양서류 피부과립선의 미세구조를 관찰하기 위하여 무미양서류인 무당개구리(Bombina orientalis), 두꺼비 (Bufo bufo gargarizans), 개구리 (Rana nigromaculata) 및 옴개구리 (Rana rugosa)의 피부조직은 2.5% glutaraldehyde-paraformaldehyde (pH 7.2)와 1%osmium tetroxide에 전후 고정한 후 ethanol과 acetone으로 탈수, Epon 812 mixture에 포매하여 LKB ultramicrotome으로 초박절표본을 만들어 uranyl acetate와 lead citrate으로 염색하여 JEOL-100B형 전자현미경으로 관찰하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 양서류 피부과립선은 선상피세포와 근상피세포로 이루어졌다. 2. 양서류 피부과립선의 선상피세포는 암세포들로 구성되었으나 무당개구리에서는 명세포도 관찰되었다. 3. 양서류 피부과립선은 전분지를 하였다. 4. 양서류 피부과립선 상피세포의 핵은 원형 내지 타원형으로 크고 작은 핵경함요를 보였고, heterochromatin은 주로 핵경 인접부에 많았다. 세포질에는 mitochondria가 핵주변부에 비교적 많이 산재하였고, rough-surfaced endoplasmic reticulum은 핵 주변부에 발달하였지만 smooth-surfaced endoplasmic reticulum은 미약하였다. 5. 분비과립들은 구형 또는 난형으로 높은 전자밀도를 보였으며 다소 약한 전자밀도를 보이는 과립도 관찰되었다. 6. 양서류 과립선내 분비과립들이 같은 세포내에서 다소 전자밀도의 차이를 보이는 것은 분비과립의 형성단계에 따른 농도 차이에 기인하며 그 화학적 조성은 유사하다고 생각된다.
양서류 피부 점액선의 선상피세포의 미세구조를 관찰하기 위하여 양서류 피부조직을 2.5% glutaraldehyde-paraformaldehyde(pH7.2) 1% osmium tetroxide에 전후 고정 한후 ethanol과 aceton으로 탈수, Epon 812에 포매 Sorvall MT-2B ultramicrotome으로 ultrathin section을 만들어 uranyl acetate와 lead citrate으로 염색하여 JEOL-100B형 전자현미경으로 관찰하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 양서류 피부 점액선은 선상피세포와 근상피세포로 이루어졌다. 2. 양서류 피부 점액선의 선상피세포는 미세구조적인 면에서 종에 따라 여러형의 세포들이 관찰되었다. a. 도롱뇽에서는 암세포와 명세포가 관찰되었다. b. 무당개구리에서는 mitochondria가 많은 세포와 원형의 분비과립을 갖는 세포들이 관찰되었다. c. 맹꽁이에서는 구형의 분비과립을 갖는 세포와 거품모양의 과립괴를 갖는 세포들이 관찰되었다. d. 개구리 피부 점액선은 A형과 B형점액선으로 구분되었고, A형점액선 상피에서는 mitochondria가 많은 세포와 원형의 분비과립을 갖는 세포, B형점액선 상피에서는 mitochondria가 많은 세포와 많은 분비과립을 갖는 세포 및 거의 전 세포질이 endoplasmic reticulum으로 채워진 세포들이 관찰되었다. 3. 위의 사실들로 미루어 양서류 피부점액선의 선상피는 mitochondria가 많은 미분화세포와 점액분비과립을 많이 함유한 성숙세포 및 전 세포질이 거의 rough endoplasmic reticulum으로 채워진 분비후기세포로 구성된다고 생각된다.
The pathway and time course of fucose-containing glycoprotein synthesis and intracellular translocation in osteoclasts of the mice maxillary alveolar bone were investigated by electron microscopic radioautography. Male Balb-C mice weighing 17gm were anesthetized with Nembutal and injected via the external jugular vein with 2.5 mCi of $L-[6-^{3}H]-fucose$ (specific activity 16.8 mCi/mmol) in 0.1 ml of sterile saline solution. At 5, 10, 20, 35 minutes and 8 hours after administration of the $^{3}H-fucose$, animals were killed by intracardiac perfusion of 30ml of 2% glutaraldehyde in a modified Tyroid solution, pH 7.4. The maxillae were then removed and further fixed in Karnovsky fixative for an additional 3-4 hours. After rinsing in 0.1M cacodylate buffer for 10 minutes, the maxillae were demineralized for 2 weeks at $4^{\circ}C$ in ethylene diamine tetra acetate containing 2% glutaraldehyde. The first interdental areas were mesiodistally sectioned into slices of 1mm thickness and postfixed in osmium tetroxide. Tissues were then dehydrated and embedded in Poly Bed. To prepare electron microscopic radioautography, the dipping method of Kopriwa (1973) was employed. Thin sections were coated with a crystalline monolayer of ILford $L_4$ photographic emulsion. After exposure for 4 months at $4^{\circ}C$, the sections were developed Kodak Microdol-X and Phenidon (for compact grains), fixed in 30% sodium thiosulfate, stained with uranyl acetate and lead citrate and examined in the electron microscope (JEOL 1200 EX). At 5, 10 and 20 minutes after injection, $^{3}H-fucose$ was concentrated in Golgi cisternae of the osteoblasts. By 35 minutes the labels were observed over small vesicles in the suprannclear area of osteoclasts. At 8 hours, numerous silver grains were located on the ruffled border and cell membrane of osteoclasts. These results indicate that fucose molecules are added in the Golgi apparatus and small vesicles appear to be responsible for translocation of the glycoproteins to the marginal portion of osteoblasts. The glycoproteins are distributed on the osteoclast cell surface and especially over the ruffled border.
