Objectives : In Traditional Korean medicine, Daucus carota L. has been used for treating dyspepsia, diarrhea, dysentery and cough. Recent pharmacognosic evidence showed D. carota has anti-oxidant, anti-cancer, anti-fungal, and hypotensive effects. Present study investigated hepato-protective effect of D. carota ethanol extract (DCE) against oxidative stress in HepG2 cells. Methods : After HepG2 cells were pretreated with different concentrations of DCE, the cells were exposed to tert-butyl hydroperoxide (tBHP) for inducing oxidative stress. Cell viability, hydrogen peroxide production, glutathione concentration, and mitochondrial membrane potentials were measured to explore hepato-protective effect of DCE. Phosphorylation of AMP-activated protein kinase (AMPK) and effect of compound C on cell viability were determined to investigate the role of AMPK on DCE-mediated cytoprotection. Results : DCE significantly decreased the tBHP-mediated cytotoxicity in a concentration dependent manner and reduced the changes on apoptosis-related proteins by tBHP in HepG2 cells. In addition, DCE significantly prevented hydrogen peroxide production, glutathione depletion, and mitochondrial membrane impairment induced by tBHP. Treatment with DCE increased phosphorylation of AMPK, and the DCE-mediated cytoprotection was abolished by pretreatment with compound C. Conclusions : These results demonstrate that DCE can protect hepatocytes from oxidative stress through activation of AMPK.
Overexpression of phospholipid hydroperoxide glutathione peroxidase (PHGPx) genes has been reported to play an important role in protecting host cells from oxidative injury in several model systems. A radish phospholipid hydroperoxide glutathione peroxidase (RsPHGPx) known to have high catalytic activity was applied to mouse 3T3 fibroblasts to determine the protective effects of PHGPx against oxidative injury triggered by hydroperoxides such as hydrogen peroxide ($H_2O_2$), tert-butyl hydroperoxide (t-BHP) and phosphatidylcholine hydroperoxide (PCOOH). We observed that preincubation of cells with RsPHGPx significantly increased cell viability, reduced levels of malondialdehyde (MDA), inhibited generation of reactive oxygen species (ROS), and maintained natural cell shapes after treatment with $H_2O_2$, t-BHP or PCOOH, indicating that the exogenous RsPHGPx can act as an effective hydroperoxide-scavenger and may also protect target cells from oxidative damage. These results suggest the possibility for use of RsPHGPx as a therapeutic protectant.
In the present study, antioxidant activity and protective effect of extracts from Sambucus williamsii var. coreana stems (SWC) were evaluated on tert-butyl hydroperoxide (t-BHP) induced oxidative stress in human liver (Chang) cells. Antioxidant activities of the SWC extracts were determined by various radical scavenging activities, such as DPPH, ferric reducing antioxidant power (FRAP), 2,2'-azinobis-(3-ethybenzothiazoline-6-sulfonic acid) (ABTS) radical scavenging activity and oxygen radical absorbance capacity (ORAC) assay. SWC extracts showed strong antioxidant effect on various assay. To determine the hepatoprotective effects of SWC on t-BHP induced oxidative damage, cell viability was measured using MTT assay. Pretreatment of SWC extracts showed increasing cell viability, decreasing ROS and restoring mitochondria membrane potential on t-BHP induced oxidative stress in Chang cells. Our findings suggest that SWC extracts may be considered a potential agent for therapeutic protective effect from oxidative stress through its antioxidant activity.
동물실험에서 실크단백질 산 가수분해물을 투여하고 t-BHP투여한 군의 혈액 생화학적 검사 결과 t-BHP만 투여한 군과 비교하였을 때 AST, ALT 그리고 LDH가 실크단백질 산 가수분해물의 투여 농도가 높아질수록 수치가 감소하는 것으로 나타났고 세포가 손상할 시에 증가하는 MDA를 간 조직을 대상으로 측정한 결과 실크단백질 산 가수분해물의 농도가 높아질수록 수치가 대조군과 유사한 정도로 감소하는 것으로 보아 간 손상에 관여하는 효소의 누출 억제효과가 있는 것으로 사료된다. HPLC로 간 조직에서의 GSH 측정결과 t-BHP만 투여한 군과 비교하였을 때 유의적으로 증가하였고 조직학적 검사 결과 t-BHP만 투여한 군과 비교하였을 때 실크단백질 산 가수분해물을 투여한 군이 대조군과 가까운 모습을 보이는 것으로 관찰되어 실크단백질 산 가수분해물이 산화적 스트레스로부터의 간 보호 효과가 있는 것으로 사료된다. 따라서 실크단백질 산 가수분해물의 기능적 소재로서의 이용가능성이 확대될 것으로 사료된다.
