Kim, Ah Hyeong;Kim, Seon Bo;Han, Ki Don;Kim, Heung Tae
The Korean Journal of Pesticide Science
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v.18
no.3
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pp.161-167
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2014
This study was conducted to investigate the resistance of Botrytis cinerea to azoxystrobin, which belongs to strobilurin fungicides. The sensitivity of B. cinerea isolates, which were collected from infected pepper, strawberry, cucumber and tomato by a single spore isolation, to the fungicide was tested through a agar dilution method on PDA amended with fungicides and $100{\mu}g\;mL^{-1}$ of salicylhydroxamic acid (SHAM). All isolates of B. cinerea tested in this study were classified as a sensitive and a resistant group by $1.0{\mu}g\;mL^{-1}$ of $EC_{50}$ value to azoxystrobin. While the sensitive isolates accounted for 46.5% of B. cinerea population, the resistant ones did for 53.5%. According to the regions isolating B. cinerea, the highest isolation frequency was showed as 81.1% in Chungnam among the all. Among 4 host plants as pepper, strawberry, cucumber and tomato, the highest isolation frequency was obtained in strawberry, while the lowest was done in pepper. The isolate resistant to azoxystrobin showed the cross resistance to other fungicides included into strobilurins as kresoxim-methyl and trifloxystrobin. In spite of an excellent efficacy of strobilurins, it should be taken care to use them in the field, because of the high risk in the fields.
For the effective control of pepper anthracnose, in vitro antifungal activities of 13 commercial fungicides were tested on spore germination, mycelial growth, and sporulation of Colletotrichum gloeosporioides, anthracnose fungus. Among them, captan, chlorothalonil, dithianon, fluazinam and folpet completely inhibited the spore germination of C. gloeosporioides at the concentration of 0.8 ${\mu}g/ml$. They were followed by mancozeb and propineb, showing more than 80% inhibition of spore germination at 20 ${\mu}g/ml$. The mycelial growth of C. gloeosporioides was strongly inhibited by fluazinam and nuarimol. Except for nuarimol, most of the fungicides represented more antifungal activity on the spore germination than the mycelial growth of C. gloeosporioides. Azoxystrobin and metominostrobin, Strobilurin fungicides, were only moderately active against the spore germination and the mycelial growth of C. gloeosporioides, but they were effective antisporulant against C. gloeosporioides. From these results, control of pepper anthracnose will have achieved by preventive spray of the commercial fungicides.
To obtain protoplasts of Colletotrichum acutatum JC24, conidia were inoculated onto cellophane membrane placed on PDA and incubated at $25^{\circ}C$ for 20 hrs under the dark condition. Cellophane membranes, where mycelia were incubated, were soaked into 2% lysing enzyme solution prepared with 0.02 M phosphate buffer (pH 7.0) including 1.2 M sorbitiol. After treatment in 2% enzyme solution for 2 - 3 hrs, it could be possible to harvest $2-3\;{\times}\;10^6$ protoplasts/mL. The effect of several fungicides on reversion ratio was determined by using the protoplasts obtained from C. acutatum JC24. Any protoplasts could not be reversed to mycelia on reversion PDA amended with $10\;{\mu}\;g\;mL^{-1}$ of propineb. With tebuconazole, inhibition ratio of protoplast reversion was 100 and 0.9% at 0.5 and $0.1\;{\mu}\;g\;mL^{-1}$, respectively, while inhibitory effect on mycelial growth was 85.1 and 75.7%. The inhibitory tendency of carbendazim on protoplast reversion was as same as mycelial growth. In the case of strobilurins, trifloxystrobin and kresoxim-methyl, they only could inhibit protoplast reversion of C. acutatum JC24, when salicylhydroxamic acid (SHAM) was amended into reversion PDA with strobilurins.
