Potato spindle tuber viroid(PSTVd) RNAs were isolated from PSTVd-inoculated potato cv. Superioc and carried out RT-RCR with reverse transcriptase and PSTVd specifie primer pair desigened to amplify the 356 nucleotides of PSTVd genome. As a result, 356 nucleotides PCR products were amplified from PSTVd-inoculated potato cv. Superior. The 356 nucleotides DNA fragment was indeed the PSTVd geneby sequencing analysis. PSTVd could be successfully detected from infected leaf and tuber tissue of potato by using RT-PCR technique. Especially PSTVd was more effectively detected when both downstream and upstream primer were used than only downstream primer was used in RT reaction.
Protopasts were isolated from cultured cells of potato (Solanum tuberosum L.) tuber tissue. The ability of callus formation from the culture cells was higher in cultivars Dejima and Superior than in Shimabara and Irish Cobbler on Lam's medium. Therefore, the former was used as sources for protoplast isolation. Friable calli were transferred to liquid media and cells in exponential phase were used for protoplast isolation. In both of Dejima and Superior, the yield of protoplasts was high in the enzyme solution of 2% Onozuka cellulase and 1% macerozyme. Also, viability of isolated protoplasts was very good. Thus, it seems that these protoplasts would be applicable to various aims of research.
Smitha Devi, Padmavathi Amma Somasekharan Nair;Hemanthakumar, Achuthan Sudarsanan;Preetha, Thankappan Suvarna
Journal of Plant Biotechnology
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v.49
no.3
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pp.230-239
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2022
Holostemma annulare (Family Asclepiadaceae) is an invaluable vulnerable medicinal plant; the root tubers are used in Ayurveda medicine and by folk healers to treat various ailments. In this study, Schenk and Hildebrandt medium fortified with the cytokinins 6-benzyl adenine, kinetin, and auxins, including indole 3-butyric acid, indole 3-acetic acid, α-naphthaleneacetic acid, and 2,4-dichlorophenoxyacetic acid, were checked for their efficiency on root tuber induction from different explants. Adventitious root tubers were more successfully induced from in vitro leaf segments and shoots when cultured in Schenk and Hildebrandt medium supplemented with 0.5 mg/l of α-naphthaleneacetic acid. In addition, preliminary phytochemical analysis of in vitro root tubers and identification of different secondary metabolites were conducted. Thin layer chromatography and high performance thin layer chromatography analysis of the crude methanolic extracts of the in vitro root tuber identified the presence of lupeol, a bioactive triterpene. Adventitious root tuber induction offers a novel method for the in vitro production of bioactive metabolites that can be scaled up by bioreactors, thus ensuring the conservation and sustainable utilization of H. annulare. The study warrants further scale-up production and pharmacological investigation that can be extended for pharmaceutical needs.
Journal of Practical Agriculture & Fisheries Research
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v.5
no.1
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pp.20-27
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2003
This experiment was carried out to develop an acclimatization system of tissue cultured seedling in Zantedeschia spp. There was not different in percentage of leaf emergence by the media compost of acclimatization but tuber was enlarged in sand(50%)+peatmoss(50%) treatment after 6 months growth. The optimum time for the acclimatizantion of Zantedeschia spp. was from the 20th of March to 20th of April. During this time, rate of acclimatization reached over 90 percentage. However on the 20th of august, acclimatization was low to 64-70.4 percentage. Size of tuber was enlarged in planting on the 20th of March. The weight of tuber was better in 10×10cm density of planting than others.
This study was conducted to obtain the basic breeding information of Colocasia esculenta Schott. Effect of supplemental plant growth regulators and genotype difference were investigated on dormant bud tissue for proliferation. The plant regeneration ratio, plant height and root length were the best upon mixed treatment of 0.8mg/L IAA and 2.0mg/L zeatin. Both leaf weight and root weight were heavy upon culture in a dark condition. The leaf and root weights were heaviest in 6Pie sucrose concentrations. In several collected area the heaviest one was Binnangxin and then in the order of Suwon, Wanju and Puan. Genotype differences of tuber diameter and tuber weight were found in Suwon. Tuber weight was found in the order of Suwon (862mg) >Wanju(723mg) >Puan(649mg) >Binnangxin (424mg).
A PT-PCR (reverse transcription-polymerase chain reaction) diagnostic method for potato virus Y (PVY) was developed using primer pair derived from conserved region of coat protein genes of several PVY strains, A 764 bp PCR product was detected from several lines of potato cv. Atlantic. We could prove that the 764 bp DNA fragment was indeed the PVY gene by sequencing analysis. PVY detection method using RT-PCR technique was about tuber tissue.
