The complete life cycle of Echinostoma hertense has been maintained in the laboratory, using Lymnaea persia snails and Rana nigromaculata tadpoles as the first and second intermediate hosts. ICR mice was used as the definitive host. Within the egg of 5. hotense, the miracidium was fully matured in 13 days of incubation at $29~30^{\circ}C$. The miracidium was $93.8{\times}53.6{\;}{\mu\textrm{m}}$ in average size, covered with numerous cilia of $7~11{\;}{\mu\textrm{m}}$ length. The epidermal plates were arranged in 6-8-4-2 formula. The first generation rediae ($1.19{\times}0.27{\;}mm$ in average size) were observed in 14 days after miracidial challenge to the snails, and the second generation rediae ($1.40{\times}0.26{\;}mm$ in average size) in 30 days. The average sixte of the cercaria was $295.5{\times}145.0{\;}{\mu\textrm{m}}$. Their head crown was poorly developed, and collar spines were not yet observed. After a cercarial challenge to the tadpoles, all of the tadpoles became infected and the average worm recovery rate was 88.5%. The majority of the metacercariae (75.5%) were recovered from the muscle of the tadpole's posterior body and the rest (24.3%) from their gills. The metacercariae from the tadpoles were elliptical, and $167.7{\times}129.9{\;}{\mu\textrm{m}}$ in average size. The recovery rate of adults from the mice was difFerent by the age of the metacercariae grown in the tadpoles. The metacercariae younger than 5 hrs could not infect mice whereas those older than 6 hrs could infect mice. The recovery rate became higher as the metacercaria matured, with the peak recovery rate of 90.0 % at the metacercarial age of 9 days. Thereafter the recovery rate decreased to 55.0% at the age of 50 days. As shown by the above results, the whole life cycle of E. hcrtense has been completed in the laboratory. At least 55~58 days were required to maintain one egg-to-egg cycle of E. hortense.
The development of Echinestcma cinetorchis in several snail species reared in laboratory aquaria was observed. The eggs from adult cukes collected from the intestine of rats were cultivated to miracidia, and exposed to Hippeutis sp. snails. Observations were made for cercarial shedding from the exposed snails. The cercariae shed from the snails were again exposed to several species of fresh water snails in order to observe metacercarial formation in the snails and their infectivity to final hosts. The results obtained in this study were as follows: 1. Twenty miracidia were exposed to each snail of Hippeutis sp. About 58.3% of the above snails (7 out of 12) were dead before shedding the cercariae, anti the remainder shed the cercariae for a period of 7 to 9 days before death. 2. Cercarial shedding from the infected snails started from the 25th day after the exposure to mi.acidia, and the total number of cercariae shed per snail was 684 in average (range; 482-904). 3. The sixte of refine developed in the infected Hippeutis sp. snails was 1$, 242{\times}214{\;}{\mu}m$ in average, and the number of rediae per snail was 350 in average (range; 120-510). 4. About 40 to 50 cercariae shed from the Hippeutis sp. snails were each exposed to several species of snails reared in the laboratory. The metacercarial formation was confirmed by dissecting the infected snails, 12 to 16 days after the infection. The infectivity to each snail species was 100% in Hippeutis sp. (recovery rate; 56.7%) and Radix auricuzaria coreana (recovery rate; 66.4%), 66.7% in Physa acute (recovery rate; 37.5%), and 50% in Cipangopaludina sp. (recovery rate; 8.0%), respectively. 5. The swimming cercariae attached first at the cephalo-podial part of the snails and then migrated to the mantle, internal organ s and hemocele areas to form the metacercariae. 6. Adult worms of E. cinetorchis were obtained from the rats infected with the metacercariae encysted in the experimental snails. Summarising the above results, it is suggested that the mud-snail (Cipangopaludina sp.) may play an important role as a source of human infection with E. cinetorchis in Korea, and that several species of fresh water snails are involved in the life cycle as a second intermediate host.
