• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제30권6호
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• pp.856-867
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• 2020

Vibrio parahaemolyticus is a major gastroenteritis-causing pathogen in many Asian countries. Antimicrobial resistance in V. parahaemolyticus has been recognized as a critical threat to food safety. In this study, we determined the prevalence and incidence of antimicrobial resistance in V. parahaemolyticus in the southern Fujian coast, China. A total of 62 isolates were confirmed in retail aquatic products from June to October of 2018. The serotype O3:K6 strains, the virulence genes tdh and trh, antibiotic susceptibility and molecular typing were investigated. Then plasmid profiling analysis and curing experiment were performed for multidrug-resistant strains. The results showed that the total occurrence of V. parahaemolyticus was 31% out of 200 samples. Five strains (8.1%) out of 62 isolates were identified as the V. parahaemolyticus O3:K6 pandemic clone. A large majority of isolates exhibited higher resistance to penicillin (77.4%), oxacillin (71%), ampicillin (66.1%) and vancomycin (59.7%). Seventy-one percent (44/62) of the isolates exhibited multiple antimicrobial resistance. All 62 isolates were grouped into 7 clusters by randomly amplified polymorphic DNA, and most of the isolates (80.6%) were distributed within cluster A. Plasmids were detected in approximately 75% of the isolates, and seven different profiles were observed. Seventy-six percent (25/33) of the isolates carrying the plasmids were eliminated by 0.006% SDS incubated at 42℃, a sublethal condition. The occurrence of multidrug-resistant strains could be an indication of the excessive use of antibiotics in aquaculture farming. The rational use of antimicrobial agents and the surveillance of antibiotic administration may reduce the acquisition of resistance by microorganisms in aquatic ecosystems.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제48권2호
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• pp.185-192
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• 2020

The global carbon storage regulator (Csr) system is conserved in bacteria and functions as a regulator in the exponential and stationary phases of growth in batch culture. The Csr system plays a role in the central carbon metabolism, virulence, motility, resistance to oxidative stress, and biofilm formation. Although the Csr was extensively studied in Gram negative bacteria, it has been reported only in the control of motility in Bacillus subtilis among Gram positive bacteria. The goal of this study was to explore the role of the csrA gene of Bacillus licheniformis M2-7 on motility and the bacterial ability to use hydrocarbons as carbon source. We deleted the csrA gene of B. licheniformis M2-7 using the plasmid pCsr-L, harboring the spectinomycin cassette obtained from the plasmid pHP45-omega2. Mutants were grown on culture medium supplemented with 2% glucose or 0.1% gasoline and motility was assessed by electron microscopy. We observed that CsrA negatively regulates motility by controlling the expression of the hag gene and the synthesis of flagellin. Notably, we showed the ability of B. licheniformis to use gasoline as a unique carbon source. Our results demonstrated that CsrA is an indispensable regulator for the growth of B. licheniformis M2-7 on gasoline.

• 대한미생물학회지
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• 제22권3호
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• pp.241-250
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• 1987

A total 64 strains of Escherichia coli including 38 strains of urinary tract infection and 26 strains from other clincal sources were studied for several properties related to the virulence markers of organisms. Urinary isolates(76.3%) showed higher frequency of mannose resistant hemagglutination(MRHA) wi th human erythrocytes(A type, $Rh^+$) than the strains of control group isolated from other sources(34.6%). Seventeen strains(44.4%) of urinary isolates and 2 strains(7.7%) of control group showed hemolysis on blood agar plate. There was no significant difference in MIC's of 23 drugs between both groups of urinary isolates and control group. But they showed high frequency of resistance to ampicillin, carbenicillin, piperacillin, kanamycin, and trimethoprim, but were very susceptible to cefotaxime, moxalactam, ceftizidime, imipenem, and norfloxacine. Fourteen strains(36.8%) of urinary isolates and 10 strains(38.5%) of control group showed conjugally transferable resistance conferred to R plasmids. The urinary isolates carried one or more to 6(mean 3.4) plasmids of approximate molecular weight ranged 3.1 to 94 megadalton(Mdal) and strains of control group carried 2 to 5(mean 3.8) plasm ids of size ranged 3.6 to 130 Mdal. The size of conjugally transferable R plasmid identified with transconjugants ranged 32 to 130 Mdal.