The authors observed the ultrastructure of oral leukoplakia simplex of gingiva, buccal mucosa, tongue and alveolar ridge. For the purpose of clearly defining the lesions under investigation in this study, leukoplakias were cinsidered to be any white patches on the oral mucous membranes that could not be removed by rubbing and could not be classified clinically or microscopically as another diagnosable disease. The tissue to be examined were embedded in paraffin for light microscopic study. The tissue to be examined under the electronomicroscope were fixed in 2.5% glutaraldehyde in 0.1M cacodylate buffer and 1% osmic acid in 0.1M cacodylate buffer, dehydrated with guaded alchol, and treated with propylene oxide, and embedded in Epon.Ultrathin sections were obtained by LKB III ultrotome, stained with uranyl acetate/lead citrate, and examined with Corinth 500EM. The results were as follows : 1. Epithelium of leukoplakia consisted of stratum basale, stratum spinosum, stratum granulosum and stratum corneum. 2. There was hyperorthokerotosis or hyperparakeratosis. 3. Granular cells contained a lot number of membrane coating granule showing lamellar structure, clearing ot codensation, and a lot of keratohyaline granule varied in size. 4. An increased concentration of tonofilaments and an increased number of desmosomes were found in the stratum spinosum. 5. Basal lamina generally showed its continuity, but in some locatoins, its interreption and multiplication appeared.
Kim, Ki-Woo;Lee, In-Jung;Hyun, Jae-Wook;Lee, Yong-Hoon;Park, Eun-Woo
The Plant Pathology Journal
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제26권1호
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pp.90-92
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2010
Staining profiles and bacterial morphology were compared in Xanthomonas citri pv. citri by a transmission electron microscopy. Four types of negative staining regimes were employed depending on culture media and heavy metal stains. The bacterial cells grown on LB agar media often appeared clustered on the supporting film. Meanwhile, individual bacterial cells could be readily found on the preparations from LB broth media. Typical rod-shaped cells (ca. $1\;{\mu}m$ in length) and their flagella were observed in either 2% uranyl acetate (UA) or 2% neutralized potassium phosphotungstate (PTA) staining. The UA-stained bacteria often showed relatively intact cell morphology and rather positively stained cells with a thin electron-dense stain depth around bacteria. The PTA-stained bacteria were characterized by the wrinkled cell surface where the stain was entrapped in grooves. In addition, distinct electron-dense stain depth was evident around the PTA-stained preparations. Numerous fimbriae could be mostly observed from the PTA-stained preparations of the two culture media, but not from the UA-stained preparations.
본 연구는 실험용 려 12마리를 정상관, 2주 고정군, 4주 고정군에 각각 4마리씩 배정하고 석고 고정 기간 후 비복근의 절편을 취하여 투과전자현미경으로 형태학적 관찰을 한 결과를 다음과 같이 요약할 수 있다. 골격근을 짧은 위치로 일정 기간 고정하면 근절의 길이와 폭은 물론 삼조체, 글리코겐, 필라멘트 단백질, 미토콘드리아와 근 세포 핵의 모양까지도 심한 변화가 일어나기 때문에 구축과 위축의 개념에 근원 섬유의 조직, 형태학적 의의를 추가하여야 할 것으로 사료된다.
Conidio spores of Aspergillus niger (strain No. NRRL 330) cultured on potato dextrose agar media were studied by electron microscopy, using the thin sectioning techniques. Conidio spores to be sectioned were fixed by triple methods with $K_2Cr_2O_7$, Glutaraldehyde and $OsO_4$. After dehydrated with alcohol, the specimens were embedded in metacrylate and epon resin media, and thinly sectioned by Porter-Blum MT-2. After sectioned these specimens were negative-stained with uranyl acetate and observed. by Hitachi HS-6 electron microscope. The results of this experiment were summarized as follows. 1. The structures of spore ,wall system seem to be formed 4 layers; exosporium, basal layer, spore coat and unit cell membrane. The protuberance of spore surface that was looked like hair appears to be protrusived from the basal layer. 2. The 3 layers of unit cell membrane was constituted outer layer membrane, inner layer membrane and inter-mediate light layer. 3. The structures of intra cytoplasmic membrane appear as spiral form which was consisted of 3 layers membrane system; outer membrane, inner membrane, and intermediate layer, which has pits. 4. The cement substance of spore coat and cortex may be changed quantitatively by physiological state in cell. 5. In some cases, we observed that the ribosome was transformed into poly ribosome group, and the storage materials and the protein crystals were changed variously. It. has been suggested that the morphological change of some cytoplasmic materials may be caused by some specialized function of the physiological stage.
