The tribocytic organ and tegument of Fibricola seeulensis were examined histochemically for the detection of carbohydrates, mucosubstances, amyloid, collagen and alkaline phosphatase. The surface, secretes, gland cells of the tribocytic organ, and the tegument of the worms were positive to periodic acid Schig (PAS) and PAS with diastase stain but negative to other stains. It was inferred that the tribocytic organ and tegument of F. seoulensis comprise neutral mucopolysaccharides, which may take a protective role against host enzymes. The surface and secretes of the tribocytic organ, and the tegument of the worms were also Positive to double bridge PAP for alkaline phosphatase. This fact suggests that they may play a role as both self protective and host tissue Iytic functions.
We observed ultra-structure of the tribocytic organ of Firicola seoulensis with transmission electron microscope. Microvilli are observed on the surface of the tribocytic organ. Below the muscle layer, we can find three types of cells. Type I cell has electron lucent cytoplasm with a few granules, while type II cell shows electron dense cytoplasm and the particulate granules. Type III cell's electron dense cytoplasm possesses many granules. Of the above three cells, Type I and II cells are believed as tegumental cells. Type III cells are thought as glandular cells specific to the tribocytic organ. This finding on also explain the secretory function of the tribocytic organ of f seoulensis.
A SEM study was performed on the surface of adult P. habayashii Park, 1940, recovered from the snake, Elaphe rufodorsata. The anterior part of the worms was cup-shape and equipped with oral, ventral suckers, pseudosuckers, and tribocytic organ, and the posterior one was finger-like and round-ended, The tegument of the anterior body was covered with 3~4 pointed small spines on the midventral surface and 1~2 pointed ones on the lateral surface. Sensory papillae such as type II, dome-shape ones, and papillae with an opening were distributed over the ventral surface of the anterior portion. The round tribocytic organ was bearing small stout spines laterally, whereas the surface Which comes in contact with the host tissues consisted of numerous long fibrillar fibers. The lip of the oral sucker contained type II papillae. Lateral margin of the anterior body revealed type III papillae.
In order to know the enzyme activities of Filbricola seouzenis, an intestinal trematode of human and rodent in Korea. the enzyme histochemical method is applicated. Activities of acid phosphatase (E.C.3.1.3.2) and non-specific esterase (E.C.3.1.1) were present in microvilli and glandular cells of trlbocytic organ and the epithelium of the caecum.
A scanning eletron microscopic study was performed to observe the tegumental surface of adult Fibricola seoulensis. The adult worms were collected from the small intestine of mice 5 days to 3 weeks after experimental infection with the metacercariae. The metacercariae were obtained from the viscera of the snakes, Matrix tigrina lateralis, by artificial digestion technique. The results were as follows: 1. The tegument of anterior body was covered with cobblestone-like cytoplasmic processes and that of posterior body showed finger-like processes. The posterior body had 4-5 large transverse wrinklings which formed many discontinued shallow rugae. 2. The entire surface of anterior body was regularly arranged with the spines of which tips diverged into 3 to 4 points. They were densely packed in anterior mid-median portion of dorsal surface where appeared a few spines indented upto 5 points. Farther laterally and posteriorly from this portion, the pointed spines were more sparse and became single tipped and extended to anterior one-third of posterior body, 3. The posterior surface of oral sucker was armed with 50-60 spines having 2-3 tips and ventral sucker also covered with such spines. On anteriormost dorsal surface arranged 60-70 spade-shaped spines. The tribocytic organ was armed with many stout recurved pile-like spines arranged radially. 4. There were 3 types of sensory papillae. The ciliated knob-like (Type I) papillae were almost bilaterally symmetrical in ventral and dorsal surfaces of anterior body, and abundant especially aroundbases of oral and ventral suckers, tribocytic organ, and in lateral margins of anterior body. About 24 non-ciliated round swellings (Type II) were observed around each lip of oral and ventral suckers. The plate-like elevated papilla without cilium (Type III) was found to distribute only in posterior body. These 3 types of papillae seem to be tangoreceptive and/or rheoreceptive in function when their morphology and distributions are considered.
An electron microscopic study was performed to observe the ultrastructure of the tegument of U seoulensis. The outer surface of the tegument was covered with a tnlaminated plasma membrane. The electron-dense cytoplasmic layer was $2.5{\;}\mu\textrm{m}$ wide In the anterior portion and contained numerous vacuoles, mitochondriae and granular materials in its matrix. The basement layer was 330 nm wade or so, and Its numerous extensions protruded into the cytoplasmic layer. The sensory organ was composed of a small vesicle of $1.7{\;}{\times}{\;}1.1{\;}\mu\textrm{m}$ in dimensions, which possessed a cilium of $1.2{\;}{\times}{\;}0.19{\;}\mu\textrm{m}$ in size. The pharynx was composed of the epithelial layer of about $0.5{\;}\mu\textrm{m}$ wide, well developed muscle layer and basement layer. The tegument of the oral sucker was composed of a cytoplasmic layer of $0.4-0.5{\;}\mu\textrm{m}$ width, a narrow basement layer, a well developed muscle layer and tegumental cells. Some kinds of secretory granules that seemed to be originated from the cells of the oral sucker were observed In the parenchymal portions of the adjacent cells. The tribocytic organ consisted of numerous microvilli. The microvilli were 5 nm wide and heptalaminated. Two types of secretory granules originated from the gland cells of tribocytic organ were observed In the tegument and parenchyme. The tegumental cells were irregular in shape, and of which nuclei were multifarious.