KNF-1002, a new fungicide candidate, is very effective for protecting crops against plant diseases, but its curative activity against barley powdery mildew is negligible due to its weak penetrability into plant leaf. To select the most efficient activator and, at the same time, spreade-sticker, foliar uptake and deposit of aqueous spray formulations containing non-ionic or anionic surfactants and fatty acid alkyl esters as an adjuvant were assessed by using Congo Red method. In the absence of activator, only 0.1% of the applied active ingredient was absorbed by barley leaves 24 h after spraying with an aqueous acetone containing KNF-1002 100 mg/L. But, non-ionic surfactants (500 mg/L), such as heptaethylene glycol monooctadecenyl ether (OE-7), dodecaethylene glycol monohexadecyl ether (CE-12), so facilitated KNF-1002 uptake that the uptake was increased up to 48.5%. To wheat plant, the addition of surfactants in spray solution of KNF-1002 also increased the foliar uptake and deposition of active ingredient, but its efficiency varied according to the kind of fatty alcohol moiety of polyoxyethylene surfactant. KNF-1002 formulations containing nonaethylene glycol monododecyl ether (LE-9) as an activator and spreader-sticker showed remarkable increases of fungicidal activity against barley powdery mildew.
Park, Eun-Jeong;Lee, Ju-Hee;Kim, Tae-Hwa;Kim, Jang-Eok
Korean Journal of Environmental Agriculture
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v.28
no.3
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pp.281-288
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2009
The strobilurin fungicides, azoxystrobin and kresoxim-methyl, were investigated to know the biological half-lives and dissipation patterns in Korean melon under plastic film house condition. Used pesticides for field application were 20% azoxystrobin of suspension concentrate and 47% kresoxim-methyl of water dispersible granule. Two pesticides were sprayed at recommended and double dose rate. Pesticide residues in Korean melon were analyzed until 14 days after application. The azoxystrobin was analyzed by HPLC equipped with UV detector after cleanup with florisil glass column. Initial residue concentrations of azoxystrobin in Korean melon at recommended and double dose rate were 0.09 mg/kg and 0.14 mg/kg, respectively. Those were less than 0.2 mg/kg maximum residue limit of Korean melon established by KFDA. The biological half-lives of azoxystrobin in Korean melon were 4.7 days at recommended dose rate and 7.8 days at double dose rate. Initial concentrations of kresoxim-methyl which was analyzed by GLC-ECD in Korean melon at recommended and double dose rate were 0.10 mg/kg and 0.23 mg/kg, respectively. Those were less than 1.0 mg/kg, MRL. The biological half-lives of kresoxim-methyl in Korean melon were 4.1 days at recommended dose rate and 4.8 days at double dose rate. The residue amounts of both pesticide was lower than MRL and biological half-lives were not so long. Because the weight of Korean melon under plastic film house condition was fast increased during cultivation.
Colletotrichum acutatum s. lat. 20JDS8 sensitive and 20CDJ6 resistant to pylaclostrobin were used to investigate the cross-resistance with fungicides belonging to the strobilurins and the characteristics of fungicidal controlling activities with different mechanisms against the isolate resistant to the fungicide. The resistant isolate of 20CDJ6 also showed the resistance to azoxystrobin, trifloxystrobin, and kresoxim-methyl, suggesting that there is a cross-resistance relationship. All fungicides with different action mechanisms inhibited mycelial growth of both susceptible and resistant isolates of C. acutatum s. lat., but their disease control effects in fruits were different according to the fungicides. The disease control effect of isopyrazam against 20JDS8 and 20CDJ6 was very low, and fluazinam showed a control effect of 91.9% and 88.1% against 20JDS8 and 20CDJ6 only when it was treated before inoculation by spraying spore suspensions on pepper fruits without wounds. Tebuconazole and prochloraz effectively inhibited not only the mycelial growth of 20JDS8 and 20CDJ6 on potato dextrose agar medium, but also disease incidence in red pepper fruits. As a result of this study, C. acutatum s. lat. 20CDJ6 resistant to pyraclostrobin showed cross-resistance with other strobilurin fungicides. In addition, we think that fluazinam, tebuconazole, and prochloraz can be recommended as alternative fungicides for the control of red-pepper pyranthracnose pathogens resistant pyraclostrobin. However, fluazinam can be effective only if it is treated protectively before the occurrence of the disease.
