본 연구에서는 Clostridium ljungdahlii 배양에서 유기질소공급물인 tryptone과 sodium tungstate의 배양액 내 농도가 균주 성장과 아세트산, 에탄올 생산에 대한 영향을 확인하기 위한 실험을 수행하였다. 대조군 실험의 배지 조건(0 g/L tryptone)보다 tryptone 2.5 g/L를 투입한 경우 균주 성장이 144.6% 증가하였고, 에탄올 및 아세트산 생산은 각각 8.6%와 36.7% 향상되었다. 대조군 실험에 사용된 배지의 조건(0.01 µM Na2WO4·2H2O)보다 100배인 1 µM Na2WO4·2H2O를 사용한 실험군에서, 균주 성장과 C2 대사산물의 총생산량에는 큰 차이가 없지만, 에탄올 생산 증가하고 아세트산 생산은 감소하여 에탄올/아세트산 생산비가 0.56로 대조군의 0.24에서 크게 증가하였다.
농업 환경 중에 과잉으로 축적한 질산이온의 제거를 위하여, 질산이온 흡수력이 우수한 Enterobacter amnigenus GG0461 균주를 분리하였다. 이 균주는 Pseudomonas agar F (PAF) 배지에 배양하였을 때, 3,000 ppm (50 mM) 이상의 질산이온 흡수가 가능하므로, 농업용 토양, 축산폐수, 산업폐수를 포함한 오염된 환경의 질산이온 제거를 위한 좋은 후보 균주가 될 수 있다. GG0461 균주의 대량생산을 위한 상업용 배지를 개발하기 위하여 PAF 배지 성분을 상업용 재료로 대체하고, 균주의 성장과 질산이온 흡수 활력을 측정하였다. 탄소원인 글리세롤은 상업용 제품으로 대체하였고, 질소원으로 tryptone과 효모추출물, 대두박, 생선발효액을 배양실험에 사용하였다. 균주의 성장과 질산이온 흡수활력은 2% tryptone을 첨가한 배지에서 가장 우수하였고, 효모추출물, 대두박, 생선발효액의 순으로 효과가 나타났다. Tryptone을 2% 첨가한 배지에서 균주의 질산이온 흡수는 배지의 pH를 낮추었으며, 이것은 질산이온의 흡수가 nitrate/proton antiporter의 활성으로 나타남을 의미한다. 이상의 결과에서 상업용 tryptone을 사용한 배지는 균주의 생리활성에 적합하였으며, peptone을 제외한 PAF 배지의 각 성분은 그것에 해당하는 상업용 재료로 대체할 수 있었다. 결론적으로, GG0461 균주의 배양을 위한 상업용 배지성분 조성은 2% tryptone과 1% glycerol, PAF 배지를 위한 무기이온들로 결정하였다.
Cordyceps militaris의 액체 배양시 cordycepin(3'-deoxyadenosine) 생성에 영향을 주는 물리화학적 조건 및 배지 조성의 영향을 조사하였다. 사용된 17종 균주 중에서 C. militaris KCTC 6862, C. militaris KCTC 16932 및 C. militaris DGUM 32003이 우수한 cordycepin생산성을 보여주었다. Cordycepin생산에 적합한 최적 온도와 PH는 각각 $24^{\circ}C$와 pH 6.0-10범위이었다. YM배지에 탄소원으로 glucose를, 질소원으로 tryptone을 각 1% 첨가하였을 매 우수한 cordycepin 생산을 보여주었다. Tryptone을 질소원으로 하는 YMG 액체배지에서 5일간 배양하였을 경우, 39mg/l의 cordycepin의 농도가 측정되었다. 0.1%의 다양한 인산원을 각각 첨가한 결과, cordycepin생산을 저해하였다.
Silva, Filomena;Passarinha, Luis;Sousa, Fani;Queiroz, Joao A.;Domingues, Fernanda C.
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제19권11호
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pp.1408-1414
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2009
The obtention of high yields of purified plasmid DNA is viewed as an essential issue to be considered towards efficient production of DNA vaccines and therapeutic plasmids. In this work, Escherichia coli $DH5\alpha$. bearing the pVAXI-LacZ plasmid was grown in a developed semi-defined medium at different temperatures and tryptone concentrations. Analysis of pDNA yields and E. coli morphology revealed that at higher temperatures (37 and $40^{\circ}C$), higher specific yields and E. coli filamentation were obtained. However, the best results were achieved when a lower tryptone concentration was used. This approach was shown to be a powerful tool to promote plasmid amplification, keeping the desirable plasmid structure, and favoring the attainment of quality. Our results suggest that by using tryptone alone as an amino acid source, pDNA amplification was improved and a specific yield of 20.43 mg pDNA/g dcw was achieved, proving that this strategy can improve pDNA yield even at a small scale.
