi, nervous signs of incoordination and intermittent spasm were shown in the most of piglets, and one out of 5 piglets infected intranasally was died with severe nervous signs at the 7th day pi. The signs became relieved on the 8th day pi and all of remainder were completely recovered on the 13th to 14th days pi. 2. In hematological study, prominent decrease in the number of total leukocyte and lymphocyte was shown in the ADV-infected piglets on the 6th day pi. On the 8th day pi, the cell numbers were slightly increased and returned to normal level on the 10th day pi. 3. Viral excretion of the ADV-inoculated piglets was examined by swabbing of nasal and oral cavities, and rectal feces. During the periods of the 3rd to 11th days pi, the virus was excreted intermittently from nasal and oral cavities, and rectal feces. The nasal excretions were shown the highest virus concentration of $10^{5.2}TCID_{50}/0.1ml$ at the 5th day pi. 4. Recovery of the inoculated virus from various organs of the piglets that were died or experimentally slaughtered was attempted, and the virus was isolated from the tissues of brain and tonsil by the cultured cell-inoculation method. The highest recovery rate was noted in the tonsil. By indirect immunofluorescence antibody assay using ADV-monoclonal antibody, the viral antigens were detected in tissues of spleen and liver as well as brain and tonsil on the 7th to 9th days pi. The virus was not isolated from blood and the tissues of lung and kidney throughout the experiments. 5. Titers of virus neutralizing antibody in the piglets experimentally infected with ADV became increased after the 6th to 9th days pi in both of intranasal and subcutaneous inoculation showing the highest titers of 64 to 128 on the 29th day pi. When the antibody levels were measured by radial immunodiffusion enzyme assay, the reactive diameter was enlarged to be positive after the 4th to 6th days pi in both of intranasal and subcutaneous inoculation showing the largest diameter of 13 to 14mm on the 29th day pi.
Guo, Xi;Geng, Peng;Wang, Quan;Cao, Boyang;Liu, Bin
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.24
no.10
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pp.1445-1454
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2014
Severe acute respiratory syndrome (SARS), a disease that spread widely in the world during late 2002 to 2004, severely threatened public health. Although there have been no reported infections since 2004, the extremely pathogenic SARS coronavirus (SARS-CoV), as the causative agent of SARS, has recently been identified in animals, showing the potential for the re-emergence of this disease. Previous studies showed that 27 single nucleotide polymorphism (SNP) mutations among the spike (S) gene of this virus are correlated closely with the SARS pathogenicity and epidemicity. We have developed a SNP DNA microarray in order to detect and genotype these SNPs, and to obtain related information on the pathogenicity and epidemicity of a given strain. The microarray was hybridized with PCR products amplified from cDNAs obtained from different SARS-CoV strains. We were able to detect 24 SNPs and determine the type of a given strain. The hybridization profile showed that 19 samples were detected and genotyped correctly by using our microarray, with 100% accuracy. Our microarray provides a novel method for the detection and epidemiological surveillance of SARS-CoV.
Park, Jong-Chul;Rho, Tae-Whan;Kim, Jung-Gon;Kim, Hyung-Moo;So, In-Young;Lee, Kui-Jae
Korean Journal of Plant Resources
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v.20
no.6
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pp.511-517
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2007
A stable method for strain distinction using viral RNA 1 structures analyses was developed and compared with the combined RT-PCR and RAPD methods. Seven out of 61 random primers were found to be polymorphic based on RAPD analysis resulting on the differentiation of the 33 BaYMV isolates into four distinct groups according to geographical districts. The first and largest group includes 13 isolate and consists mainly of two-rowed malting barley in Haenam area. The second group had ten collections from inland in west southern. The third group had seven isolates from west southern coastal region, where mainly six-rowed naked barley is cultivated. The last fourth group included three isolates from Gyungnam region in east southern area. Conclusively, RNA 1 analysis proved to be stable and efficient method for strain distinction for Korean BaYMV isolates. Further, results of pathogenicity and RNA 1 structure analyses revealed four groups BaYMV strains and were distributed all over Korea, represented by Naju, Haenam-okcheon, Iksan and Milyang.
