Receptor binding plays an important role in determining host specificity of the Bacillus thuringiensis Cry $\delta$-endotoxins. Mutations in domains II and III have suggested the participation of certain residues in receptor recognition and insect specificity. In the present study, we expressed the cloned domain II-III fragment of Cry4Ba and examined its binding characteristics to mosquito-larval midgut proteins. The 43-kDa Cry4Ba-domain II-III protein over-expressed in Escherichia coli as inclusion bodies was only soluble when carbonate buffer, pH 10.0 was supplemented with 4M urea. After renaturation via stepwise dialysis and subsequent purification, the refolded domain II-III protein, which specifically reacts with anti Cry4Ba-domain III monoclonal antibody, predominantly exists as a $\beta$-sheet structure determined by circular dichroism spectroscopy. In vitro binding analysis to both histological midgut tissue sections and brush border membrane proteins prepared from susceptible Aedes aegypti mosquito-larvae revealed that the isolated Cry4Ba-domain II-III protein showed binding functionality comparable to the 65-kDa full-length active toxin. Altogether, the data present the 43-kDa Cry4Ba fragment comprising domains II and III that was produced in isolation was able to retain its receptor-binding characteristics to the target larval midgut proteins.
As BTX-A, which has been known to be the most effective treatment for ADSD, is not effective in treating vocal tremors, voice assessment must be employed to perform differential diagnosis of SD and vocal tremor in an accurate fashion. In this study, the characteristics of vocal changes after botulinum toxin injection were compared by analyzing the voice characteristics resulting from the presence of vocal tremors using objective analysis devices, with the aim of helping to provide prognoses and to determine remedial effects in clinical cases comprising patients with adductor spasmodic dysphonia accompanied by voice tremors. Respiratory function tests, aerodynamic analysis, electroglottography (EGG), acoustic analysis, auditory perception tests, and K-VHI had been conducted at intervals of four, eight, and twelve weeks before and after injection, targeting a group of 17 ADSD female patients (a ADSD group of four with vocal tremor and a ADSD group of 13 without voice tremor). For average FVC and FEV1, the T group showed statistically significant low averages compared with the NT group, whereas the T group showed statistically significant high average ATRI compared with the NT group. In addition, the T group showed a statistically significant Fatr, lower than that of the NT group. For the ADSD group of patients with voice tremor, their vocal tremor remained unchanged despite noticeable decrease in wringing voices. In other words, as the vocal tremor and wringing voices are two distinctive features, there is a need for the two features to be targeted separately for differential diagnosis.
어린이집 유아들이 공용으로 사용하는 수건의 미생물 오염도와 분리된 식중독 미생물의 장독소 유전자 및 장독소 생산 특성을 분석하여 어린이집 유아 사용 수건의 위생안전성을 확보하고자 어린이가 손 씻은 후 공용으로 사용하는 수건 22개 (사용 전 7개, 사용 중 15개)를 연구대상으로 하였다. 일반세균수는 평균 6.2 log CFU/100 $cm^2$로 검출되었고 진균수는 평균 4.1 log CFU/100 $cm^2$로 검출되었으며 대장균군은 사용 전 수건의 경우 7건 중 4건 (57.1%), 사용 중인 수건의 경우 15건 모두에서 (100%) 검출되었다. 어린이 사용 수건의 미생물 오염도가 높게 나타나 수건의 위생적인 살균 세탁 및 상대습도가 낮은 곳에 보관하는 등의 보관 방법 개선이 필요한 것으로 판단되었다. Salmonella spp.의 경우 실험에 사용된 모든 수건에서 검출되지 않았으나, Staph. aureus는 22건 중 5건 (22.7%), B. cereus는 11건 (50.0%)에서 검출되어 B. cereus 오염이 가장 심각한 것으로 나타났다. Staph. aureus 장독소 유전자와 독소 단백질은 모두 불검출 되었으나 분리 동정된 11균주의 B. cereus 장독소 유전자 실험 결과 hblC, hblD, hblA 유전자가 각각 72.7, 72.7, 54.5% 검출되고 nheA, nheB, nheC 유전자가 각각 81.8, 72.7, 54.5% 검출되었으며 cytK, entFM 장독소 유전자는 각각 45.5, 90.0% 검출되었다. B. cereus 장독소 실험결과 HBL 장독소는 11균주 중 8균주 (72.7%), NHE 장독소는 5균주 (45.5%) 검출되었고 HBL과 NHE 장독소 중 하나 이상을 생산하는 B. cereus 균주는 10균주 (90.9%)로 나타났다. 수건에 오염된 B. cereus 균주의 교차오염에 따른 식중독 위험성이 상존하는 것으로 나타나 개인별 수건 또는 종이 타올 사용을 고려하여야 할 것으로 판단되었다.
