This study was performed to investigate antigenic expression patterns in the course of HSV-1 infection. In SDS-PAGE analysis, HSV-1 antigens were detected, and among them, antigens in the size of 39, 47, 63, 86, 101, 105, 135, 159, and 181 kDa appear to be expressed in the most dominant forms. BALB/c mice were infected with HSV-1 for 29 days and antigenic expression from HSV-1 was investigated by Western blot analysis using anti-HSV-1 sera collected every two days from BALB/c mice infected with HSV-1. Most of HSV-1 antigens appeared sporadically as the infection progressed. However, antigens in the sizes of 63kDa and 135kDa were expressed from day 1 and 3, respectively, and existed continuously during the course of infection for 29 days, suggesting that they are the most dominant antigens inducing immune response durign HSV-1 infection, and they could be the target antigens for the development of vaccines. The isotype levels of IgA, IgGl, and IgM increased till the 17 th day infection and then started to decrease. During this course. IgGl was the most dominant isotype. In an indirect immunofluorescent assay, antibodies exhibited surface binding to the Vero cell infected with HSV-1, demonstrating that HSV-1 antigens are expressed on the surface of Vero cells.
Surface Plasmon Resonance(SPR) sensor system can be applicable for detecting of many biospecific interactions. In this study, the feasibility of the experimental $SPREETA^{TM}$ evaluation kit to analyze human IgG, Pseudomonas aeruginosa, was investigated. The sensor prepared for detecting of anti-human IgG has response on $0.1{\mu}{\ell}$ of the anti-human IgG solution. SPREETA was able to detect P. aeruginosa solution in the range above $10^8\;CFU/mL$ with the chitosan/ alginate multilayers.
This paper reports the relationship between the surface roughness and thermal emissivity of graphite (IG-11) in nuclear reactors. The roughness was controlled by changing the oxidization time, resulting in 0, 6, and 11% losses of mass. The levels of roughness were 0.40, 0.72 and 1.09${\mu}m$ for the weight loss of 0, 6 and 11%, respectively. The binders and graphite fillers were found to have sequentially oxidized with a higher thermal emission for the highly oxidized sample, but with a lower emission when measured at a higher temperature. Our study suggests a method for predicting the thermal emission rate of graphite in a nuclear reactor based on roughness measurement.
The detection of carbamate (carbofuran, carbaryl, benfracarb, thiodicarb, and methomil) and organophosphate (diazinon, cadusafos, ethoprofos, parathion-methyl, and chlorpyrifos) pesticide residues with very low detection limits was carried out using surface plasmon resonance (SPR) based equipment. The capacity to develop a portable SPR biosensor for food safety was also investigated. The applied ligand for the immunoassays was polyclonal goat anti-rabbit immunoglobulin (IgG) peroxidase conjugate. Concentration tests using direct binding assays showed the possibility of quantitative analysis. For ligand fishing to find a proper antibody to respond to each pesticide, acetylcholinesterase (AChE), and glutathione-S-transferase (GST) were tested. The reproducibility and precision of SPR measurements were evaluated. With this approach, the limit of detection for pesticide residues was 1 ng/mL and analysis took less than 11 min. Thus, it was demonstrated that detecting multi-class pesticide residues using SPR and IgG antibodies provides enough sensitivity and speed for use in portable SPR biosensors.
The maximum adsorption/desorption conditions and the adsorption mechanism of globular proteins to vaccine adjuvants were determined. The maximum adsorption ratio of protein to the $Al^{3+}$ content of aluminum oxyhydroxide and the optimal adsorption pH are 2:1 (${\mu}g:{\mu}g$) for bovine serum albumin (BSA) at pH 6.0 and 2.5:1 (${\mu}g:{\mu}g$) for immunoglobulin G (IgG) at pH 7.0, respectively. The maximum adsorption ratio onto aluminum phosphate gel was 1.5:1 (${\mu}g$ Protein:${\mu}g$$Al^{3+}$) at pH 5.0 for both BSA and IgG. Adsorption of the native globular proteins, BSA and IgG, to aluminum oxyhydroxide and aluminum phosphate gel was reversible as a function of pH. Complete desorption of these proteins from aluminum phosphate gel was observed at alkaline pH, whereas only 80~90% removal from aluminum oxyhydroxide was achieved with alkaline pH and 50 mM phosphate buffer. We conclude that electrostatic and hydrogen bonding interactions between the native proteins and adjuvants are important binding mechanisms for adsorption, and that the surface charge of the protein and the colloid components control the maximum adsorption conditions.
위염, 위궤양 및 위암의 원인 균인 Helicobacter pylori 가균체 표면에 다량 함유하며 주된 생존 인자이며 병원성 인자인 urease를 대장균에서 발현시키고 이 효소에 대한 항체 또는 기질과의 특이 상호 작용을 이용하여 두 단계의 간편한 방법에 의하여 정제하였다. 우선 anti-H. pylori Urease IgG-Sepharose column과 urea-Sepharose column을 각각 제조하고 DEAE-Sepharose 음이온 교환수지를 통하여 1차 정제한 시료를 각각 적용하고 제반 조건에서 용출시켰다. Anti-H. pylori urease IgG-Sepharose column의 경우에는 urease 시료가 너무 강력하게 결합함으로써 극단적인 pH조건에서만 용출이 가능함이 관찰되었으므로, 100 mM 탄산 완충액(pH 10.5)으로 최종 용출하였을 때 비교적 순수한 효소를 얻었으나, 비활성이 다소 감소된 것으로 나타났다. 한편, urea-Sepharose에 적용시킨 시료는 100 mM urea-HEB 완충액(pH 7.5)으로 비교적 용이하게 용출되어 비교적 높은 순도와 비활성의 urease 효소를 얻을 수 있었으나 이 경우에는 urease의 smaller subunit인 UreA peptide band의 강도가 다소 감소한 것이 관찰되었다.
