Mutations in the cystathionine ${\beta}$-synthase (CBS) gene cause homocystinuria, the most frequent inherited disorder in sulfur metabolism. CBS is the unique enzyme using both heme and pyridoxal 5-phosphate (PLP) for activity. Among the reported 140 mutations, one of the most common disease-causing alterations in human CBS is G307S mutation. To investigate the pathogenic mechanism of G307S by spectroscopic methods, we engineered the full length and the truncated G247S mutation of yeast CBS that is corresponding mutation to human G307S. Yeast CBS does not contain heme and thus gives a merit to study the spectroscopic properties. The UV-visible spectra of the purified full length and the truncated G247S yeast CBSs showed the total absence of PLP in the protein. The absence of PLP in G247S mutation was also confirmed by the PLP-cyanide adduct formation experiment, which was conducted by the incubation of the purified enzyme with KCN. The adducts were detected using a circular dichroism (CD) and a spectrofluorimeter. Radio isotope activity assay of full length and truncated G247S proteins also gave no activity. Our yeast G247S mutation data suggested that G307S might make the distortion of the active site so that cofactor PLP and substrate can not fit inside the active site. Our yeast CBS study addressed the reason why the G307S mutation in human CBS makes the enzyme inactive that consequently leads to severe clinical phenotype.
Jang, Yu Kyung;Lee, Mee Youn;Kim, Hyang Yeon;Lee, Sarah;Yeo, Soo Hwan;Baek, Seong Yeol;Lee, Choong Hwan
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.25
no.2
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pp.217-226
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2015
Metabolite profiles of seven commercial vinegars and two traditional vinegars were performed by gas chromatography time-of-flight mass spectrometry with multivariate statistical analysis. During alcohol fermentation, yeast, nuruk, and koji were used as sugars for nutrients and as fermentation substrates. Commercial and traditional vinegars were significantly separated in the principal component analysis and orthogonal partial least square discriminant analysis. Six sugars and sugar alcohols, three organic acids, and two other components were selected as different metabolites. Target analysis by ultra-performance liquid chromatography quadruple-time-of-flight mass spectrometry and liquid chromatography-ion trap-mass spectrometry/mass spectrometry were used to detect several metabolites having antioxidant activity, such as cyanidin-3-xylosylrutinoside, cyanidin-3-rutinoside, and quercetin, which were mainly detected in Rural Korean Black raspberry vinegar (RKB). These metabolites contributed to the highest antioxidant activity measured in RKB among the nine vinegars. This study revealed that MS-based metabolite profiling was useful in helping to understand the metabolite differences between commercial and traditional vinegars and to evaluate the association between active compounds of vinegar and antioxidant activity.
This study aims at exploring the nature of the traditional Korean wines brewed throughout the Southern Region of Korea-Chulla-do, Kyungsang-do and Cheju-do describing their varieties and brewing methods and also comparing the similarities and differences of their features. When compared with the wines produced in the Central Region, the Southern varieties are very fastidious and complex in their brewing methods, which in turn show a wide range of diversity. First of all, all the 29 kinds of wines investigated, not a single one shows any resemblance to any one of the remaining, each exhibiting peculiar and particular characteristic features of its own. Especially, the distilling methods demonstrate very complex processes. Secondly, the majority of the Southern spirits are made from grains, added with fragrant flavor of pine tree, wormwood, chrysanthemum leaves and other medicine herbs such as Chinese matrimony vine and tankui. Thirdly, they are brewed with yeast made from wheat into kodupap(steamed rice) type of spirits, emerging as in the form of blended liquor. Fourthly, in brewing, different fermenting temperature and duration are required. Typewise, the temperature required for the basic spirit is $15{\sim}20^{\circ}C\;or\;25{\sim}30^{\circ}C$ : in the case of blended secondarily fermented liquor, from the minimum of $0{\sim}5^{\circ}C$ to the maximum of $75{\sim}80^{\circ}C$. The brewing duration is $3{\sim}5$ days for the basic spirits. In some cases, from the minimum of 3 days to the maximum of 100 days are consumed for fermenting. Fifthly, the wine extraction gadgets are yongsu (wine strainer), the sieve, filter paper, Korean traditional paper, the utilization of which implies that the brewers endeavor to observe and preserve the traditional and indigenous methods of wine making.