The localization of worm antigen of Neodiplostomum seoulere was examined by immuno-electronmicroscopic observation. Not only the immunized serum of mice with crude worm extract of N. seoulene but also serum of infected mouse were reacted to the worm section. Using immunized serum as primary antibody. the gold particles were deposited on the rough endoplasmic reticulum of the cell of tribocytic organ, spermatozoa in the seminal vesicle, microvilli of the caecum and vitelline follicle. Using infected serum, gold particles were deposited only on the vitelline follicle prominently. This finding suggested that the tribocytic organ, seminal vesicle, caeca and vitelline follicles may play a role of antigen to immunized serum with crude worm extract of N. seoulense, whereas the vitelline follicle, to the infected serum.
In order to observe the growth and development of Fibricola seoulensis metacercariae, the tadpoles of Rana nigromaculata were experimentally infected with the cercariae. The meta cercariae of various developmental stages were recovered from the tadpoles after 2 to 65 days of infection. They were prepared for morphological observation, and were given orally to mice to observe their infectivity. The following results were obtained. 1. All of the tadpoles exposed to the cercariae were observed to harbour the larvae in their abdominal cavity. 2. The young metacercariae of 2 days after infection were $121.1{\mu}m$ long and $63.3{\mu}m$ wide. They grew linearly for the first 14 days to be $262.0{\mu}m$ long and $166.4{\mu}m$ wide. Thereafter, no more growth recognized until 65 days. 3. The larvae of 2 days old were similar with cercarial body and had 2 suckers, a pharynx, 2 ceca and a primordium of germ cells but no tribocytic organ. On the 8th day, they had tribocytic organ, and their morphology resembled that of mature metacercariae. 4. The metacercariae younger than 10 days could not infect the mice. Only the metacercariae older than 14 days had infectivity. The recovery rates increased by the age of metacercariae from 19.0% in 14 days old to 70.0% in 40 days old. Above findings indicate that the tadpole is indispensable for metacercarial development and it needs at least 2 weeks for maturation. The tadpole is a pivotal host in the life cycle of F. seoulensis for connection between the snail and the frog.
A histopathological study was carried out on the duodenum of mice and rats experimentally infected by F. seoulensis. Each mouse was infected with 500 metacercariae and killed after 1, 2, 3 days, 1 and 2 weeks from infection. Each rat was given 1, 000 metacercariae and was examined after 1, 2 and 4 weeks from infection. The duodenal tissue sections of mice and rats were stained with hematoxylin eosin, and PAS stained for the rats of 1 week group. The pathological findings are summarized as below. 1. There were no differences in mucosal findings between the mice and the rats, and between the location of duodenum, 1 and 5 em distal to the pylorus. 2. Each worm embraced a villus exclusively with its foliate fore body which was inserted into the intervillous spaces. The fluke pinched villous epithelia using its oral and ventral suckers. The tribocytic organ destroyed the villous epithelia deeply up to the stroma after 3 days from infection. 3. Apparent villous changes were observed in the mice after 3 days from infection. Villous changes were shortening, widening, blunting or fusion. The villous stroma showed edema, microscopic hemorrhage, capillary congestion, dilatation of lymphatics and inflammatory cell infiltration. The cells were lymphocytes, plasma cells, eosinophils and giant cells. Rarely submucosal and trans:nural inflammation was encountered.
Cercaria caribbea LVIII Cable, 1963 (Digenea: Cyathocotylidae) was detected from a brackish water gastropod species (Cerithideopsilla cingulata) in a coatal area of Shinan-gun, Jeollanam-do (Province), the Republic of Korea, and its surface ultrastructure was studied using a scanning electron microscope. The cercariae were found freely swimming or enveloped within daughter sporocysts when the snail host was mechanically broken. They were morphologically characterized by a linguiform and ventrally concave body, a long and bifurcated tail, and the presence of a holdfast (=tribocytic) organ posterior to the ventral sucker. On the whole ventral and dorsal surfaces, peg-like tegumental spines were densely distributed. Around the oral sucker, several sensory papillae, each with a short cilium, were distributed, and on the tail, sensory papillae, each with an extensively long cilium, were observed. This is the first record describing a cyathocotylid cercaria from a brackish water gastropod in the Republic of Korea.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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