Objectives : Smilacis glabrae rhizoma (SG) has been traditionally used as a herbal medication of musculoskeletal disorders like arthritis, pain, convulsions, and syphilis in traditional Korean medicine. This study was investigated anti-oxidative and anti-inflammatory effect of fractionated extracts of Smilacis Glabrae Rhizoma in Human Umbilical Vein Endothelial Cell (HUVEC). Methods : SG extract prepared with methanol, and then fractionated with hexane, dichloromethane, ethylacetate, n-butanol and water. Inhibitory effect of SG onto free radical generation was determined by measuring DPPH, superoxide anions and nitric oxide scavenging activities in vitro. Cytotoxic activity of extracts on RAW 264.7 cells was measured using 5-(3-caroboxymethoxyphenyl)-2H-tetra-zolium inner salt (MTS) assay. Intracelluar oxidation was analysed by DCF-DA assay. The nitric oxide (NO) production was measured by Griess reagent system. The levels of ICAM-1 and VCAM-1 expression were confirmed by western blot. And proinflammatory cytokines were measured by ELISA kit. Results : Our results indicated that fractionated extracts, especially ethyl acetate (EA) extract, significantly inhibited free radical generation, the TNF-$\alpha$-induced intracellular oxidation. Furthermore, the EA extract protected TNF-$\alpha$-induced adhesion to THP-1, expression of adhesion molecules accompanied by an attenuation of IL-6 and IL-8 formation in HUVEC. Conclusions : These results indicate that EA extract of SG have potential as an agent of atherosclerosis and other chronic inflammatory diseases including diabetes, hypertension, and arthritis.
목적: 본 연구는 임상에서 많은 빈도로 사용되고 있는 향정신성 약물이 간독성을 발생시킬 수 있음을 임상 예를 통해 보여줌으로써, 한의진료현장에서 이에 대한 경각심과 더불어 약인성간손상에 대한 최신 정보를 제공하고자 한다. 방법: 본 임상 예의 논문은 향정신성 약물을 사용한 후 약인성간독성의 의심과 진단 및 약물의 중단 후 증상과 간손상 효소의 개선과정을 자세히 제시하였다. 결과: 평소 혼합결합조직병으로 한방병원에서 수년 동안 침과 뜸 치료 등으로 잘 유지되고 있던 56세의 여성 환자가, 어느날부터 갑자기 심한 피로감과 전신적 불편편함을 호소하였다. 혈액검사를 시행한 결과, 혈청 AST, ALT가 정상 경계의 2.5-배 이상 증가하였고, 촤근 복용한 향정신성약물에 대한 RUCAM score가 9점으로 약인성간손상 진단에 부합하였다. 이 의심 약물들을 중지한 뒤에 주관적 불편함이 빠르게 개선되었으며, 혈청 간손상 효소 수치 또한 2주 안에 정상화되었다. 결론: 본 증례는 향정신성약물로 생길 수 있는 간손상의 전형적인 임상 예로서, 향정신성약물의 일반화된 상황에 비추어 한의원에서 환자의 진료 과정에서 하나의 중요한 고려사항을 암시한다.
Background: SMG (升麻葛根湯加味方) is an herbal medicine which has been used in oriental medicine as a traditional therapeutic agent of pruritus and skin disease. Objective: This study was performed to investigate the effect of SMG on the anti-hypersensitivity and immune response in the murine of type I hypersensitivity induced by the experiment. Materials and Methods: Laboratory rats were primary sensitized with OA (ovalbumin); on day 1, rats of a Control group and Sample group (SMG group) were systemically immunized by subcutaneous injection of 1mg OA and 300mg of Al(OH)3 in a total volume of 2ml saline. The rats of the sample group were orally administered with an SMG water extract for 14 days after primary immunization. On day 14 after the systemic immunization, rats received local immunization by inhaling $0.9\%$ saline aerosol containing $2\%$(wt/vol) OA. A day after local immunization, BAL fluid and peripheral blood were collected from the rats. Total cell, lymphocyte, $CD4^+\;T\;cell,\;CD8^+\;T\;cell,\;CD4^+/CD8^+$ ratio in the BALF, and IgE, $CD4^+\;T\;cell,\;CD8^+$ T cell in the peripheral blood were measured and evaluated. Results: SMG showed a suppressive effect on the immune response in the rats. 1. Total Cells in the BALF decreased in the SMG treated group in comparison group, but statistic differences were not observed. 2. Total lymphocytes in the BALF were statistically decreased in SMG treated group in comparison to the control group. 3. CD4+ T cells in the BALF were statistically decreased in SMG treated group in comparison to the control group. 4. CD8+ T cells in the BALF were decreased in SMG treated group in comparison to the control group, but statistic differences were not observed. 5. The ratio of CD4+/CD8+ in the BALF was statistically decreased in SMG treated group in comparison to the control group. 6. The IgE level in serum was statistically decreased in SMG treated group in comparison to the control group. 7. The ratio of CD4+ and CD8+ in peripheral blood showed undetectable differences between each group of rats. From the experiment cited above, this study shows that SMG has both anti-hypersensitivity effects and immunoregulatory effects when administered to rats. Based on this experiment, it is suggested that SMG could be a useful immunomodulator and anti-allergy agent.