• 생명과학회지
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• 제24권1호
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• pp.39-45
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• 2014

S. typhimurium MMP13과 ${\chi}8554$는 독력이 약한 JOL401과 독력이 강한 ${\chi}3339$로부터 유래되었다. Heat labile subunit B (LT-B)는 백신의 효율성을 증가시키기 위한 면역보강제로서 일반적으로 사용되고 있다. 고스트 카세트를 운반하는 pMMP184를 MMP13과 ${\chi}8554$에 형질전환하여 고스트를 생성시킨 후 BALB/c 마우스에 근육으로 투여하였다. 면역 보강제가 없는 경우에는 독력에 상반하여 총 IgG 함량이 증가되는 경향성을 보였다. 반대로, 면역보강제를 발현하는 pMMP300을 운반하는 고스트 백신이 동시에 투여되는 경우에는 독력이 강한 균주에서 면역성이 증진되는 경향성을 보였다. 그러나 최종 총 IgG 농도는 유사하게 관찰되었기 때문에, 독력의 세기가 특별히 면역성에 영향을 미치지 못하는 것으로 추정된다. 다른 면역 요소인 IgG1, IgG2a, sIgAs는 특이적인 경향성을 보이지 않았다. 살모넬라 도전실험 결과 독력 유래에 상관없이 유사한 경향성을 보이는 것으로 나타났다. 이상의 결과는 고스트를 생성에 사용된 독력에 관계없이 살모넬라에 대한 면역성이 유발되는 결과를 보였다.

• The Plant Pathology Journal
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• 제25권1호
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• pp.54-61
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• 2009

An infectious full-length clone of Soybean mosaic virus (SMV) strain G5H was constructed under the control of the cauliflower mosaic virus 35S promoter. The cloned SMV G5H established infections upon simple rub-inoculation of soybean leaves with intact plasmid DNA. We demonstrated that this SMV G5H infectious DNA clone caused typical characteristic symptoms and virulence of SMV strain G5H in twelve tested soybean cultivars. Soybean cultivars Lee74, Somyungkong and Sowonkong developed systemic mosaic symptom while Kwanggyo, Taekwangkong, Hwangkeumkong and Geumjeongkong-l showed systemic necrosis. In contrast, Geumjeongkong-2, Jinpumkong-2, L29, V94-5152 and Ogden showed resistant response against SMV-G5H infection. We also determined full-length sequence of cloned SMV-G5H. The phyogenetic analyses reveal that SMV-G5H is most closely related to SMV-G5, and support that SMV-G5H might be derived from SMV-G5 by recombination rather than mutation.

• 대한수의학회지
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• 제53권4호
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• pp.199-205
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• 2013

Avian pathogenic Escherichia coli (APEC) is a causative agent for a number of extra intestinal diseases and account for significant losses to the poultry industry. Since protective immunity against APEC is largely directed to virulence antigens, we have individually expressed four different viulence antigens, papA, papG, IutA, and CS31A, using an attenuated Salmonella Typhimurium and a plasmid pBB244. Following oral immunization of mice with combination of two or four of these strains, serum IgG and mucosal IgA responses were elicited against each antigen represented in the mixture. The antigen-specific mucosal IgA responses were significantly higher in the group of mice immunized with the heat-labile Escherichia coli enterotoxin B subunit (LTB) strain than those in the group of mice immunized without the LTB strain. While, there was no significant difference between these two groups in antigen-specific serum IgG responses. The results showed that LTB could act as mucosal immune adjuvant. To assess the nature of immunity, the distribution of antigen-specific IgG isotypes was analyzed. All groups promoted Th1-type immunity as determined by the IgG2a/IgG1 ratio. Thus, our findings provided evidence that immunization with a combination of several vaccine strains is one of the strategies of developing effective vaccines against APEC.

• 대한의생명과학회지
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• 제2권1호
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• pp.31-40
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• 1996

비뇨기계 병원성 대장균의 중요한 병원성 인자 중의 하나로 인정되고 있는p-fimbriae의 subtype의 분포를 확인하기 위하여 요로감염증으로 확진된 환자의 혈청을 이용하여 immunoblotting 을 실시하였고, 이와 동시에 효소면역 측정법을 실시하여 p-fimbriae특이 항체 보유를 확인하였다. Immunoblotting 결과 우리나라 요로감염증환자에서 높은 빈도로 확인되는 p-fimbriae subtype의 분포는 $F7_1$34(56.7%), $F7_2$28(46.7%), F13 30(50%)등이 높게 나타났으며, 이와 같은 결과는 효소면역측정법에서도 동일하게 나타났다. 그러나 P-pili를 순수분리하지 않고 whole cell을 이용한 효소면역 측정법은 교차반응 때문에 비뇨기 감염증의 혈청학적인 진단에 적합하지 않는 것으로 나타났다. 또 우리 나라의 요로감염 환자에서 항체 양성율이 높은 $F7_1$, $F7_2$, F13만을 혼합하여 항원으로 이용한 효소면역측정법의 특이도와 민감도가 각각 92.6%, 90%로 나타나, 이와 같은 방법을 임상진단에 응용할 수 있을 것으로 판단되었다.

