To establish a system for sperm swim-up separation through sucrose layer, indiscreet sperm migration should sufficiently to block but movement of sperm shouldn't inhibit. Thus, the effects of sucrose levels in sucrose layer, incubation times and types of sucrose layer on sperm separation were examined. And the results obtained were as follows; 1. Layer of 10mM sucrose inhibited sperm swim-up migration through sucrose layer. 2. Incubation for 25 minutes without sucrose layer significantly increased sperm swim-up migration. However, incubation for 10 minutes to induce swim-up through sucrose layer significantly stimulated sperm migration and maintained sperm movement. 3. There was no significant difference between Type I and Type II in barrier effect of sucrose layer. However, sucrose layer of Type II with shorter distance of barrier was efficient for sampling. To elucidate a function of follicular fluid on sperm chemotaxis using in vitro system of sucrose layer of Type II and incubation for 10 minutes, the effects of dilution, heat treatment, and protein and lipid extracts of follicular fluid on sperm swim-up separation were examined. And the results obtained were as follows; 4. Follicular fluid stimulated sperm migration and movement, and significantly-attracted capacitated-sperm at 10% level. 5. Follicular fluid heated at 55$^{\circ}C$ for 30 minutes maintained the effect of follicular fluid stimulating sperm migration and movement. 6. Follicular protein stimulated sperm movement that was reduced by filtration of the protein. 7. Follicular lipid didn't significantly stimulate sperm migration and movement. 8. Both of follicular protein and lipid reduced the effect of follicular fluid stimulating sperm migration and movement. In conclusion, sucrose layer could be used for a barrier against indiscreet sperm migration by swim-up. And follicular fluid stimulated migration and movement of sperm and attracted capacitated-sperm through sucrose layer. Especially, heat-resistant protein of follicular fluid stimulated sperm migration.
To make up the medium for quantitative selection of capacitated-sperm through sucrose layer, the effects of BSA, caffeine, heparin and progesterone on sperm swim-up migration and movement were examined. And the results obtained were as follows; 1. BSA of 4mg/ml in bMSS stimulated sperm migration and movement, and attracted capacitated-sperm. 2. Caffeine of 5mM in bMSS containing 4mg/ml BSA stimulated sperm movement and attracted capacitated-sperm. 3. Heparin of 20$\mu\textrm{g}$/ml in bMAA containing both 4mg/ml BSA and 5mM caffeine stimulated movement and capacitation of sperm. 4. Progesterone of 50$\mu\textrm{g}$/ml in bMSS containing all 4mg/ml BSA, 5mM caffeine and 20$\mu\textrm{g}$/ml heparin (BCHP-MSS) attracted capacitated-sperm. 5. Effect of BCHP-MSS on sperm on sperm attraction was not different from effect of 10% follicular fluid solution (FF-MSS) on sperm swim-up separation. In conclusion, bMSS with 4mg/ml BSA, 5mM caffeine, 20$\mu\textrm{g}$/ml heparin and 50$\mu\textrm{g}$/ml progesterone(BCHP-MSS) was a optimal condition for selection of capacitated-sperm through sucrose layer.