Kim Ji-Uk;Kim Young-Hoon;Han Kyoung-Sik;Oh Se-Jong;Whang Kwang-Youn;Kim Jai-Neung;Kim Sae-Hun
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제16권6호
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pp.939-945
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2006
The physiological characteristics and function of the exopolysaccharide (EPS) produced by Lactobacillus rhamnosus ATCC 9595 were determined. The total quantity of EPS was rapidly increased to 496$\pm$20 mg/l during the exponential phase, and then maintained steadily during the stationary phase. During the exponential phase (18 h), the total EPS consisted of 61% cell-bound EPS (cb-EPS) and 39% released EPS (r-EPS), whereas the relative proportion of EPS during the stationary phase (48 h) was convered to 23% cb-EPS and 77% r-EPS. On gel permeation chromatography, cb-EPS was fractionated as a single peak of 8.6$\times10^6$ Da, whereas r-EPS was fractionated as two peaks with average molecular weights of 4.3$\times$10$^4$ and 8.6$\times10^6$ Da. Interestingly, both EPS species exhibited anticancer properties and cholera toxin-binding activities. Our results suggest that the EPS generated by L. rhamnosus ATCC 9595 might be suitable for use as a functional food or food supplement.
Thirteen strains of Clostridium perfringens were isolated from the pigs with hemorrhagic enteritis. The characteristics of the outbreaks, clinical signs and lesions were examined. The biochemical properties, type of toxin and susceptibility to antimicrobial agents of the isolates were investigated. The results could be summarized as follows ; 1. Almost of the pigs affected with hemorrhagic enteritis, 17 cases examined from 1989 to 1992, were piglets less than 7 day old. 2. The average mortality rate of piglet less than 7 day old affected with hemorragic and necrotic enteritis was 48.5%. 3. The clinical signs of pigs with hemorrhagic enteritis were depression, hemorrhagic diarrhea, anemia and dehydration. Necropsy of the infected pigs showed typical hemorrhage of upper intestine and necrosis of mucosal membrane. 4. The characteristic biochemical properties of the isolates were 2-band hemolysis, positive reaction of reverse CAMP test and formation of LV precipitate in egg yolk medium. 5. The toxin type of the 13 isolates, investigated by mouse inoculation test, was all type C strains of Clostridium perfringens. 6. In susceptibility test to antimicrobial agents, 13 isolates of Clostridium perfringens were highly sensitive to ampicillin, enrofloxacin(Baytril), cephalothin, penicillin and trimethoprim-sulfamethoxazole.
vibrio vulnificus의 균체내독소의 특성을 파악하여 비브리오 패혈증의 발병원인 구명을 위한 자료를 제공하고자 생균과 균체파쇄액의 치사독성과 내열성 및 혈관투과성항진작용을 실험한 결과는 다음과 같다. 1. 환자분리균(V.vulnificus CDC B3547)과 환경분리균(V.vulnificus B57)의 독력은 차이가 없었다. 2. V.vulnificus의 균수가 $10^{7}$/ml 이상일 때 강한 치사독력이 나타났다. 3. 균체파쇄액이 독성은 80$^{\circ}$C 20분에 완전히 불활성화 되었다. 4. 균체파쇄액은 용혈성은 없었으나 세포독성은 인정되었다. 5. V.vulnificus의 새앙주에 대한 주 치사독소는 균체 내에 존해했으나 LPS와 LPprotein complex는 기존의 방법으로 분리할 수 없었다.
Purpose: Oromandibular dystonia is a neurological disorder that affects the jaw and lower face muscles, often resulting in abnormal repetitive movement of the jaw and perioral structures. The purpose of this study was to assess the effectiveness of surface electromyography (EMG) in evaluating the treatment outcome of oromandibular dystonia. Methods: Based on a retrospective review of medical records, we analyzed the data of four patients who received medication or botulinum toxin injection, as well as surface EMG of the jaw muscles before and after treatment. We assessed the patients' clinical characteristics and the results of surface EMG before and after treatment. Results: The case series included one female and three males, and the age range was 65-78 years. Based on the clinical features, two subjects were classified as jaw deviation and the remaining two were as jaw closing. Dystonic patterns revealed by surface EMG varied, including phasic, tonic, and mixed contraction patterns. EMG amplitude after treatment was lower than pre-treatment value in all four subjects, suggesting improved clinical signs and symptoms. One subject who received clonazepam and another who received botulinum toxin injection showed a remarkable reduction in EMG amplitude within a normal range. Conclusions: Surface EMG can be used to effective evaluate treatment outcomes in patients with oromandibular dystonia. It could be considered as an adjunctive diagnostic tool in managing patients with dystonia.