This experimental study was carried out to evaluate the effect of Yipahnsan on angiogenic inhibition mechanism. This study investigates the effects of Yipahnsan on angiogenic inhibition mechanism evaluate cell adhesive inhibition effect, DNA fragmantaion analysis, nuclear condensation assay, FACScan analysis, angiogenic lumen formation assay, immunocytochemistry analysis, RT-PCR for mRNA expression, western blot analysis, confocal analysis for $Ca^{2+}influx$. The results were summarized as follows : 1. The cell adhesive inhibition ability was strongly increased from $5{\mu}g/ml$ on ECV304 cell line and ECVPAR cell line. 2. YY water extract caused $G_0/G_1$ arrest peak to existed on the ECV304 cell line. 3. YY water extract caused inhibition of proliferation and inducement of apoptosis on the collagen coated plate in ECV304 cell line. 4. YY water extract inhibited the lumen formation on the matrigel coated plate in ECV304 cell line. 5. YY water extract inhibited the expressions of LFA-1 and ELAM-1 on ECV304 cell line and ECVPAR cell line. 6. YY water extract inhibited the expressions of MMP-9 and uPA on ECV304 cell line and ECVPAR cell line. 7. YY water extract inhibited the expression of integrin ${\alpha}_v{\beta}_3$ on ECV304 cell line and ECVPAR cell line. 8. YY water extract decreased the change of $Ca^{2+}$ in intracellular on ECV304 cell line and ECVPAR cell line. According to the results, Yipahnsan showed to be a key antagonist of integrin ${\alpha}_v{\beta}_3$, and to be induction of apoptosis by p53 through flow cytometry. This report also demonstrated that expressions of MMP-9 and uPA were blocked under the angiogenesis model. Thus, we suggested that Yipahnsan blocks angiogenesis by inducing apoptosis in ECV304 and ECVPAR cell lines, and another oriental herbal medicine that treats qi-stagnation and blood-stasis type also has angiogenic inhibition effects.
This experimental study was carried out to evaluate the effects of Hwallakhyoreungdan on angiogenic inhibition mechanism. In order to investigate the effects of Hwallakhyoreungdan on angiogenic inhibition mechanism, MTT assay, cell adhesive inhibition effect, DNA fragmantaion analysis, Nuclear condensation assay, FACScan analysis, Angiogenic lumen formation assay, Immunocytochemistry analysis, RT-PCR for mRNA expression, Western blot analysis and Confocal analysis for $Ca^{2+}$ change were performed. The results were summarized as follows: 1. The cell adhesive inhibition ability was strong from $5{\mu}g/ml$. 2. The $G_0/G_1$ arrest peak was existed on ECV304 cell-line. 3. The cells on Collagen plate were inhibition of proliferation and inducement of apoptosis by HR water extract. 4. Angiogenic lumen formation was inhibited by HR water extract. 5. LFA-1 and ELAM-1's expression were inhibited by HR water extract. They are commenly participation on inflammation and tumor regeneration. 6. The expression of MMP-9 and uPA were inhibited by HR water extract. 7. The expression of integrin ${\alpha}_v{\beta}_3$ was inhibited by HR water extract. 8. The expression of intracellular molecule were successively inhibited by HR water extract therefore the proliferation of ECV304 cell line was stopped and apoptosis was induced. 9. The change of $Ca^{2+}$ was decreased by HR water extract it cause confusion of signal transduction pathway therefore it was take part in apoptosis. According to the results, Hwallakhyoreungdan showed to be a key antaonist of integrin ${\alpha}_v{\beta}_3$, and to be induction of apoptosis by p53 through flow cytometry. This report also demonstrated that expressions of MMP-9 and uPA was blocked under the angiogenesis model. Thus, we suggests that Hwallakhyoreungdan blocks angiogenesis by inducing apoptosis of ECV304 and ECVPAR cell lines and another oriental herbal medicine that treats blood-stasis type also has angiogenic inhibition effects.