This study delves into the general characteristics of spirits brewed in the Central Region of Korea-Seoul, Kyonnggi-do, Chungchung-do-paying particular attention to their varieties and fermenting methods and also comparing similarities and differences of their features. It is found first of all that there are a wide range of variety in the kinds of liquors. Among the 21 spirits investigated, not a single one resembles any one of the remaining in terms of the raw material, and the brewing method and process. Secondly, all of them use locally produced grains and can be classifiable as belonging to the common category of yakju (clean spirit) with fragrant elements added for the purpose of enhancing health or decreasing any harmful effects after drink. Thirdly, these traditional folk wines are characterized by the addition of secondarily fermented spirits. The more secondarily fermented spirit a wine has, the more fragrant and palatable it becomes and also the less harmful. Fourthly, all the spirits of this region are fermented by using yeast kodupap (steamed rice). The brewing temperature is usually around $15{\sim}20^{\circ}C$ for $5{\sim}8$ days or $3{\sim}4$ days for the majority of the cases. Fifthly, purifying is done with the yongsoo (strainer), the sieve, traditional Korean paper, etc. As such, we can say that all the brewers endeavor to maintain Korean traditional methods of wine making.
In order to evaluate the effects of addition of soybean boiling waste liquor (SBWL) and sugar and inoculation of the lactic acid bacteria and yeast starter culture in Korean traditional kanjang mash, three types of kanjang were prepared in a clay pot of 100 l volume and compared the characteristics of lactic acid fermentation. The mashing compositions of the types of kanjang were as follows: (1) control treatment mash was prepared with meju : 20% salt solution (1:4) and SBWL, (2) kanjang mash with 3.5% added sugar to the control type mash and (3) kanjang mash with 3.5% added sugar and inoculation of the lactic acid bacteria and yeast starter culture 35 days after mashing to the control type mash. (1), (2) and (3) of kanjang mash were found to be effective in increasing the lactic acid content and improving the organoleptic characteristics of kanjang. But the effect of yeast starter culture was not clear because osmophilic yeasts were inhibited by metabolite(acetic acid) produced by lactic acid bacteria. The lactic acid content of (1), (2) and (3) kanjang was 2.05, 2.38 and 2.91% respectively in 90 day-matured kanjang.
Two hundred and twenty three yeast strains were randomly isolated from Korean traditional $nuruk$. Among them, six urease producing yeast strains (designated JJA, JJB, JJ22, SHA, SHC and SH10) were selected on the Christensen urea agar plates. They showed the same pattern in the PCR-RFLP analysis of the ITS I-5.8S-ITS II region digested with $Hae$III and $HinF$1 restriction endonucleases. Its DNA sequences showed 100% (strains SHA, SHC and SH10) and 99.8% (strains JJA, JJB and JJ22) identity with those of $Issatchenkia$$orientalis$ type strain ATCC 24210. Phylogenetic analysis resulted in that all the strains were closely related to $I.$$orientalis$. Two representative strains, JJ22 and SH10, showing the highest urease activities were selected for further characterization. Their morphological, physiological and biochemical characteristics were also the same as $I.$$orientalis$. Therefore, both the two strains were identified as $I.$$orientalis$. They could grow at a wide range of temperature between $20-40^{\circ}C$ as well as pH between 2.0 and 10.0. However, a higher level urease activity were obtained at acidic pH than that at alkalic pH. The maximal level of urease activity was obtained at $30^{\circ}C$ (strain SH10) or $35^{\circ}C$ (strain JJ22) and in a liquid medium adjusted to the initial pH 5.0.
This study was conducted to establish traditional manufacturing process of Hongju, a traditional spirit by traditional Kokja and Koji method based on different materials. In the fermentation process, the changes of temperature, pH, total acid, alcohol, total sugar and microflora in mash were analyzed. During the whole fermentation period, the temperature in mash made by Kokja method was reached to $30^{\circ}C$, and that of Koji method was reached $33^{\circ}C$. There was no significant difference in pH by different treatments and the initial pH in Koji method was pH 6.0 and the final pH was 4.0. The content of total acid was higher in mash processed by Kokja method than that of Koji method. Alcohol content was higher in mash processed by Koji method. The content of total sugar in all samples were reduced gradually according to progress of fermentation. Yeast populations in all samples were increased up to 6 days of fermentation and then decreased gradually. Lactic acid bacteria were increased until 3 days of fermentation and then decreased until the fermentation completed.