We investigated the effects of death and gametogenesis by infection of the trematode in the venus clam, Cyclina sinensis. The specimens of C. sinensis were collected monthly at the tidal flat of Kaehwado, Puan-gun and Sangpo aquafarms, Kochang-gun, Chollabuk-do, Korea, from June 1999 to May 2000. One species of a trematode, the metacercaria of Himasthla kusasigi Yamaguti, 1939 (Enchinistomatidae), was found in the venus clam, C. sinensis. Infection rates in Kaehwado area and Sangpo aquafarm were average 93% and 81%, respectively. Infection rates during the study period reached the maximum (100%) in September 1999 and March-April 2000 and showed the minimum (80%) in July in Kaehwado, while those in Sangpo aquafarm showed the maximum (99%) in January 2000 and the minimum (47%) in November 1999. The infection parts of the metacercaria of H. kusasigi in the venus clam were the visceral mass, gill, mantle including the foot. Their infection rates in Kaehwado area and Sangpo aquafarm were 76.7% and 81.3% in the visceral mass, 19.1% and 14.5% in the gill, and 5,1% and 4.2% in the mantle, respectively. Infection rates of H. kusasigi showed higher with the increase of the size of the clams. No abnormal characteristics in the various tissues by histological observations were found in the clams infected by the metacercaria of H. kusasigi because this clam is the second intermediate host.
The echinostomatid metacercariae encysted in the gill of the fresh water fish, Pseudorasbora larva were identified through obtaining adult worms after eBperimental infection to mice. In addition, a brief course of worm development and maturation was observed in this experimental host. The results were as follows: 1. The echinostomatid metacercariae were elliptical, golden yellow, 0.073∼0.078 mm long and 0.0541∼0.065 mm wide. Their head portions were characterized by the presence of a head crown armed with collar spines of total 24 in number and interrupted at the mid-dorsal side of the oral sucker. 2. The average rate of worm recovery froth 12 mice (on the 1-2lth postinfection days) was 19.4 % and the rate revealed no decrease in accordance with the increase of infection duration. The worms were collected chiefly from the lower part of the small intestine. 3. After the infection, their sexual maturation was attained in 5 days and their growth in size nearly completed in 7 days. The early growth curve of genital organs was S shape while that of nongenital organs was C form. In 5 day old worms, 1 or 2 eggs were found from their uteri and the stools of mice revealed echinostomatid eggs from the 5-6th postinfection day. 4. The 7 day old adult worms were ovoid in shape, 0.54-0.69 mm long and 0.29-0.34 mm wide, and characterized by a well developed head crown with 24 collar spines and vitelline follicles distributed from the acetabular level down to the posterior end of body. Based on these characters they were identified to be Echinochasmus japonicus Tanabe, 1926. From these results, it is verified that p. larva is one of the second intermediate hosts of 5. jatonicus in Korea.
Life cycle stages, including daughter sporocysts, cercariae, and metacercariae, of Parvatrema duboisi (Dollfus, 1923) Bartoli, 1974 (Digenea: Gymnophallidae) have been found in the Manila clam Ruditapes philippinarum from Aphae-do (Island), Shinan-gun, Jeollanam-do, Korea. The daughter sporocysts were elongated sac-like and 307-570 (av. 395) ㎛ long and 101-213 (av. 157) ㎛ wide. Most of the daughter sporocysts contained 15-20 furcocercous cercariae each. The cercariae measured 112-146 (av. 134) ㎛ in total length and 35-46 (av. 40) ㎛ in width, with 69-92 (av. 85) ㎛ long body and 39-54 (av. 49) ㎛ long tail. The metacercariae were 210-250 (av. 231) ㎛ in length and 170-195 (av. 185) ㎛ in width, and characterized by having a large oral sucker, genital pore some distance anterior to the ventral sucker, no ventral pit, and 1 compact or slightly lobed vitellarium, strongly suggesting P. duboisi. The metacercariae were experimentally infected to ICR mice, and adults were recovered at day 7 post-infection. The adult flukes were morphologically similar to the metacercariae except in the presence of up to 20 eggs in the uterus. The daughter sporocysts and metacercariae were molecularly (ITS1-5.8S rDNA-ITS2) analyzed to confirm the species, and the results showed 99.8-99.9% identity with P. duboisi reported from Kyushu, Japan and Gochang, Korea. These results confirmed the presence of various life cycle stages of P. duboisi in the Manila clam, R. philippinarum, playing the role of the first as well as the second intermediate host, on Aphae-do (Island), Shinan-gun, Korea.