Sihosamultang(SST) has been used for the treatment of puerperal fever, liver disease in traditional medicine. The present study was carried out to evaluate the antioxidant effects of SST extract in vitro. The inhibitory effect of SST extract on lipid peroxidant was examined in the linoleic acid autoxidation system. In this test, SST extract significantly inhibited the time course of the lipid peroxidation. And SST extract showed about 73% scavenging effect on DPPH radical. And this extract inhibited not only the lipid peroxide formation induced by hydroxyl radical derived from $ H_{2}O_{2}-Fe^{2+}$ in the rat liver homogenate, but also the superoxide generation from xanthine-xanthine oxidase system in a dose-dependent manner. In addition, SST extract protected the hepatic cell death induced by tert-butyl hydroperoxide. These data indicated that SST might play a protective role against oxidative injury by free radicals.
Lee, Ji Yoen;Lee, Mi Hwa;Park, Hae-Ryoun;Choi, Jae Soo;Seo, Hong Suk;An, Won Gun;Choi, Won Chul
한국어병학회지
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제16권1호
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pp.39-49
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2003
Cytosolic oxidation by 4-hydroxy-2-nonenal (4HNE) and tert-butyl hydroperoxide (t-BHP) results in cell death of bovine aortic endothelial cells (BAEC). In this study, we have investigated the roles of antioxidants such as 2,3,6-tribromo-4,5-dihydroxy benzyl methyl ether (TDB) and phloroglucinol in preventing cell death. After treatment with oxidants for 6h, cells became compact and showed nuclear condensation, which were characteristics of early apoptosis. After l2h treatment, morphologic features including severe cytoplasm condensation, membrane blebbing, and apoptotic bodies were prominent and these findings were interpreted as characteristics of late-apoptosis. When the apoptotic cells were treated with antioxidants for 12h, both early and late apoptotic cells did show no significant change. After oxidant treated cells were incubated with antioxidant for 24h, the characteristics of early-apoptosis were eliminated but cells in lateapoptosis could not return to normal cells. These results suggest that TDB and phloroglucinol prevent the cells from dying through apoptosis induced by 4HNE and t-BHP in early stage.
Jho, Eun Hye;Kang, Kyungsu;Oidovsambuu, Sarangerel;Lee, Eun Ha;Jung, Sang Hoon;Shin, Il-Shik;Nho, Chu Won
BMB Reports
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제46권10호
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pp.513-518
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2013
We investigated the protective effects of Gymnaster koraiensis against oxidative stress-induced hepatic cell damage. We used two different cytotoxicity models, i.e., the administration of tert-butyl hydroperoxide (t-BHP) and acetaminophen, in HepG2 cells to evaluate the protective effects of G. koraiensis. The ethyl acetate (EA) fraction of G. koraiensis and its major compound, 3,5-di-O-caffeoylquinic acid (DCQA), exerted protective effects in the t-BHP-induced liver cytotoxicity model. The EA fraction and DCQA ameliorated t-BHP-induced reductions in GSH levels and exhibited free radical scavenging activity. The EA fraction and DCQA also significantly reduced t-BHP-induced DNA damage in HepG2 cells. Furthermore, the hexane fraction of G. koraiensis and its major compound, gymnasterkoreayne B (GKB), exerted strong hepatoprotection in the acetaminophen-induced cytotoxicity model. CYP 3A4 enzyme activity was strongly inhibited by the extract, hexane fraction, and GKB. The hexane fraction and GKB ameliorated acetaminophen-induced reductions in GSH levels and protected against cell death.