Seo, Dong-Ho;Jung, Jong-Hyun;Kim, Hyun-You;Kim, Young-Rok;Ha, Suk-Jin;Kim, Young-Cheul;Park, Cheon-Seok
Food Science and Biotechnology
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v.16
no.6
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pp.994-998
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2007
Changes in microflora, pH, reducing sugar content, lactic acid content, and ethanol content during Korean rice wine fermentation were investigated. Typical quality characteristics of Korean rice wine fermentation including pH, reducing sugar content, lactic acid content, and ethanol content were evaluated. While a fungus was not detected in our Korean rice wine mash, yeast was found to be present at fairly high quantities (1.44-4.76\;{$\times}\;10^8\;CFU/mL$) throughout the fermentation period. It is assumed that lactic acid bacteria (LAB) had effects on the variations of fragrance and flavor for traditional Korean rice wine. The main LAB during the Korean rice wine fermentation was determined and identified as a Gram-positive, straight rod-shaped cell. Genotypic identification of the isolated strain by amplification of its 16S rRNA sequence revealed that the isolated strain was most closely related to Lactobacillus plantarum (99%) strains without any other comparable Lactobacillus strains. Therefore, we designated the major LAB identified from traditional Korean rice wine fermentation as L. plantarum RW.
In order to optimize storage conditions of Korean traditional Makgeolli, we brewed Korean traditional Makgeolli for 1 week with two-stage fermentations and investigated changes viable cell counts of yeasts and bacteria during storage for 1 month at $4^{\circ}C$ and $20^{\circ}C$. Yeast viable cell counts were decreased to 89.0% after storage for 30 days at $20^{\circ}C$, however, those were not significantly changed at $4^{\circ}C$ storage. Bacteria cell counts were decreased to 59.0% of initial cell counts for 30 days at $4^{\circ}C$. In the storage at $20^{\circ}C$, bacteria were significantly decreased to 98.0% of initial cell counts after storage for 30 days. Lactic acid bacteria were also similar to those of total bacteria cell counts at $4^{\circ}C$ storage, however, 99% of lactic acid bacteria were decreased at $20^{\circ}C$ storage for 30 days.
Kim, Sang-Yun;Kim, Eun-Kyung;Yoon, Seong-Jun;Jo, Nam-Ji;Jung, Soo-Kyung;Kwon, Sang-Ho;Chang, Yoon-Hyuk;Jeong, Yoon-Hwa
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.40
no.2
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pp.223-228
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2011
Korean traditional rice wine, Makgeolli, has been widely consumed with increasing popularity in Korea. Also, there has been an increase in the varieties of Makgeolli for the younger generation. In this study, we examined the physicochemical and microbial properties of Makgeolli supplemented with cucumber during fermentation. Four hundred grams of cucumbers (20% of the total amount of rice) were grinded and added to the rice solution (2 kg rice and 3.12 L distilled water) along with the Nuruk (40 g) and yeast (14 g). After mixing the solution, it was fermented for six days in a water bath ($28^{\circ}C$). During the fermentation, the pH value of the cucumber Makgeolli fell from 5.88 to 3.94 on day-1, and steadily increased to a pH value of 4.48 by day-6. The total acidity of the cucumber Makgeolli sharply increased from 0.02 to 0.20% on day-1, and then slowly increased thereafter to 0.28% by day-6. After the 6-day fermentation, the L values of the control and the cucumber Makgeolli were similar. The total viable cell, lactic acid bacteria and yeast count of the control and the cucumber Makgeolli increased considerably after the 6-day fermentation process. Free sugar analysis showed that glucose contents decreased with increasing fermentation periods. The succinic acid content was the highest among all the organic acids. Thirty-nine volatile compounds were observed on the final day of fermentation in the cucumber Makgeolli.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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