Statement of problem: Streptococcus produces energy and forms extracellular polysaccharides by metabolizing sucrose. Insoluble glucan, a kind of extracellular polysaccharide, is the important material of dental plaque. Fructose affects the metabolism of sucrose. Purpose: The purpose of this study was to evaluate the effect of fructose on the metabolism of sucrose in Streptococcus mutans. Materials and methods: To determine the effect of fructose on the formation of artificial plaque by Streptococcus mutans Ingbritt, S. mutans and fructose were placed in beakers containing M17 broth and sucrose. The wires were hung on frameworks inserted into cork stoppers, and then immersed in each of the beakers. After the incubation with gentle shaking, each wire was weighed. To analyze the effect of fructose on the sucrose metabolism by S. mutans or glucosyltransferase, S. mutans and fructose were placed in M17 broth containing sucrose. After the incubation. the remaining sucrose and polymers were analysed by thin layer chromatography. Results: The following results were obtained; 1. When Streptococcus mutans was cultured in the media containing 3% sucrose for 8 hours, the mean weight of formed artificial plaque on the wires was $124.3{\pm}3.0mg$, whereas being reduced to $20.7{\pm}10.2mg$ in the media added with 3% sucrose and 4% fructose(p<0.05) 2. When the control containing glucose was added with sucrose, the optical density of Streptococcus mutans solution cultured for 24 hours was not increased compared with the control, while being increased by adding with fructose. 3. When Streptococcus mutans was incubated in the media added with sucrose and fructose for 8 hours, the number of viable cells was increased compared with the media added with sucrose. 4. The amount of remained sucrose was increased in Streptococcus mutans culture supernatant of media added with sucrose and fructose than with sucrose only. but the amount of produced insoluble glucan was decreased. 5. The amounts of remained sucrose and produced soluble glucan were increased in the culture of glucosyltransferase-contained media added with sucrose and fructose than with sucrose only, but the amount of produced insoluble glucan was decreased . Conclusion: These results indicated that the sucrose metabolism and the production of insoluble glucan were inhibited in Streptococcus mutans by adding fructose in the media containing sucrose.
A study was conducted on the conversion of starch in sweet potatoes to sugar by the amylolytic enzymes during baking. Sugars were extracted with ethanol from the raw and baked sweet potatoes at the temperature of $55{\sim}57$, $70{\sim}75$, and $90{\sim}95^{\circ}C$. The individual sugars in the extracts was identified by thin-layer chromatography- and the individual sugar content was determined by high -performance liquid chromatographic analysis. Sugars identified from the raw and baked sweet potatoes at the temperature of $55{\sim}57^{\circ}C$ are glucose, fructose, and sucrose. Sucrose, maltose, glucose, and fructose were identified is the baked sweet potatoes at tile temperature of $70{\sim}75$ and $90{\sim}95^{\circ}C$. There was no significant increase in glucose, fructose and sucrose content during baking. Maltose was formed only above the gelatinization temperature.
Among proteins separated from methanol extract of follicular fluid with superose column, the components inducing sperm swim-up separation through sucrose layer were analysed with superose column in Smart system and SDS-PAGE. And the results obtained were as follows; The fractions of retention volume (RV) 0.83ml and RV 1.36ml separated with superose column should stimulate sperm migration and movement. However, RV 0.83 fraction was consisted of complex materials containing RV 1.36 component. RV 1.36 fraction contained a BSA analogue of 67 kilodaltons (Kd) and showed identical peak pattern with BSA fraction V. In conclusion, the protein of 67 Kd in follicular fluid should stimulate sperm migration and movement.
Some physicochemical properties of sugary rices were comparatively analyzed with the original cultivars, using Hwachung su-1, su-2, and Nampung su lines bred in Seoul Nat'l Univ., and EM 5 bred in Kyushu Univ. Sugary rice grains were smaller in width and thickness, and the relative dry weight of 1000 grains of sugary rices ranged from 49% to 72%, compared to normal ones. No distinct starch granules were found in endosperm of sugary rices exposured by SEM, with structural variations between Hwachung su-1 and su-2 lines. Sugary rices showed the significant increases in sucrose, glucose and fructose content, especially much higher in sucrose content showing 5.84-8.79%, in comparison with the normal ones, 1.11∼2.65%. However, sucrose and total sugar content varied within sugary lines carrying the same sugary gene, and were significantly lower in Hwachung su-2. Sugary rices, except Hwachung su-1, showed the same or lower ADV and harder gel characteristics, compared to normal ones. Protein and lipid content were much higher in sugary rices, due to the increased relative proportion of aleurone layer in brown rice caused by thicker aleurone layer than in normal rices and the reduction of endosperm part. However, there were no remarkable changes in amino acid and fatty acid compositions.