Two potato (Solanum tuberosum L.) cultivars were transformed by Agrobacterium tumefaciens harboring cauliflower mosaic virus (CaMV) 35S promoter and $\beta$-glucuronidase (GUS) gene. Expression patterns of the CaMV 35S promoter according to tissue types and developmental stages, and genetic stability of GUS gene were investigated in the clonal progenies of transgenic potatoes. Kanamycin-resistant shoot emerged from tuber disc after 4 weeks of culture, and root was induced 6 weeks after culture on the selection medium. Shooting frequency of cvs. Superior and Dejima were 43% and 27%, respectively. Mature transformants and their clonal progenies showed no phenotypical abnormality. GUS activity was expressed primarily at parenchymatous cells of phloem tissue around the vascular cambium in the stem and root, and higher activity was found at the apical meristem of shoot, root and adventious shoot bud. GUS activity was higher at tubers of young explants than at stored tubers. These facts indicate that expression level of the CaMV 35S promoter differed according to tissue types and developmental stages of the organs. The GUS gene was stably inherited to each clonal progeny and normally expressed.
In Japan, propagation of cyclamen is mainly from seedlings. However, seeds are expensive and germination is slow and non..uniform. Therefore, to achieve genetically uniform propagation, multiplication must be vegetative. The rooted tuberous stems without shoots as sources of explants were cultured on the media containing BA and sucrose. After 30 days cultivation, tuberous roots were produced from the root ends attached to a tuberous stem and its capability was dependent on the type of media. The highest percentage of tuberous root formation was observed in Culture on the medium of 1/3 MS containing 0.05mgL$^{-1}$ NAA, 0.5mg L$^{-1}$ BA and 5% sucrose. Growth rates of the tuberous roots were greatly influenced by the cutting positions of a root in explants. The highest growth of was observed if small amount of root end was cut at initiation of tissue culture.
This study was conducted to examine the effects of explant sources and plant growth regulators on mass propagation of Cyclamen persicum. Tuber, cotyledon, and petiole tissues were cultured on MS medium supplemented with different concentrations and combinations of auxins and cytokinins. Shoots were not induced from calli on cotyledon and petiole explants cultured on MS medium containing various concentrations of 2,4-D or NAA. However, multiple shoots were formed directly from tuber explants cultured on the medium containing 0.5 and 1.0 mg/L 2,4-D or NAA. In MS medium with cytokinin alone, TDZ was more effective in shoot formation than BA or kinetin in all explants. The combinations of NAA and BA was found to be most effective in shoot formation from tuber, cotyledon and petiole explants. Especially, shoots were formed from all the tuber explants on the medium containing 0.5 mg/L of NAA and BA. Hormonal effects on root formation were examined by subculturing single shoots on MS medium containing NAA or IBA. The medium with 0.5 mg/L IBA was most effective in root induction and subsequent plantlet regeneration.
The cultivated potato as well as its tuber-bearing relatives are considered model plants for cell and tissue culture, and therefore for exploiting the genetic variation induced by in vitro culture. The association between molecular stability and tissue culture in different genetic backgrounds and ploidy levels has already been explored. However, it still remains to be ascertained whether somaclonal variation differs between callus-derived chromosome-doubled and undoubled regenerants. Our research aimed at investigating, through amplified fragment length polymorphism (AFLP) markers, the genetic changes in marker-banding patterns of diploid and tetraploid regenerants obtained from one clone each of Solanum bulbocastanum Dunal and S. cardiophyllum Lindl (both 2n = 2x = 24) and tetraploids from cultivated S. tuberosum L. (2n = 4x = 48). Pairwise comparisons between the banding patterns of regenerants and parents allowed detecting considerable changes associated to in vitro culture both at diploid and tetraploid level. The percentages of polymorphic bands between diploid and tetraploid regenerants were, respectively, 57 and 69% in S. bulbocastanum and 58 and 63% in S. cardiophyllum. On average, the frequencies of lost parental fragments in regenerants were significantly higher than novel bands both in S. bulbocastanum (48 vs. 22%) and S. tuberosum (36 vs. 18%) regenerants. By contrast, in S. cardiophyllum, a similar incidence of the two events was detected (32 vs. 29%). Our results revealed that structural changes after tissue culture process strongly affected the genome of the species studied, but diploid and tetraploids regenerated plants responded equally.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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