• 대한수의학회지
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• 제46권4호
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• pp.337-345
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• 2006

The shigellae are common etiological agents of bacillary dysentery in humans and primates. During four years from 2002 to 2005, 22 strains of Shigella spp. were isolated from the diarrheic patients in Seoul region. All of them were identified as S. flexneri by biochemical tests and serotyping. The prevalence of serotypes were variable by year, but the major serotypes were 2a and 3a. In an antimicrobial susceptibility test, all of the isolates were resistant to streptomycin and tetracycline, and susceptible to amikacin, kanamycin, cefoxitin, and gentamicin. All of the isolates showed the multi-resistant patterns over 3 drugs. By analysis of the plasmid profile the isolates were classified into 7 groups (P1~P7). Serotypes 2a and 2b were distributed to P1, P2, P3, and P4. Serotype 3a was differentiated to P5 and serotype 3b, to P6 and serotype 4a, to P7. PCR results showed that all isolates were positive for two virulence genes, ipaH and ial, but none of the strains had stx gene. The set1A and set1B genes were detected from 12 isolates (54.5%) that belonged to serotype 2a and 2b. The sen gene was detected from 19 isolates (86.4%). The 22 isolates showed 12 to 17 DNA fragments in the sizes ranging from 20.5 kb to 1135 kb, resulting in 13 patterns by the PFGE with Not I digestion. The PFGE patterns of the isolates showed the close relation with the serotypes, but no relations with year of isolation and antimicrobial resistance.

• 미생물학회지
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• 제41권4호
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• pp.275-280
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• 2005

Bacillus anthracis는 탄저병의 병원체이다. 탄저병의 독소는 Bacillus anthracis가 가진 세가지 독소로 이루어져 있다. protective antigen (PA), lethal factor (LF)그리고 edema factor (EF)로 구성되어 있다. PA는 세포수용체와 결합하여 활성화 과정을 거친 후 LF 흑은 EF를 세포질 안으로 이동시켜 주는 역할을 한다. LF는 금속이온 $(Zn^{2+})$ 의존적 단백질 가수분해 효소로써 탄저병에 감염된 동물들의 치사독소로 작용하게 된다. 따라서 LF에 대한 특성 분석 및 억제재 개발에 관한 연구는 탄저치료제 개발에 매우 중요한 과정이라 할 수 있다. 본 연구에서는 탄저독소의 치료제 개발을 위해 선행되어야 하는 LF 고처리량 활성검증방법 및 저해제 선별에 더 높은 효율을 가지기 위해 이러한 시스템 방법 등을 이용하여 세포내 검정방법의 기초 자료를 마련하고자 하였다. 이를 위하여 yeast를 숙주로 한 LF 발현 vector의 구축과, 구축한 발현 시스템을 yeast에 형질전환 하여 plasmid의 안정성 및 LF유전자의 발현을 확인하였다. 본 연구는 LF유전자의 발현을 진핵세포 내에서 처음으로 시도했으며, 세포내 검증 시스템 도입의 기초적 자료를 제공하였다. Yeast내에서의 LF의 발현은 탄저병의 저해제 선별이나 활성측정검증을 생체 내에서 용이하게 할 수 있다는 가능성을 나타냈다.

• 생명과학회지
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• 제31권1호
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• pp.28-36
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• 2021

Edwardsiella piscicida는 어류의 출혈성 패혈증 및 사람의 위장 감염의 중요한 원인균이다. 세균이 생존을 하기 위해서는 환경변화에 적응하기 위한 특수한 메커니즘이 필요하다. 따라서 E. piscicida가 삼투압 변화 환경을 감지하고 이에 반응하는 메커니즘을 이해하기 위하여 본 연구에서는 다양한 염도 조건에서 단백질 발현 형태와 세균의 생리적 특성을 분석하였다. EnvZ-OmpR의 two-component 조절 시스템의 일부인 OmpR 단백질은 세균의 염분 스트레스 감지와 관련이 있다. 이 단백질이 E. piscicida에서 어떤 생리적 역할을 하는지는 밝혀지지 않고 있다. 이 연구에서는 염분 스트레스에 대한 OmpR 단백질의 기능을 조사 하였다. OmpR을 발현하지 못하는 돌연변이체를 분석한 결과 구연산염 이용, H2S 생성 및 인돌 생산의 능력이 야생형과 비교했을 때 차이가 나는 것으로 확인되었다. 전체 ompR 유전자를 가지는 플라스미드를 돌연변이 균주에 도입하여 분석한 결과 위의 세가지 표현형은 야생형과 같아졌다. 지연된 성장률도 부분적으로 회복되었음을 볼 수 있었다. 이 연구에서 OmpR이 세포 운동성과의 관련성을 찾아볼 수 없었다. 이 연구의 결과들을 종합하면, 돌연변이 분석, 성장 분석, MALDI-TOF MS, qRT-PCR 및 표현형 연구 결과는 E. piscicida의 OmpR이 삼투압 조절, 생육, 포린 발현, 독성 관련 유전자(eseC, eseD 및 evpC) (ETAE_1826) 및 기능을 알 수 없는 특정 유전자(ETAE_1540 및 ETAE_2706)와 관련이 있다고 사료된다.