Resazurin-based microtiter assay was used to evaluate the inhibitory effect of fungicides on the respiration of Colletotrichum acutatum s. lat. 20JDS8 sensitive and 20CDJ6 resistant to strobilurin fungicides. The spores of C. acutatum s. lat. 20JDS8 were inoculated into potato dextrose broth (PDB) at densities of 1x104, 1x105 and 1x106 spores/ml, respectively. The relative fluorescence unit (RFU) of all treatments inoculated at each spore density started to rise after 12 hr of incubation, and were 1,965.5, 5,412.5, and 10,061.0, respectively, after 24 hr of incubation. To evaluate the inhibitory effect of fungicide on the respiration of the pathogen, the spores of the pathogen were inoculated into the PDB and treated with the fungicides 0, 6, 12, and 24 hr after incubation, respectively. After keeping the pathogen culturing for another 24 hr, PrestoBlue reagent was treated into the PDB culturing the pathogen. The RFU of each treatment was examined 1 hr after the reagent was treated. When dithianon, isopyrazam, pyraclostrobin, and fluazinam were treated at high concentrations in the stages of spores (immediately after inoculation [0 hr]), spore germination (after incubation for 6 hr), and hyphal growth (after incubation for 12 hr), the respiration of pathogens was inhibited by 90-100%. When the fungicides were treated after culturing the pathogen for 24 hr, the respiratory inhibitory effects were greatly reduced. With pyraclostrobin-resistant C. acutatum s. lat. 20CDJ6, azxoystrobin, trifloxystrobin and kresoxim-methyl, which have the same mode of action, had very little or no respiratory inhibitory effect in all growth stages of pathogens. Based on the above results, it was thought that the resazurin-based microtiter assay could quickly and accurately evaluate the inhibitory efficacy of the fungicides that inhibited respiration.
Fungicides including keroxym-methyl (strobilurin fungicide), fenarimol and trifulmizole (DMI, boscalid (anilide) and metrafenone (benzophenone) were evaluated for preventive and curative efficacies against powdery mildew on oriental melon. The fungicides were applied preventatively at 7 days, 3 days and 3 hours before inoculation. Curative applications were made by applying fungicides three times at the interval of one week when infected leaves by powdery mildew were about 16% or 30%. Then preventative and curative efficacies were evaluated one week after inoculation and final application, respectively. Boscalid and metrafenone showed preventive efficacies of 74.3 and 68.3% against powdery mildew development respectively, when treated at 7 days before inoculation. They showed 89.4 and 87.2% efficacies when treated at 3 days before iniculation and 98.5 and 93.2% at 3 hours before inoculation respectively. However, there were no preventive efficacies in kresoxym-methyl, triflumizole and femarimol (DMI fungicides) when trebled at both 7 and 3 days before inoculation. At the preventive treatment 3 hours before inoculation, they indicated 59.0, 42.5, and 37.2% efficacies, respectively. When leaves were infected about 30% by powdery mildew, curative application of boscalid and metrafenone showed 85.9 and 74.0% of efficacies, respectively. Curative efficacies of kresoxym-methyl, tiflumizole and fernarimol were 5.5, 23.0 and 46.7% respectively. When leaves were infected about 16%, curative application of boscalid and metrafenone showed 100 and 97.5% of efficacies, respectively. However, the triflumizole and fernarimol showed relatively low curative efficacies of 30.8 and 51.6%, respectively. Microscopic observation of mycelial growth and conidia formation after detection of powdery mildew disease indicated lysis of mycelium and these lysis suppression of conidia formation showed tendency in accordance with curative efficacies of fungicides.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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