In order to investigate the effects of Banhabaekchulcheonmatang and Banhabaekchulcheonmatanggamibang on antitumor effects after Sarcoma-180 cells transplantation into the peritoneal cavity or left groin in mice, and immune responses in mice induced by methotrexate, the extracts of its herbal medicines were orally administered for 14 or 21 days. Experimental studies were performed for measurance of mean survival days, tumor and body weight for antitumor effects, and delayed type hypersensitivity, hemagglutinin titer, hemolysin titer, rosette forming cells, natural killer cell activity and phagocytic activity for immune responses in ICR mice. Following results were obtained : 1. Mean survival time in Banhabaekchulcheonmatang and Banhabaekchulcheonmatanggamibang-treated group was significantly prolonged, as compared with the control group(P<0.010, P<0.005). 2. Tumor weight in Banhabaekchulcheonmatang and Banhabaekchulcheonmatanggamibang-treated group was significantly depressed, as compared with the control group(P<0.050, P<0.050). 3. Body weight in Banhabaekchulcheonmatang-treated group was significantly increased (P<0.050), but in Banhabackchulcheonmatanggamibang-treated group was slightly increased with no effectivenes, as compared with the control group. 4. Delayed type hypersensitivity in Banhabaekchulcheonmatang and Banhabaekchulcheonmatanggamibang-treated group was significantly increased, as compared with the control group(P<0.010, P<0.050). 5. Hemagglutinin titer in Banhabaekchulcheonmatang and Banhabaekchulcheonmatanggamibang-treated group was significantly increased, as compared with the control group(P<0.050, P<0.050). 6. Hemolysin titer in Banhabaekchulcheonmatanggamibang-treated group was significantly increased (P<0.050), but in Banhabaekchulcheonmatanggamibang-treated group was slightly increased with no effectiveness, as compared with the control group. 7. Rosette forming cells in Banhabaekchulcheonmatang and Banhabaekchulcheonmatanggamibang-treated group was slightly increased with no effectiveness, as compared with the control group. 8. Natural Killer cell activity in Banhabaekchulcheonmatang and Banhabaekchulcheonmatanggamibang-treated group was slightly increased with no effectiveness, as compared with the control group. 9. Phagocytic activity in Banhabaekchulcheonmatanggamibang-treated group group was significantly increased (P<0.050), but in Banhabaekchulcheonmatanggamibang-treated group was increased with no effectiveness, as compared with the control group. According to the above results, it could be suggested that Banhabaekchulcheonmatang and Banhabaekchulcheonmatanggamibang have prominent antitumor effects, and enhance both cellular and humoral immunity.
한방 보혈제의 기본처방인 사물탕과 보기제의 기본 처방인 사군자탕의 방사선 조사 마우스에서의 방사선 방호 효과를 소장움 생존(고선량 방사선, 12 Gy), 조혈세포 생존(중간선량 방사선, 6.5 Gy), apoptosis 형성(저선량 방사선, 2 Gy) 실험법을 적용하여 관찰하였다. 방사선조사 전 사물탕투여군(경구투여: 음수 mL당 2 mg씩 7일간, 복강내주사: 마리당 1 mg씩 방사선 조사 24시간 전)에서 소장움의 생존이 증가되었으며 (방사선대조군: $38.48{\pm}4.34$, 복강내 주사군: $77.98{\pm}16.11$, P<0.005), endogenous spleen colony의 형성도 높게 나타났고(방사선대조군: $3.5{\pm}4$, 경구투여군: $10.7{\pm}7.730$, 복강내주사군: $8.667{\pm}5.244$, P<0.05), 소장움에서의 apoptotic cell의 발생율은 억제되었다(방사선대조군: $5.111{\pm}0.529$, 복강내주사군 $3.919{\pm}0.214$, P<0.01). 사군자탕 병행투여군에서는 이상의 실험에서 통계적으로 유의성 있는 효과는 없었다. 이상의 결과는 사물탕이 방사선방호 식품으로 활용될 수 있는 가능성을 제시하였으며, 각 구성약재 및 성분의 효과에 대한 연구가 계속되어야 할 것이다.