An experimental study was carried out to observe the effects of radiation on the infectivity of metacercariae of Gymnophalloines seoi to C3H mice. Oysters, the second intermediate host, were collected from an endemic area, and non-irradiated control, metacercaria-irradiation, and oyster-irradiation groups were prepared . One hundred metacercariae were infected orally to each mouse, and worm recovery rate was compared by groups at 7th day post-infection. In the metacercaria-irradiation group, the worm recovery rate was significantly reduced at radiation doses higher than 200 Gy, and the number of intrauterine eggs significantly reduced at doses over 50 Gy. In the oyster- irradiation group, 50 Gy significantly reduced both the worm recovery rate and number of uterine eggs. In the two groups, no worm was recovered at 1,000 Gy irradiation. Conclusively, irradiation of oysters with 200-1,000 Gy was effective to control infectivity of metacercariae to C3H mice, and could be adopted as a control measure for gymno-phalloidiasis.
The life history of a trematod fluck, Himasthla kusasigi was studied on the morphological characters of metacercariae, its infection rate in the clam and the contamination experiment to the herring gull, Larus crassiostris. The size of the metacercariae was $210{\sim}230{\times}220{\mu}m$, excysted metacercariae was $420{\times}160{\mu}m$ and it had 31 collar spines. The ventral sucker($112{\times}100{\mu}m$) was located just below the central part of the body. Esophagus was narrow and long, the intestine was branched in the upper part of the ventral sucker and extended to the hind part of the body. Excretory bladder without the infected part was located in the hind part of the body. The branched excretory tube was filled with the small granules and extended to the pharynx area. The infection rate of the metacercariae varied from place to place. In Naecho do and Puan the rates were $98.4\%$ and $95.9\%$ respectively. The infected number of Himasthla kusasigi per clam was positively proportional to the size of the clam. The adult fluckes developed from the metacercariae were obtained from the experimented herring gull. The metacercariae emerge from their cysts in the stomach of the herring gull, then they migrate it the intestine and 25 days after, most of them were found in the intestine. The size of the adult was $4.8{\sim}7.5{\times}0.22{\sim}0.24mm$, oral sucker; $68{\sim}120{\times}70{\sim}120{\mu}m$, pharynx: $80{\times}50{\mu}m$, ventral sucker: $630{\sim}680{\times}610{\sim}680{\mu}m$. The head collar $48{\sim}75{\times}10{\mu}m$ had 31 collar spines. The isolated trematod fluck from the samples was classified as a Himasthla kusasigi by the morphological characteristics of the adult flock and its metacercariae. We oberved that the second intermediate host of Himasthla kusasigi was hard clam, Meretrix lusoria, while its final host was herring gull, Larus crassiostris and Tringa ochropus.
Intestinal histopathological changes due to infection with Echinostcma hortense (Trematoda) were studied in rats after experimental infection with the metacercariae. The metacercariae were obtained from the tadpoles of Rana nigrcmaculata, a second intermediate host infected in the laboratory. Total 18 albino rats(Sprague-Dawley) were given 200 matacercariae each and sacrificed on the day 1, 3, 7, 11, 22 or 44 post-infection(PI) Segments of- the small intestine at 1, 3, 5, 8 and 30 cm posterior to the pylorus(PTP) were rejected and studied histopathologically. 1. The flukes were seen to have intruded into the intervillous space in the upper small intestine at early stages(1∼3 days PI), however, they were located mainly in the intestinal lumen at later stages(7∼44 days PI) . The flukes were sucking and destroying the epithelial layers of villi with their oral and ventral suckers. 2. Histopathological changes of the intestine were recognizable in as early as 1∼3 days after infection, and the changes became severer as the infection progressed. 3. The intestinal mucosa was histopathologically characterized by villous atrophy and crypt hyperplasia throughout the infection period. Major villous changes were blunting, fusion, severe destruction and loss of epithelial layers of villi. Villous/crypt(V/C) height ratio was remarkably reduced from 3 : 1 in controls to 1 : 1 in severely infected animals. In the stroma of villi, inaamma- tory cell infiltrations, vascular congestion, edema, and/or fibrosis were recognized. The goblet cells were increased in number after 11 days PI. It was revealed in the present study that the pathological changes in the intestine of rats infected with E. hortense were chieay confined to the mucosal layer of the upper small intestine, however, the changes were very severe accompanying remarkable destruction of villi and loss of mucosal integrity, and persistent until 44 days PI.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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