Tolaasin is a channel forming bacterial toxin produced by Pseudomonas tolaasii and causes a brown blotch disease on cultivated oyster mushrooms. When tolaasin molecules form channels in the membranes of mushroom cells, they destroy cellular membrane structure, known as 'colloid osmotic lysis'. In order to understand the molecular mechanisms forming membrane channels by tolaasin molecules, we have investigated the electrophysiological characteristics of tolaasin-induced channels in lipid bilayer.(omitted)
Grossi-De-Sa, Maria Fatima;De Magalhaes, Mariana Quezado;Silva, Marilia Santos;Silva, Shirley Margareth.Buffon;Dias, Simoni Campos;Nakasu, Erich Yukio Tempel;Brunetta, Patricia Sanglard Felipe;Oliveira, Gustavo Ramos;De Oliveira Neto, Osmundo Brilhante;De Oliveira, Raquel Sampaio;Soares, Luis Henrique Barros;Ayub, Marco Antonio Zachia;Siqueira, Herbert Alvaro Abreu;Figueira, Edson L.Z.
BMB Reports
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제40권5호
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pp.773-782
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2007
Different isolates of the soil bacterium Bacillus thuringiensis produce multiple crystal (Cry) proteins toxic to a variety of insects, nematodes and protozoans. These insecticidal Cry toxins are known to be active against specific insect orders, being harmless to mammals, birds, amphibians, and reptiles. Due to these characteristics, genes encoding several Cry toxins have been engineered in order to be expressed by a variety of crop plants to control insectpests. The cotton boll weevil, Anthonomus grandis, and the fall armyworm, Spodoptera frugiperda, are the major economically devastating pests of cotton crop in Brazil, causing severe losses, mainly due to their endophytic habit, which results in damages to the cotton boll and floral bud structures. A cry1Ia-type gene, designated cry1Ia12, was isolated and cloned from the Bt S811 strain. Nucleotide sequencing of the cry1Ia12 gene revealed an open reading frame of 2160 bp, encoding a protein of 719 amino acid residues in length, with a predicted molecular mass of 81 kDa. The amino acid sequence of Cry1Ia12 is 99% identical to the known Cry1Ia proteins and differs from them only in one or two amino acid residues positioned along the three domains involved in the insecticidal activity of the toxin. The recombinant Cry1Ia12 protein, corresponding to the cry1Ia12 gene expressed in Escherichia coli cells, showed moderate toxicity towards first instar larvae of both cotton boll weevil and fall armyworm. The highest concentration of the recombinant Cry1Ia12 tested to achieve the maximum toxicities against cotton boll weevil larvae and fall armyworm larvae were 230 ${\mu}g/mL$ and 5 ${\mu}g/mL$, respectively. The herein demonstrated insecticidal activity of the recombinant Cry1Ia12 toxin against cotton boll weevil and fall armyworm larvae opens promising perspectives for the genetic engineering of cotton crop resistant to both these devastating pests in Brazil.
2010년부터 2015년까지 전국 8도에 있는 벼 포장에서 수확기에 총 509개의 이삭시료가 채집되었다. 시료당 105개의 벼 종실이 potato dextrose agar (PDA) 배지에 처리되었고 6,658개의 Fusarium 균주가 분리되었다. $EF-1{\alpha}$ 유전자의 염기서열을 기초로, 분리된 Fusarium 중 67균주를 Fusarium armeniacum으로 동정하였고, 형태적, 배양적 특성을 확인하였다. F. armeniacum은 분생포자 크기, 균총 색, 및 $EF-1{\alpha}$ 염기서열에서 균주간에 상당한 차이가 있었다. 액체크로마토크래피-질량분석기를 사용하여 potato sucrose agar (PSA) 배지에서 T-2와 HT-2 독소생성능력을 결정하였던 바 F. armeniacum 24균주 중 21균주가 T-2와 HT-2 독소를 모두 생성하였으며, 독소생성 수준은 균주간에 다양하였다. 이러한 결과는 한국산 F. armeniacum 균주들이 형태적, 배양적, 유전적 및 독소학적 성질에서 다양성을 갖는다는 것을 보여준다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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