This study aimed to optimize the culture conditions to improve the crude biosurfactant activity of Bacillus pumilus IJ-1, using a 33 full-factorial design of response surface methodology (RSM). It was found that submerged fermentation of B. pumilus improved the activity of the crude biosurfactant. The factors selected for optimization were NaCl concentration, temperature, and tryptone concentration. Response surface analysis revealed that the fitted quadratic model was statistically significant and produced an adequate R2 value (0.9898) and a low probability value (<0.0001). The optimum level for each factor was found to be 0.567% (w/v) NaCl, 21.851℃ and 0.765% (w/v) tryptone, respectively. Crude biosurfactant activity was found to be most affected by tryptone concentration; then temperature, and finally NaCl concentration. Our results may potentially facilitate large-scale biosurfactant production from B. pumilus IJ-1.
Bacteriocin-producing lactic acid bacteria, Lactococcus sp. HY 449, was isolated from dairy products. Using response surface methodology, the various concentrations of medium compo- nents (tryptone, glucose, yeast extract, tween 80, and initial pH) were tested to find the optimum conditions for maximum bacteriocin production and growth of Lactococcus sp. HY 449. Central composite design was used to control the concentrations of medium components in the experiment. Bacteriocin production and cell growth of Lactococcus sp. HY 449 were most affected by glucose and yeast extract. Estimated optimum growth conditions of Lactococcus sp. HY 449 were as follows; tryptone 1.08%, glucose 1.129%, yeast extract 0.674%, tween 80 0.11%, and initial pH 7.19. Also estimated optimum conditions for bacteriocin production were tryptone 0.937%, glucose 1.108%, yeast extract 0.163%, tween 80 0.09%, and initial pH 6.98.
키토산분해효소를 분비하는 세균 Bacillus sp. P16의 최적배양조건을 조사하였다. 키토산분해효소 생산을 위한 최적 탄소원은 0.5%분말 키토산이었으며, 최적 질소원은 1% tryptone이었다. 최적온도는 $37^{\circ}C$였으며, 최적 초기 pH는 7.0이었다. 이 조건에서 $60{\sim}$72시간 배양하였을 때 효소 생산이 최고에 도달하였으며, 효소활성은 약 30% 증가하였다. 이를 발효조에서 배양하면 $6{\sim}$12시간 배양으로 최대활성에 도달하였으며, 효소 생산은 약 100% 증가하였다.
Salinity of soils in greenhouse has been increased by massive application of fertilizers. Nitrogen fertilizer was most popular, and thus nitrate became the majority of soil salinity. Accumulation of nitrate led to deleterious effects on the growth and development of crops and vegetables. Microbial strains able to utilize nitrate and thus remove excess nitrate from farm land soils were isolated from 15 different soils of greenhouses and plastic film houses. Four strains able to grow in medium containing 50 mM $KNO_3$ were isolated, among which only E0461 showed high capacity of nitrate uptake. Nitrate uptake by E0461 was dependent on culture medium and was increased by addition of tryptone and peptone. Although E0461 was able to grow without tryptone and peptone, growth was slow, and no nitrate uptake was observed. Nitrate appeared to facilitate E0461 growth in the presence of tryptone and peptone. Through kinetic analysis, nitrate uptake was measured at various concentrations of nitrate, and half-life was calculated. Nitrate concentration decreased with increasing incubation period, and plot between half-lives and initial concentrations of nitrate fitted to single exponential function. These results suggest one major factor plays an important role in microbial nitrate uptake.
Optimization of the culture medium to maximize menaquinone-7 (MK-7) production by Bacillus subtilis strain KCTC 12392BP in static culture was carried out using statistical experimental methods, including one factor at a time, fractional factorial design, and response surface methodology (RSM). Maltose (carbon source), tryptone (nitrogen source), and glycerol (activator) were identified as the key medium components for MK-7 synthesis by the fractional factorial design, and were selected for statistical optimization by RSM. The statistical analysis indicated that, in the range that was studied, maltose, tryptone, and glycerol were all critical factors having profound effects on the production of MK-7, with their coefficients for linear and quadratic all significant at the p < 0.05 level. The established model was efficient and feasible, with a determination coefficient ($R^2$) of 0.9419. The predicted concentrations of maltose, tryptone, and glycerol in the optimal medium were determined as 36.78, 62.76, and 58.90 g/l, respectively. In this optimized medium, the maximum yield of MK-7 reached a remarkably high level of $71.95{\pm}1.00{\mu}g/ml$ after 9 days of static fermentation, which further verified the practicability of this optimized strategy.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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