The oligosaccharides in human milk constitute a major innate immunological mechanism by which breastfed infants gain protection against infectious diarrhea. Clostridium difficile is the most important cause of nosocomial diarrhea, and the C-terminus of toxin A with its carbohydrate binding site, TcdA-f2, demonstrates specific abolishment of cytotoxicity and receptor binding activity upon diethylpyrocarbonate modification of the histidine residues in TcdA. TcdA-f2 was cloned and expressed in E. coli BL21 (DE3). A human milk oligosaccharide (HMO) mixture displayed binding with TcdA-f2 at 38.2 respond units (RU) at the concentration of 20 μg/ml, whereas the eight purified HMOs showed binding with the carbohydrate binding site of TcdA-f2 at 3.3 to 14 RU depending on their structures via a surface plasma resonance biosensor. Among them, Lacto-N-fucopentaose V (LNFPV) and Lacto-N-neohexaose (LNnH) demonstrated tight binding to TcdA-f2 with docking energy of −9.48 kcal/mol and −12.81 kcal/mol, respectively. It displayed numerous hydrogen bonding and hydrophobic interactions with amino acid residues of TcdA-f2.
Phage display of proteins is a powerful tool for protein engineering since a vast library of sequences can be rapidly screened for a specific property. In this study, we develop da new phage display vector that was derived from a pET-25b(+) vector. The pET-25b(+) was modified in order that the expressed protein would have a T7-tag at the amino terminus and GpS (a major coat protein of M13 phage) at the carboxyl terminus. Another vector without the gp8 gene was also constructed. The newly developed phagemid vectors have several advantageous features. First, it is easy to examine whether or not the target proteins are functional and faithfully transported into the periplasmic space. This feature is due to the fact that recombinant proteins are produced abundantly in the pET system. Second, the T7-tag makes it possible to detect any target proteins that are displayed on the surface of filamentous bacteriophage. To verify the utility of the vector, the clones containing the glutathione S-transferase (GST) gene as a target were examined. The result showed that the GST produced from the recombinant vector was successfully transported into the periplasmic space and had the anticipated enzyme activity. Western blot analysis using a T7-tag antibody also showed the presence of the target protein displayed on the surface of the phage. The phages prepared from the recombinant clones were able to bind to glutathione-Sepharose and then eluted with glutathione. These results showed that the new vectors developed in this study are useful for the phage display of proteins.
The influence of sine wave striated surface roughness on load carrying capacity of a bearing is studied for thin film effect of slider bearing. A Reynolds equation appropriate for slider bearing is used in this paper for analysis and it is discussed using finite difference method of central difference scheme. For a slider bearing with sine wave simple roughness form, several parameters such as pressure, load capacity and shear stress of the bearing can be obtained and also this results can be stored in sequential data file for latter analysis. After all, their distribution can be displayed and analyzed easily by using the matlab GUI technique. The parameters such as amplitude, number of waviness and slope of the surface are used for discussing the load carrying capacity of the rectangular bearing. The results reported in this paper should be applied to the other slider bearing such as rectangular or round embossed surface of slider bearing.
In this study, we report a new method for the high contrast imaging of biomolecular interactions at roller printed protein surfaces using thermotropic liquid crystals (LCs). Avidin was roller printed and covalently immobilized onto the obliquely deposited gold surface that was decorated with carboxylic acid-terminated self-assembled monolayers (SAMs). The optical response of LCs on the roller printed film of avidin contrasted sharply with that on the obliquely deposited gold surface. The binding of biotin-peroxidase to the roller printed avidin was then investigated on the obliquely deposited gold substrate. LCs exhibited a non-uniform and random orientation on the roller printed area decorated with the complex of avidin and biotin-peroxidase, while LCs displayed a uniform and planar orientation on the area without roller printed proteins. The orientational transition of LCs from uniform to non-uniform state was triggered by the erasion of nanometer-scale topographies on the roller printed surface after the binding of biotin-peroxidase to the surface-immobilized avidin. The specific binding events of protein-receptor interactions were also confirmed by atomic force microscopy and ellipsometry. These results demonstrate that the roller printing of proteins on obliquely deposited gold substrates could provide a high contrast signal for imaging biomolecular interactions using LC-based sensors.
Using Bacillus subtilis spore display system, with cotG as an anchoring motif, levansucrase from Zymomonas mobilis, was displayed on the outer surface of Bacillus subtilis spore. Flow cytometry of DB104 (pSDJH-cotG-levU) spore, proved the surface localization of CotG-LevU fusion protein on the spore compared to that of DB104. Enzymatic activity of DB104 (pSDJH-cotG-levU) spore showed more than 1.5 times higher levansucrase specific activity compared to that of the host spore, which is a remarkable increase of enzymatic activity considering the existence of sacA (sucrase) and sacB (levansucrase) in the Bacillus subtilis chromosome. The spore integrity, revealed by sporulation frequency test after heat and lysozyme treatment of spore, did not changed at all in spite of the CotG-LevU fusion protein incorporation into the spore coat layer during spore formation process. These data prove again that Bacillus subtilis spore could be considered as good live immobilization vehicle for efficient bioconversion process.