Avian reovirus (ARV) and fowl adenovirus (FAdV) were evaluated for pathogenicity in specific pathogen free (SPF) chickens. ARV was isolated from the broilers with history of malabsorption syndrome (MAS). FAdV was isolated from the layer breeders with inclusion body hepatitis and hydropericardium syndrome. Total 6 inoculated groups including 1 un-inoculated group were organized and inoculated with the ARV and/or FAdV by oral route. The minimal pathological lesions and lower viral gene detection rates were present in the ARV inoculated groups compared to those of FAdV or ARV/FAdV inoculated groups. Common gross lesions in the ARV inoculated group were distended intestine with foamy contents and in the FAdV group there were foamy cecal contents and hydropericardium among the evaluation methods such as gross and histological lesion, viral gene detection, body weight and serum chemistry, histopathological lesion score was reliable especially in the liver lesions such as hepatic necrosis and lymphocytic infiltration. However, we did not success to evaluate the synergetic effect of mixed infection of ARV and FAdV in this study. Therefore, we need further study to reproduce malabsorption syndrome of ARV infection using different viral agent such as rotavirus and using different dose of virus.
Park, Chung Youl;Kim, Bong-Sub;Nam, Moon;Lee, Min-A;Baek, Da-Som;Bae, Yang Su;Park, Eun-Hye;Kim, Jeong-Sun;Choi, Jong-Yoon;Lim, Seungmo;Moon, Jae Sun;Lee, Su-Heon
Research in Plant Disease
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v.20
no.4
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pp.307-313
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2014
In May 2013, an angel's trumpet leaves showing mosaic and malformation symptoms were collected from Suwon city, Gyeonggi-do. An analysis of the collected sample by transmission electron microscopy observation showed filamentous rod particles of 720-800 nm in length. On the basis of the these observations, we performed PCR against three reported Potyviruses (Brugmansia mosaic virus, Colombian datura virus and Brugmansia suaveolens mottle virus), and the sample was positive for BruMV. Pathogenicity and host range test of BruMV was determined by mechanical inoculation. Solanaceae (tobacco, tomato and eggplant) and Amaranthaceae (ground cherry) appeared typical virus symptoms. To determine coat protein of this virus, we designed specific primer pairs, and performed PCR amplification, cloning, and sequencing. Phylogenetic analysis showed that BruMV-SW was most closely related to BruMV isolate SK. Comparison of the BruMV-SW coat protein nucleotide sequences showed 92% to 99% identities to the other BruMV isolates.
Hwang, Jee Youn;Jang, Jin Hyeon;Kim, Dong Jun;Kwon, Mun Gyeong;Seo, Jung Soo;Hwang, Seong Don;Son, Maeng-Hyun
Korean Journal of Fisheries and Aquatic Sciences
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v.50
no.5
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pp.547-552
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2017
The viral hemorrhagic septicemia virus (VHSV) has an extensive host range, and infects farmed and wild fish inhabiting both freshwater and marine ecosystems. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) is highly useful in diagnosing viral hemorrhagic septicemia. However, ELISA shows high, non-specific background reaction with fish antibodies. In this study, we optimized the antigen and antibody concentrations used for detecting specific antibodies in VHSV-infected olive flounder to reduce non-specific binding, and improve the sensitivity of ELISA. The results suggested that OD (optical Density) values were valid when ELISA was performed with $0.1{\mu}g/well$ of virus, involving blocking with blocking buffer (Roth, Roti-Block), 1:300-1:600 dilution with flounder antisera, and 1:1000 dilution with anti-flounder IgM and HRP-conjugated goat anti-mouse IgG for detecting the VHSV antibody in flounder sera. Furthermore, 11 different VHSV strains isolated in Korea from 2012 to 2016 were used to infect the fish. The results showed no correlation between viral pathogenicity and antibody production. This research is a basic study on the application of antibody detection in the diagnosis of viral hemorrhagic septicemia in the olive flounder.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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