BAN SONG-VI;HUH CHUL-SUNG;AHN YOUNG-TAE;LIM KWANG-SEI;BAEK YOUNG-JIN;KIM DONG-HYUN
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제15권4호
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pp.887-890
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2005
To evaluate the hepatoprotective activity of lactic acid bacteria, their effects on tert-butylperoxide (t-BHP)-induced hepatotoxicity in mice were measured. When lactic acid bacteria at doses of 0.5 and 2 g (wet weight)/kg were orally administered to mice with t-BHP-induced liver injury, these bacteria significantly inhibited the increase of plasma alanine aminotransferase and aspartate aminotransferase activities by $17-57\%$ and $57-66\%$ of the t-BHP control group, respectively. However, these lactic acid bacteria did not protect cytotoxicity induced by t-BHP against HepG2 cells. The inhibitory effects of these lactic acid bacteria at a dose of 15 g/kg were comparable with that of diphenyl dimethyl bicarboxylate at a dose of 0.2 g/kg, which has been used as a commercial hepatoprotective agent. Among these lactic acid Jacteria, Bifidobacterium longum HY8001 exhibited the most potent hepatoprotective effect. These orally administered lactic acid bacteria inhibited liver lipid peroxidation on t-BHP-induced hepatotoxicity of mice. We suggest that lactic acid bacteria may be an effective agent against liver injury.
Kahweol and cafestol significantly reduced t-BHP-induced oxidative injuries in cultured rat hepatocytes, as determined by cell cytotoxicity, intracellular glutathione (GSH) content and lipid peroxidation in a dose-dependent manner. In addition, kahweol and cafestol provided good protection from the t-BHPinduced production of intracellular reactive oxygen species and DNA damage. The in vivo study showed that pretreatment with kahweol and cafestol prior to the administration of t-BHP significantly prevented the increase in serum levels of hepatic enzyme markers (alanine aminotransferase and aspartate aminotransferase) and reduced oxidative stress, such as GSH content and lipid peroxidation, in the liver in a dose-dependent manner. The histopathological evaluation of the livers also revealed that kahweol and cafestol reduced the incidence of liver lesions induced by t-BHP. Taken together, these results support the anti-oxidative role of kahweol and cafestol and demonstrate that kahweol and cafestol can protect hepatocytes from oxidative stress.
Objectives: Haeganjeon(HGJ) has been used for the treatment of liver disease in traditional medicine. The present study was carried out to evaluate the antioxidant and protective effects of HGJ extract on oxidative damage of hepatocytes by tert-butyl hydroperoxide(t-BHP). Methods: In the linoleic acid water-alcohol system, the levels of lipid peroxide(LPO) were determined by TBA method. The scavenging effect of HGJ on ${\alpha},{\alpha}-diphenyl-{\beta}-picrylhydrazyl$(DPPH) radical was determined according to the method of Hatano. In the Fenton system(ferrous ion reaction with hydrogen peroxide), the levels of hydroxyl radical induced LPO in rat liver homogenate were determined according to the method of TBA. Inhibitory effect of HGJ on superoxide generation was measured by xanthine-xanthine oxidase system. In order to evaluate antioxidative activity of HGJ in the liver cell, cultured normal rat liver cells(Ac2F) were prepared and incubated with or without HGJ. After 18hr, cells placed in DMEM medium without serum, and then incubated with 1mM tert-butyl hydroperoxide(t-BHP) for 2hrs. Viable cells were detected by MTT assay. Conclusions: In the linoleic acid autoxidation system, HGJ extract significantly inhibited the time course of the lipid peroxidation. These effects were similar to those of BHA HGJ extracts showed about 70% scavenging effect on DPPH radical. And HGJ extract inhibited the lipid peroxide formation in rat liver homogenate induced by hydroxyl radical derived from Fenton system. In addition, HGJ extract protected the cell death induced by t-BHP and significantly increased cell viability in the normal rat liver cell. These result indicated that HGJ extract might playa protective role against oxidative hepatic cell injury by means of free radical scavenger.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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