The chlorophyll-protein complexes were separated from thylakoid membranes of Spinach oleracea and Zoysia japonica by two gel Systems of LiDodSO4-PAGE and LiDodSo4/Urea- PAGE under nondenaturing conditions. Seven chlorophyll~protein complexes of CPI*, CPI, CPII*. CP47, CP43, CP29 and CPII were fractionated from both S,oleracea and Zjaponica by LiDodSO4-PAGE. CPI, CP47 and CP43 contained more chlorophyll a than chlorophyll b. The patterns of their absorption spectra at room temperature were similliar to that of chlorophyll a, judging by their UV-spedtroscopy. On the other hand, CPII* and CPII contained approximately equim-olar quantities of chlorophyll a and b. Additional five chlorophyll-protein complexes not separated in the LiDodSO4-PAGE system were electrophoretically isolated from both S, oleracea and Zjaponica by LiDodSO4/Urca-PAGE. The chlorophyll-protein complex just above LRCII $\alpha$in the gel appears CCII-RC separeted recently. 23 kDa and 20 kDa cho-protein complexes is probably LHCIa and LHCIb as judged from their molecular weight. Two novel chlorophyll~protein complexes designated "CPI7" and "CPI6" were fractionate by this gel system. Their molecular weights respectively. Although the stoichiometry of their components and their roles in thylakoid membranes are not apparant, It is thought that they are another kinds of LHCI.other kinds of LHCI.
The response of Spirulina (Arthrospira) platensis to high salt stress was investigated by incubating the cells in light of moderate intensity in the presence of 0.8 M NaCl. NaCl caused a decrease in photosystem II (PSII) mediated oxygen evolution activity and increase in photosystem I (PSI) activity and the amount of P700. Similarly maximal efficiency of PSII (Fv/Fm) and variable fluorescence (Fv/Fo) were also declined in salt-stressed cells. Western blot analysis reveal that the inhibition in PSII activity is due to a 40% loss of a thylakoid membrane protein, known as D1, which is located in PSII reaction center. NaCl treatment of cells also resulted in the alterations of other thylakoid membrane proteins: most prominently, a dramatic diminishment of the 47-kDa chlorophyll protein (CP) and 94-kDa protein, and accumulation of a 17-kDa protein band were observed in SDS-PAGE. The changes in 47-kDa and 94-kDa proteins lead to the decreased energy transfer from light harvesting antenna to PSII, which was accompanied by alterations in the chlorophyll fluorescence emission spectra of whole cells and isolated thylakoids. Therefore we conclude that salt stress has various effects on photosynthetic electron transport activities due to the marked alterations in the composition of thylakoid membrane proteins.
Ultrastructural and anatomical features of the leaf were studied in Panax ginseng C.A. Meyer(ginseng). The ginseng leaf poorly developed palisade tissue and the size of mesophyll cell was larger and the chloroplast density was lower than that of Glycine max (soyben). Ginseng chloroplast was filled with highly stacked grana and condensely-arrayed thylakoid, so the stroma space was hardly absorbed. However, ginseng mesophyll tissue and chloroplast array did not reduce light energy entering the mesophyll chloroplast, and the high LHCP/CP ratio of ginseng thylakoid resulted in the absorption of excess photon. It is reasonable to assume that 1O1-photogenearation by excess light energy partially resulted from the anatomical and ultrastructural characteristics of the ginseng leaf.
For searching the photosynthetic electron transport(PET) inhibitors, bio-rational screening system using thylakoid membranes extracted from wild and mutant cyanobacteria(Anacystis nidulans $R_2$) was developed. Generally, thylakoid membrane was more sensitive to the tested herbicides than the chloroplast from spinach in the Hill reaction. Higher resistant characteristics appeared in mutant D-5, Di-22 to diuron and mutant G-264 to atrazine as compared to wild type. To test the reaction of thylakoid membrane to herbicides, diuron and atrazine were applied simultaneously. Diuron and atrazine competed each other for binding with substituted amino acids, while diuron and dinoseb were non-competitive, and inhibiting activity was increased. Conclusively, bio-rational screening system using cyanobacteria was proved to be fast and efficient screening method for the development of PET inhibitors.
Vsing the phosphorylated thylakoid membrane induced by 5-35kLux of light intensities, we investigated the chlorophyll nuorescence quenching of PSII and the phosphorylation of LHCPII i in relation to the chlorophyll-bleaching of Panax ginseng C.A. Meyer. In the Presence of DCMU, both of the fluorescence yield of non-phosphorylated thylakoid and the rate of fluorescence quencing dependent on the Phosphorylation were high p. ginseng more then Glyine max L. And at the high light F intensity (above 25 kLux) the fluorescence quenching rate of p. ginseng compared with that of G. max reached nearly to 2 times. The LHCPII of P. ginseng was composed of 3 major Polypeptides (24.5, 26 and 27kD) and 3 minor polypeptides (24, 25.3 and 28.3kD) in the region of 24-29kD and differed, from G. max in both of the number and quantity of polypeptides. Among these polypeptides, the phosphorylated polypeptide dependent on the light intensity was 24kD in P. ginseng.