Objectives : Brassica campestris var narinosa (BCN), Canavalia gladiata DC semen (CGD) and their combinational prescription (BCN+CGD) have been use to demonstrate to regulate hematopoiesis. In the current study, we investigated whether Brassica campestris var narinosa, Canavalia gladiata DC semen and their combinational prescription is related to hemato-potentiating function using Sca-$1^+$ hematopoietic stem cells (Sca-$1^+HSCs$) as a testing system. Methods : Sca-$1^+HSCs$ isolated from femur in C57bl/6 mice with leukopenia and thrombocytopenia induced by cyclophosphamide (CTX). Then, Real-time PCR was performed to measure the mRNA expression, ELISA and haematopoiesis-related gene (EPO, TPO, IL-3, SCF, c-kit, GM-CSF), the phosphorylation of JAK2, GATA-1 and STAT-5a/b were observed by western blot, and the numbers of $CD117^+/Sca-1^+$ cell and the number of granulocyte erythrocyte monocyte macrophage colony-forming units (CFU-GEMM) and erythroid burst forming units (BFU-E), semisolid clonogenic assay was performed. Result : When Sca-$1^+HSCs$ were treated with Brassica campestris var narinosa, Canavalia gladiata DC semen and their combinational prescription with rIL-3/rSCF, the expression of haematopoiesis-related (EPO, TPO, IL-3, SCF, c-kit, and GM-CSF) were significantly increased at the levels of mRNA as well as production in Sca-$1^+HSCs$. Additionally, CGS enhanced phosphorylation of JAK2, GATA-1, and signal transducer and activator of transcription-5a/b (STAT-5a/b) in Sca-$1^+HSCs$. Furthermore, their combinational prescription (BCN+CGD) significantly enhanced the growth rate of granulocyte erythrocyte monocyte macrophage colony-forming units (CFU-GEMM) and erythroid burst forming units (BFU-E) in vitro. Conclusion : These result suggest that Brassica campestris var narinosa (BCN) and Canavalia gladiata DC have hematopoietic enhancement via hematopoietic cytokine-mediated JAK2/GATA-1/STAT-5a/b pathway, and their combinational prescription (BCN+CGD) has superior hematopoietic enhancement to those of individual extracts.
Objective : Chronic acid reflux esophagitis (CARE), one of gastroesophageal reflux disease (GERD) is increasing worldwide. Coptidis rhizoma extract (CRE) is a traditional herb that cures a variety of diseases. This study was conducted to evaluate the protective effect of CR on rats with chronic acid reflux esophagitis. Methods : The antioxidant activities were evaluated through radical scavenging assays using 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) and 2,2'-azino-bis (3-ethylbenzothiazolin-6-sulfonic acid) (ABTS) radical scavenging assays. CARE was surgically induced in 5-week-old male SD rats by ligating the border between forestomach and glandular portion with a 2-0 silk tie and covering the duodenum using 18-Fr $N{\acute{e}}laton$ catheter. To evaluate the esophageal protective effect of CRE, rats were divided into 3 groups: Nor (normal rats), Veh (chronic acid reflux esophagitis induced rats), CR (chronic acid reflux esophagitis induced rats treated with CRE 200 mg/kg body weight). Results : The administration of CRE significantly prevented the mucosal injury of the esophagus tissue and histological findings improved the esophageal lesion. It has been shown that inflammation is prevented by the increase of antioxidant-related factors (Nrf-2, HO-1, SOD, catalase, and GPx-1/2) through the antioxidant pathway of esophageal tissue. The administration of CRE reduced the increase of serum peroxynitrite ($ONOO^-$) and markedly reduced the protein expression of inflammatory mediator such as $NF-{\kappa}Bp65$, $p-I{\kappa}B{\alpha}$, iNOS, and IL-6. Conclusions : Overall, these results suggest that CRE administration confirmed the protective effect of esophageal mucosa, suggesting that it is a potential treatment for chronic acid reflux esophagitis.
당뇨병 치료 및 예방에 전통적으로 사용되어온 생약 및 식품 소재로 구성된 생약복합제인 백강잠, 산약, 쥐눈이콩, 청국장가루의 복합물을 대상으로 실험관 및 동물실험을 통하여 혈당강하 효과를 확인하였다. 생약복합제 $H_2O$추출물은 당흡수에 관여하는 $\alpha$-glucosidase효소를 비교약물인 acarbose ($IC_{50}$=0.39 mg/mL)과 비교하여 1/3배 정도의 활성을 보였으며 ($IC_{50}$=1.24 mg/mL), ethanol추출물은 인슐린 내성에 관여하는 $PTP1{\beta}$ 효소작용을 ($IC_{50}=498.46{\mu}g$/mL) 효과적으로 억제하였다. $PTP1{\beta}$ 효소를 억제하는 n-hexane 분획을 대상으로 하여 GC-MS로 성분 분석한 결과 지방산유도체인 것으로 나타났다. 고지방식이와 저용량 STZ (35 mg/kg)으로 유발시킨 당뇨모델에서 OGTT 실험결과 비교약물인 rosiglitazone(당부하 30분 후 평균 60 mg/dL 의 감소)과 생약복합제 투여군의 경구 당부하능 개선효과를(당부하 30분 후 평균 30 mg/dL의 감소) 확인하였다. 또한, 대사성 증후군 모델에서는 체중증가의 감소 효과와 공복혈당의 증가를 현저히 억제함을 확인하였으며, OGTT에서도 후반부에 현저한 경구당부하능 개선 효과를 관찰 할 수 있었다. 이 결과를 바탕으로 산약, 백강잠, 쥐눈이콩, 청국장으로 조제한 생약복합제는 당뇨 및 대사성 증후군의 혈당을 조절하는 데 도움을 줄 수 있을 것이라 판단된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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