For this investigation, author isolated Streptococcus mitis strain SD-9 from the bacterial flora in the human dental plaque, which was incubated in brain-heart infusion media containing 5% sucrose at 37℃ for 24 hours. For the cytochemical demonstration of polysaccharide produced by this strain, a modified thiosemicarbazide osmium method (Critchley et al., 1967) was used. After fixation with this reagent, the harvested cells was suspended in 1% agar for the higher concentration of cells(Kellenberger et al., 1964). And they were dehydrated in the various concentration of ethanol, and embedded in Epon 812(Luft, 1961). Sectioning was done with the Sorvall MT-2 Porter Blum ultramicrotome by means of a glass knife, and the sections were stained with saturated uranyl acetate and lead citrate (Raynolds, 1963). All preparations were examined in a electron microscope, Hitachi HU-ll E-1 type. The morphological features of extracellular polysaccharide produced by Streptococcus mitis strain SD-9 were appeared in 3 structurally different forms, those are, electron dense fibrillar material linearly arranged adjacent to the outer surface of cell wall, highly electron dense globular material adjacent to the outer surface of cell wall, and strutureless fluffy meshwork of possible very fine filament.
Degeneration of the axon terminals of mamillo-thalamic tract following the electrical coagulation of mamillary body is well known. In this study, the author investigated the ultrastructural alterations of neuropil components, initiated by terminal degenerations. Rats weighing approximately 250 gm were fixed on the stereotaxic instrument(David Kopf Inc., Heavy duty model), and NE 300 active electrode(Rhodes Med. Instr. Inc.) was introduced to the mamillary position of anterior 3.8 mm, lateral 0.5 mm, height 3.8 mm and lateral angle of $23^{\circ}$ according to De Groot's Atlas. Electric current of 20 mA was applied during 1 minute between active and inactive electrodes with Radio Frequency Lesion Generator(RFG 4, Radionics Inc.). Two hours, 2 days, 1 week and 2 weeks following the electrical coagulation of mamillary body, ipsilateral anterior thalamic nucleus was fixed in 1% glutaraldehyde-l% paraformaldehyde and 2% osmium tetroxide, embedded in Araldite mixture, cutted with LKB ultra tome V, stained with uranyl acetate-lead citrate and observed with JEOL 100 CX electron microscope. Observed results were as follows; 1. Degenerated mamillo-thalamic synapses were observed to form asymmetric axospinous or axo-dendritic types. 2. Terminal degeneration was not easily discernible at 2 hours interval after mamillary lesion, but following 2 days the terminal degeneration was apparent. 3. Postsynaptic spines, dendrites and even their cell bodies show edematic changes caused by the degeneration of postsynaptic counterpart. 4. Astrocytic territories, including perivascular processes forming glial limitans of blood-brain barrier, exhibit remarkable expansion. 5. Oligoglia and astroglia are actively engaged in the removal of degenerated elements. 6. Active forms of microglia were increased. 7. The observed results may represent typical ultrastructural alteration pattern within neuropil following the degeneration of certain input axon terminals.
This study was carried out to investigate the ultrastructural changes of the proximal epiphyseal plate of the femur in young chickens that had been treated with monosodium glutamate(MSG). Eighty 1-day old broiler chickens(Hubbard strain) were divided into control and experimental groups. The experimental group received daily administration of MSG(3mg/g of body weight in 0.75% saline) per orally for 1, 3, 6, 9, 12, 15, 18 and 21 days, and were sacrificed with exanguination. The control group received an equal volume of 0.75% saline. For the transmission electron microscopy, the prehypertrophic cartilage zone of epiphyseal plate was cleaved, fixed with 2% glutaraldehyde(containing 0.2% ruthenium red), postfixed with 1 % osmium tetroxide, embedded in Epon 812, and stained with uranyl acetate and lead citrate. For the scanning electron microscopy, the calcified zone of epiphyseal plate was cleaved and coated with gold palladium. The results obtained were as follows; 1. On transmission electron microscopic examination, the sacculation decreased from 12 day to 21 day MSG administrated groups, and the vesiculation decreased in 18 and 21 day MSG administrated groups in rough endoplasmic reticulum of chondrocytes in prehypertrophic cartilage zone. The ruthenium red binding particles in pericellular rim, territorial matrix and interterritorial matrix increased from 9 day to 21 day MSG administrated groups, but the crystalloid materials decreased. 2. On scanning electron microscopic examination, the trabecular formation and calcospherites of calcification zone decreased in 18 and 21 day MSG administrated groups. The resorption cavities widened from 15 day to 21 day MSG administrated groups.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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