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Knockdown of UHRF1 by Lentivirus-mediated shRNA Inhibits Ovarian Cancer Cell Growth

  • Yan, Feng;Shao, Li-Jia;Hu, Xiao-Ya
    • Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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    • 제16권4호
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    • pp.1343-1348
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    • 2015
  • Human UHRF1 (ubiquitin-like PHD and RING finger domain-containing 1) has been reported to be over-expressed in many cancers, but its role in ovarian cancer remains elusive. Here, we determined whether knockdown of UHRF1 by lentivirus-mediated shRNA could inhibit ovarian cancer cell growth. Lentivirus-mediated short hairpin RNAs (lv-shRNAs-UHRF1) were designed to trigger the gene silencing RNA interference (RNAi) pathway. The efficiency of lentivirus-mediated shRNA infection into HO-8910 and HO-8910 PM cells was determined using fluorescence microscopy to observe lentivirus-mediated GFP expression and was confirmed to be over 80 percent. UHRF1 expression in infected HO-8910 and HO-8910 PM was evaluated by real-time PCR and Western blot analysis. The Cell Counting Kit-8 (CCK-8) assay was used to measure cell viability; flow cytometry and Hoechst 33342 assay was applied to measure cell cycle arrest and apoptosis. Cell invasion was assessed using transwell chambers. Our results demonstrated that the loss of UHRF1 promoted HO-8910 and HO-8910 PM cell apoptosis, while inhibiting cell proliferation. In addition, UHRF1 knockdown significantly inhibited the invasion of human ovarian cancer cells. In the present study, we also showed that depleting HO-8910 cells of UHRF1 caused activation of the DNA damage response pathway, with the cell cycle arrested in G2/M-phase. The DNA damage response in cells depleted of UHRF1 was illustrated by phosphorylation of CHK (checkpoint kinase) 2 on Thr68, phosphorylation of CDC25 (cell division control 25) on Ser 216 and phosphorylation of CDK1 (cyclin-dependent kinase 1) on Tyr 15.

전남 동부지역에서 손목터널증후군의 수술 전 후 신경전도검사 결과의 평가 (Evaluation of Nerve Conduction Study Result in Carpal Tunnel Syndrome before and after operation in eastern area of Jeonnam)

  • 서충원;김철승
    • 한국산학기술학회논문지
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    • 제13권11호
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    • pp.5305-5310
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    • 2012
  • 본 연구에서 손목터널 증후군의 발생은 손목의 정중 신경 손상에 의한다. 일반적으로 임상 발현 및 신경전도검사를 통해 진단된다. 신경전도검사는 손목터널 증후군 환자 24명을 대상으로 하여 수술 전 후 정중 신경을 비교 평가 하였고, 이중 17명을 대상으로 평가 분석 하였다. 손목터널 증후군 증상의 분석 결과는 전체 환자 수 17명(여:17, 남0), 21손(오른쪽:9, 왼쪽:4, 양쪽:4), 연령(31~60세), 평균 유병 기간 ($46.6{\pm}36.1$), NCS의 첫 번째와 두 번째 검사 간격 개월 수($20.5{\pm}7.1$), 감각 신경(감각 이상:21, 감각 저하:19, 야간통증:17), 운동 신경(무지구 위축:20, 방아쇠 손가락:2, 조조 경직:3), 수술 후 증상은(증상 소실:38.1%, >50% 개선:52.4%, <50% 개선:9.5%) 이었다. 신경전도검사는 수술 후 감각 신경전도검사에서 4명, 운동 신경전도검사에서 5명이 정상 범위 이었다. 수술 전 후의 감각신경활동전위 반응은 이전 결과보다 호전된 결과를 보였다. 앞으로 환자의 직업에 의한 손목터널증후군의 양상과 직업별 수술외적인 치료방법과 수술치료방법을 비교하여 손목터널증후군의 호전정도를 파악하고 정확한 신경전도검사를 통해 환자의 수술여부를 판단해야 된다.