To analyze the effects of surfactants on the biosynthesis of galactolipid and the composition of fatty acids, the chloroplast envelope and thylakoid membrane were cultivated in medium treated with anionic surfactants, such as linear alkylbenzene sulfonate (0.002%, LAS), a-olefin sulfonate (O.01%, AOS), and sodium lauryl ether sulfate (0.08%, SLES), respectively. During the cultivation, the chloroplast envelope and thylakoid membrane were isolated from the cells collected at the early and middle phase of the culture and the contents of their fatty acid composition were compared with the control. When treated with surfactants, the contents of total lipid MDGD methylesters, and DGDG methylesters decreased significantly when compared with the control. It was also confirmed that more unsaturated fatty acids were involved in the biosynthesis of galactolipid. The fatty acids utilized in the biosynthesis of MGDG were in the chloroplast envelope and in the control, and linoleic acid in LAS, linolenic acid and oleic acid in AOS, and linolenic acid and oleic acid in SLES. The fatty acids in the biosynthesis of DGDG were linolenic acid and oleic acid in the control linolenic acid and stearic acid in LAS, oleic acid and linolenic acid in AOS, oleic acid and linolenic acid in SLES. In the thylakoid membrane, the major fatty acids in the biosynthesis of MGDG were linolenic acid and oleic acid in the control, oleic acid and linolenic acid in LAS, linolenic acid and linoleic acid in AOS, linolenic acid and palmitoleic acid in SLES. The fatty acids in the biosynthesis of DGDG were linolenic acid and oleic acid in the control, oleic acid and linolenic acid in LAS, linolenic acid and linoleic acid in AOS, palmitoleic acid and oleic acid in SLES.
In order to characterize the chloroplasts of Korean ginseng as a semi-shade plant and radish as a sun plant, effects of growth light intensity on photosynthetic electron transport (PS) activity in chloroplasts and superoxide (O2.-) production in thylakoid membrane by irradiation were investigated. High-light chloroplasts of both plants showed higher PS activities than those grown under ow growth light intensity. High PS II and low PS I activities in ginseng chloroplasts (ratio of PS II/PS I : 1.1) were observed, but radish chloroplasts showed low PS II and high PS I activities (ratio of PS II/PS I : 0.3). PS II activity of both plants was little affected by temperature in range of 15-35$^{\circ}C$. Activities of whole -chain (PS II+I) in ginseng and PS I in radish were increased at high temperature (4$0^{\circ}C$). Preincubation of chloroplasts at 4$0^{\circ}C$ during 30 min, as a mild heat stress, caused rapid decrease in PS II and PS II+I activities of both plants. However PS I activity was not decreased in ginseng and rather increased in radish. O2.- production (NBT reduction) in Mehler reaction in the thylakoid membrane was inhibited by DCMU in both plants. DMBIB inhibited O2.- production in ginseng, but radish was insensitive to DMBIB. Electron flow system in ginseng thylakoid membrane was more susceptible to damage of photooxidation than that of radish.
In order to determine the relationships between the lea(-burning disease and the light harvesting chlorophyll-protein (LHCP) complex in Panax ginseng C. A. Meyer, we investigated the chlorophyll-protein (CP) complex of the thylakoid membrane and its characteristics. In P. ginseng four Cp-complex bands determined by non-denaturing SDS-PAGE were identified CP I'(containing reaction center of photosystem I and LHCP I antennae), CP I (reaction center of photosystem I) LHCP II** (oligoform of LHCP II), and LHCP II (photosystem II antennae, CP 26 and CP 29) by Bassis and Dunahay's procedures. Under our experimental condition, the CP I band was only observed in P. ginseng and the band intensity of LHCP II** in P ginseng was higher than in spinach and soybean. There were differences in the absorption and fluorescence spectra and chlorophyll a/b ratio of the CP-complex bands between P. ginseng and other Plants. The Polypeptidr content of P. ginseng thylakoid was lower than in spinach and soybean thylakoid, and the Polypeptide profiles of P. ginseng was low band intensity, especially about 29-35 kD, 55 kD, and 60 kD, compared to spinach and soybean. The inhibitory effects of 2,5-dimethylfuran, specific singlet oxygen ($^1O_2$) quencher, showed that singlet oxygen destroyed 60% of chl.a, 90% of chl.b and 70% of carotenoid in bleaching P. ginseng with leaf-burning disease.
Kim, Sung-Eun;Kim, Seung-Yong;Ahn, Sul-Hwa;Chun, Jae-Chul
The Korean Journal of Pesticide Science
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v.9
no.1
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pp.88-96
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2005
Paraquat-resistant biotype of Conyza canadensis (L.) Cronq. was determined by chlorophyll loss and random amplified polymorphic DNA (RAPD) analysis and the resistant mechanism was investigated with respect to absorption, translocation, and binding constant. RAPD analysis for paraquat resistant (R) and susceptible (S) biotypes found in a pear orchard revealed that the biotypes possessed remote genetic relationship. Chlorophyll loss, as an indication of paraquat toxicity, of S biotype was 7.8-fold greater than that of R biotype. There were no differences in contents of epicuticular wax and cuticle and amounts of [14C]paraquat penetrating the cuticle between the two biotypes. Little translocation of the herbicide out of the treated leaf was observed in either biotype. Binding constants of paraquat to the cell wall and thylakoid membrane were 7.4-fold and 16.9-fold, respectively, higher in R biotype than in S biotype. The results suggest that the resistance mechanism of C. canadensis biotype is due partly to high binding affinity of paraquat to the cell wall and thylakoid membrane.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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