본 연구의 목적은 시각을 통하여 채색 플라스틱의 거칠기에 따른 감성의 평가구조를 밝혀내는데 있다. 각각의 색채 샘플에 거칠기를 적용한 샘플을 피험자에게 제시하여 설문하고 분석하였으며 감성과 물리적 특성과의 관계를 파악한 결과 채색 플라스틱에서 거칠기에 의한 감성평가요인은 3개의 축으로 나타났다. 또한 5가지의 제시된 색채 샘플에서 거칠기에 의한 유의미한 감성평가의 차이가 있음을 밝혀내었다. 본 연구의 결과는 앞으로 플라스틱이나 기타 소재의 표면 가공에 있어 색채와 거칠기에 의한 표면 디자인의 감성평가를 위한 기초적인 연구 자료로서 활용될 것을 제안한다.
This paper describes the development of automatic shape design program for spur gear. It produces automatically third-dimensional surface and solid model used in CAD/CAM system with inputting simple measurements. This program can maximize user's convenience and get surface and solid model quickly as accepting GUI(graphic user interface). Automatic shape design program for spur gear was developed by Visual LISP, a developer program. Besides, a geometrical method and a mathematical algerian are used in this program. Use frequency of a fine spur gear is on the increase recently and manufacture process of this gear is heat treatment after press processing with molding. In this press processing, the upper punch portion of a fine spur gear shape is drafted by CAM. Therefore, estimated that surface and solid model of spur gear used to CAM are needed in this research. In this research, after 2 ㎜ gear was modeled by auto shape design program, the upper punch portion of a fine spur gear was manufactured as giving third-dimensional model to CAM software and then, displayed the result as applying to press process.
한국표면공학회 2011년도 춘계학술대회 및 Fine pattern PCB 표면 처리 기술 워크샵
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pp.33-35
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2011
Films of CrAlN and CrZrN were deposited on a steel substrate by closed field unbalanced magnetron sputtering, and their oxidation behaviors were investigated. CrAlN films consisted of dense, polycrystalline CrN and AlN fine columns. The formed oxides consisted primarily of crystalline $Cr_2O_3$ incorporated with $Al_2O_3$. The oxide layers were thin and compact so as to make CrAlN films more protective than CrN films. In case of CrZrN films, Zr atoms were dissolved in the CrN phase. Zr atoms advantageously refined the columnar structure, reduced the surface roughness, and increased the micro-hardness. However, the addition of Zr did not increased oxidation resistance, mainly because Zr was not a protective element. All the deposited films displayed relatively good oxidation resistance, owing to the formation of the highly protective $Cr_2O_3$ on their surface. The $Cr_{40}Zr_9N$ and $Cr_{31}Zr_{16}N$ films oxidized to $Cr_2O_3$ as the major phase and ${\alpha}-ZrO_2$ as the minor one, whereas the CrN film oxidized to $Cr_2O_3$.
Julia Correa Raffaini;Eduardo Jose Soares;Rebeca Franco de Lima Oliveira;Rocio Geng Vivanco;Ayodele Alves Amorim;Ana Lucia Caetano Pereira;Fernanda Carvalho Panzeri Pires-de-Souza
The Journal of Advanced Prosthodontics
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제15권5호
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pp.227-237
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2023
PURPOSE. This study aimed to assess and compare the color stability, flexural strength (FS), and surface roughness of occlusal splints fabricated from heat-cured acrylic resin, milled polymethyl methacrylate (PMMA)-based resin, and 3D-printed (PMMA) based-resin. MATERIALS AND METHODS. Samples of each type of resin were obtained, and baseline measurements of color and surface roughness were recorded. The specimens were divided into three groups (n = 10) and subjected to distinct aging protocols: thermomechanical cycling (TMC), simulated brushing (SB), and control (without aging). Final assessments of color and surface roughness and three-point bending test (ODM100; Odeme) were conducted, and data were statistically analyzed (2-way ANOVA, Tukey, P <.05). RESULTS. Across all resin types, the most significant increase in surface roughness (Ra) was observed after TMC (P < .05), with the 3D-printed resin exhibiting the lowest Ra (P < .05). After brushing, milled resin displayed the highest Ra (P < .05) and greater color alteration (∆E00) compared to 3D-printed resin. The most substantial ∆E00 was recorded after brushing for all resins, except for heat-cured resin subjected to TMC. Regardless of aging, milled resin exhibited the highest FS (P < .05), except when compared to 3D-printed resin subjected to TMC. Heat-cured resin exposed to TMC demonstrated the lowest FS, different (P < .05) from the control. Under control conditions, milled resin exhibited the highest FS, different (P < .05) from the brushed group. 3D-printed resin subjected to TMC displayed the highest FS (P < .05). CONCLUSION. Among the tested resins, 3D-printed resin demonstrated superior longevity, characterized by minimal surface roughness and color alterations. Aging had a negligible impact on its mechanical properties.
Recently, we reported an improved technology for the degradation of organophosphate nerve agents using whole cells of genetically engineered Escherichia coli that anchored and displayed the enzyme organophosphorus hydrolase on the cell surface. In this paper we report the immobilization of these cells on highly porous sintered glass beads and the subsequent application of the immobilized cell in a continuous-flow packed bed bioreactor for the biodetoxification of a widely used insecticide, coumaphos.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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