This study was carried out to elucidate the effect of progesterone, estradiol 17 beta and cholesterol in follicular fluid on sperm chemotaxis for fertilization. By inducing swim-up migration through sucrose layer into bMSS containing progesterone, estradiol 17 beta and/or cholesterol, their effects on sperm migration and sperm movement were examined. And the results obtained were as follows; 1. Progesterone inhibited sperm migration and movement, but significantly attracted capacitated-sperm at the level of 50 $\mu$g/ml. 2. Estradiol 17 beta inhibited sperm migration and movement, but didn't significantly inhibit migration of capacitated-sperm at the level of 10$\mu$g/ml. 3. Cholesterol significantly stimulated sperm migration and movement at the level of 50$\mu$g/ml, but didn't attact capacitated-sperm. 4. Progesterone and estradiol 17 beta reduced the effect of cholesterol stimulating sperm migration and movement. But estradiol 17 beta and cholesterol didn't reduce the effect of progesterone attracting capacitated-sperm. In conclusion, progesterone of 50$\mu$g/ml in bMSS attracted the capacitated-sperm, cholesterol of 50$\mu$g/ml stimulated sperm migration and movement, but estradiol 17 beta of 10$\mu$g/ml didn't affect sperm swim-up separation.
This study was conducted to examine the effect of emulsifiers on the quality characteristics of Yackwa. Lecithin and various sucrose fatty acid esters (S-570, S-970, S-1570) were used as emulsifiers. The addition of emulsifiers to Yackwa decreased the hardness, cohesiveness, springiness and gumminess, but increased the brittleness. This tendency was most distinct by the addition of S-970. All sensory characteristics of Yackwa such as color, smooth surface, smell, internal layer formation, softness and overall quality, were improved greatly by the addition of emulsifiers. As a result, the mechanical and sensory characteristics of Yackwa were improved by the addition of the emulsifiers, and sucrose fatty acid esters showed better results than lecithin.
Plasma membrane proteins of a Korean isolate of Trichomonus vofinalis HY-1 were fractionated for antigen analysis. Homogenates of T. vaginalis were fractionated by the differential centrifugation using sucrose step-gradient method. The interface layer from the 25%/45% sucrose was collected as a plasma membrane fraction and its purity was examined by transmission electron microscopy. The antigenicity of plasma membrane fraction was analysed by enzyme-linked immunoelectrotransfer blot technique with immune rabbit serum and compared with surface antigen labelled with N. hydroxysuccinimide-biotin. The fluffy fraction of 25%/45% sucrose interface was homogeneous and membrane particles were present as extended sheet and concentric vesicles showing typical trilamellar appearance under transmission electron microscope. Seven fractions at 40, 50, 60, 110, 130, 140 and 150 kDa were identified as the antigenic membrane proteins in EITB with anti HY-1 rabbit serum. The common band at 60 kDa was detected both in antigenic fractions of plasma membrane and surface protein labelled with NHS-biotin. This result indicates that this protein is considered as a major surface antigen of T. vaginalis. The role of this surface antigen at 60 kDa should be studied further.
The influence of various levels of major medium components such as sucrose, nitrate, phosphate, plant growth regulators, and light intensity for cell growth and the production of anthocyanin content in cell cultures of Populus alba ${\times}$ P. glandulosa were investigated. Best results for anthocyanin yield were obtained using Murashige and Skoog(MS) medium containing 5% sucrose, 12.5% nitrate, 200% phosphate, 1.0mg/l indole-3-acetic acid(IAA), 1.0mg/l benaylaminopurine(BAP), and continuous illumination of 7,000 lux. On the other hand, maximum cell growth was achieved with 5% sucrose, 50% nitrate above 400% phosphate compare with that of MS basal mediumi, and 0.5mg/l 2, 4-dichlorophenoxyacetic acid(2, 4-D). Anthocyanin accumulation in a suspension cultured cells of given genotype was stimulated by subculturing onto the medium lacking 2, 4-D. Pigmented cell clusters were extracted with methanol containing 1% hydrochloric acid (HCl) and then anthocyanin was identified by thin layer chromatography (TLC) and U. V. spectrophotometer.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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