We have developed an electrochemical immunosensor that combines the electrocatalytic property of carbon nanotube and the low background current of indium tin oxide (ITO) electrode. A partial monolayer of carboxylated single-walled carbon nanotube (CCNT) is covalently formed on an ITO electrode modified with amine-terminated phosphonic acid. Nonspecifically adsorbed avidin on the hydrophobic sidewalls of CCNT is used to immobilize biotinylated antibody and to reduce the nonspecific binding to CCNT. The biotinylated antimouse IgG bound on avidin and the antimouse IgG conjugated with alkaline phosphatase (ALP) sandwiches a target mouse IgG. ALP catalyzes the conversion of p-aminophenyl phosphate monohydrate into p-aminophenol, which is electrocatalytically oxidized to p-quinone imine on CCNT surface. Moderate electrocatalytic electrode obtained with the combination of CCNT and ITO allows low detection limit (0.1 ng/ mL).
Toxoplasma gondii seroprevalence have been rapidly increasing in some parts of Korea. We analyzed prevalence of anti-Toxoplasma gondii antibodies, using a rapid diagnostic test (RDT), in the sera of 552 residents in Ganghwagun, 661 ones in Cheorwon-gun, and 305 ones in Goseong-gun, Korea in 2019. IgG/IgM RDT mounted with recombinant fragment of major surface antigen (SAG1), glutathione-S-transferase-linker-SAG1A, were applied to the sera. IgG seroprevalence was 28.1% in Ganghwa-gun, 19.5% in Cheorwon-gun and 35.7% in Goseong-gun. Odds ratios comparing Cheorwon vs Ganghwa was 0.63 (P=0.001) and Goesong versus Ganghwa was 1.47 (P=0.01) adjusting age and sex. Goseong had highest seroprevalence among the 3 counties both in crude rates and logistic regression. Although Cheorwon and Goseong are adjacent to the demilitarized zone (DMZ) in Korea, seroprevalence rate was much higher in Goseong. Further investigation on other DMZ-closed areas is necessary whether they have high prevalence rates compared to the other areas. T. gondii prevalence in Korea is still persists; proper health policy should be established.
The initiation of immunoglobulin E (IgE)-mediated allergic reactions requires binding of IgE antibody to its high-affinity receptor. Human basophilic KU812F cells express $Fc{\varepsilon}RI$ on the cell surface and act as effector cells in the allergic response. In this study, we investigated the effects of Scutellaria radix extract on the expression of the $Fc{\varepsilon}RI$ in human KU812F cells. Flow cytometric analysis showed that S. radix extract treatment caused a concentration-dependent decrease in $Fc{\varepsilon}RI$ expression on the cell surface. Furthermore, the level of $Fc{\varepsilon}RI$${\alpha}$, ${\beta}$, and ${\gamma}$ chain mRNA in KU812F cells was examined by RT-PCR. S. radix extract reduced total cellular $Fc{\varepsilon}RI$$\alpha$ and ${\gamma}$ chain mRNA expression in a concentration-dependent manner. $Fc{\varepsilon}RI$-mediated histamine release was reduced from $21.75{\pm}1.34\;ng/10^6$ cells in non-treated cells to $16.46{\pm}1.98\;ng/10^6$ cells in S. radix extract treated cells. These results suggested that S. radix extract has the potential to down-regulate of FcRI expression and to inactivate basophils.
치아우식증을 예방하기 위한 백신연구를 위하여 주원인균인 Sterptococcus mutans 균체항원과 이 균에서 분리한 glucosyltransferase (GTF)를 항원으로 하고 이에 면역조절기능이 있는 retinoic acid (RA)를 첨가하여 투여경로와 백신조성이 이들 항원에 대한 면역반응에 미치는 영향을 실험하였다. 균체항원(Ingbritt strain)을 마우스의 피하에 Complete Freund's Adjuvant와 함께 투여하여 생산되는 혈청내 응집항체가는 serotype e (LM-7)와는 강한 교차반응을 보였으나 serotype f (OMZ-175)와는 거의 교차반응을 일으키지 않았다. 면역혈청내 항-GTF 및 항-Ag I/II 항체중 항-GTF IgA는 피하로 투여시 전혀 검출되지 않았으나 이에 RA를 첨가하면 다량의 항체 생산을 관찰하였고 그 정도는 경구투여시의 생산량을 능가하였다. GTF를 alum과 함께 투여하여 생산되는 혈청내 항-GTF 항체중 IgM은 피하로 투여시 상당량이 검출되었고 RA를 첨가하면 그 생산이 증가되었으며 경구로 투여시 대조군에 비하여 약간증가를 보였으나 피하투여시의 그것에는 미치지 못하였다. GTF-특이 IgG는 경구투여시는 전혀 검출되지 아니하였고, 피하투여시에만 현저한 증가를 보였으며, RA첨가는 이에 영향을 미치지 못하였다. 항-GTF IgA는 피하로 투여시 전혀 검출되지 아니하였으나 이에 RA를 첨가하면 증가된 항체생산을 관찰하였고 그 정도는 경구투여시의 생산량을 능가하였다. 이상의 실험성적은 GTF에 대한 항체생산은 투여경로와 항원의 종류에 따라 다양한 반응을 나타내며 RA는 이를 백신에 첨가하면 피하경로를 이용하여 면역하더라도 경구투여와 유사한 IgA-매개 면역반응으로 조절시킬 수 있는 가능성을 나타내었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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