• 생명과학회지
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• 제28권9호
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• pp.1118-1126
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• 2018

본 논문은 양식 어류에게 많은 경제적 피해를 입히고 있는 다양한 어류질병세균 중에서 연쇄구균증에 대한 일반적인 특성과 종류, 진단 방법에 대하여 기존에 연구 보고된 논문을 기반으로 알아보고자 한다. 대표적인 어류연쇄구균증의 원인체로는 Lactococcus garvieae, Streptococcus iniae, S. parauberis가 있다. 연쇄구균증에 감염 시 나타나는 증상으로는 체색변화, 안구이상, 아가미 퇴색, 출혈, 복부팽만, 신장과 비장의 종대 등의 보이다 폐사가 일어난다. 또한 수온이 상승하는 6월부터 10월까지 주로 일어나며 집단적으로 발병하여 폐사가 일어난다. 현재 연쇄구균증을 진단하기 위한 기술로는 16S rRNA, 16S-23S rRNA intergenic spacer region (ISR), Random Amplified polymorphic DNA (RAPD), Ribotyion (RT), Loop-mediated isothermal amplification (LAMP) 등이 있다. 이중에서 현장에서 적용 가능성이 높은 LAMP법이 각광을 받고 있지만 결과 확인 등의 문제로 인하여 현재는 어려움을 겪고 있는 실정이다. 이에 현장에서 진단부터 결과 확인까지 손쉽게 사용할 수 있도록 문제점을 보완하면 연쇄구균증에 대한 경제적 손실을 최소화 할 것으로 사료된다.

• 한국해양생명과학회지
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• 제5권1호
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• pp.1-8
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• 2020

본 내용은 최근 국내 양식 넙치에서 발생하는 연쇄구균병에 관하여 정리한 내용으로, 주요 균종은 Streptococcus iniae, S. parauberis 그리고 Lactococcus garvieae이다. 최근 발생경향은 지금까지 보고된 내용과 2002년에서 2017년 사이에 국립수산과학원 균주은행의 기탁균주에 대한 정보를 기초자료로 검토하였다. S. iniae와 L. garvieae는 계속 검출빈도가 줄어들었고, 균주은행 기탁균주의 경우에도 두 균주 각각 2012년과 2002년 이후로 기탁 건수가 없었다. 최근 양식 넙치에서 우점적으로 분리되는 연쇄구균병의 원인세균은 S. parauberis이다. 또한 육안적 증상과 병리조직학적 변화를 함께 비교·검토하였는데, S. iniae 감염에서는 안구백탁, 출혈, 장염 그리고 복수저류가, S. parauberis 감염에서는 체색흑화, 심외막염이 주요증상이다. L. garvieae 감염은 연쇄구균병에서 나타나는 증상이 공통적으로 나타나지만, 독성은 다른 두 종의 증상과 비교하여 약한 것으로 판단되었다. 병리조직학적 증상은 급성인지 만성인지에 따라 내부 장기별로 변성진행에 차이를 나타내지만 육안적으로 관찰되는 주요증상이 조직학적 소견에 반영된다.

• 한국어병학회지
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• 제17권2호
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• pp.91-98
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• 2004

본 연구의 목적은 국내 어류 연쇄구균증 병원체 동정에 있어서 Streptococcus iniae에 대한 구체적인 국내 연구 보고가 없어, 기존에 수행되고 있는 동정방법을 근간으로 16S-23S intergenic spacer region (ISR)의 염기서열을 분석하여 보다 명확한 동정을 실시하고자 하였다. API 20 strep system에 의한 생화학적 성상을 분석해본 결과 정확한 종 동정은 이루어지지 않았지만 기존의 연구에서 보고된 API 20 strep system에 의한 S. iniae의 생화학적 성상과 높은 유사성을 보이는 10균주를 분리할 수 있었다. S. iniae 16S rRNA gene 서열 유래 종 특이적 primer Sin-1 5'-CTAGAGTACACATGTACT(AGCT)AAG-3'와 Sin-2 5'-GGATTTTC CACTCCCATTAC-3'에 의한 PCR-assay 결과 시험균주 10 균주 모두 동일하게 약 300bp의 증폭산물이 관찰되었고, 비 특이적인 반응은 관찰되지 않았다. 시험균주 모두 3개의 16S-23S ISR operon 구조가 관찰되었으나 S. iniae 표준균주 (KCTC 3657)의 경우 단일 구조가 관찰되었다. 16S-23S intergenic spacer region (ISR)의 염기서열을 분석해본 결과 기존에 보고된 S. iniae (Genbank accession number AF 048773)와 96%의 상동성을 보였으며 전체서열에서 상동성을 보이는 근연종이나 근연속은 검색되지 않아 최종적으로 S. iniae로 동정하였다.

• 한국생물공학회:학술대회논문집
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• 한국생물공학회 2005년도 생물공학의 동향(XVII)
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• pp.899-903
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• 2005

Two infectious species of Streptococcosis pathogens were detected by multiplex PCR assay. Detection rates of Streptococcus iniae and S. parauberis could reach 44.9% and 55.1% respectively for one year during 2004 to 2005 in Jeju island. These findings showed that S. parauberis strains were important pathogen with streptococcosis of olive flounder in Jeju island. These findings showed that S. parauberis strains were important pathogen with streptococcosis of olive flounder in Jeiu island. In the present study we have investigated the interspecific relationship of all Jeju area of S. parauberis by RAPD analysis. Represent strains divided to four groups by RAPD fingerprints. The important differences observed between the olive flounder isolates suggest that they could constitute a well-differentiated group or a separate clonal line within this bacterial species. Though, serological research of S. parauberis strains in Jeju island not exist yet. These strains doing the serological evolution.

• 미생물학회지
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• 제42권3호
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• pp.199-204
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• 2006

제주지역 양식넙치의 주요 세균성 질병의 일종인 연쇄구균증 발병동향과 특성을 분석하였다. 제주지역 양식넙치의 연쇄구균증은 연중 발생하는 양상을 보였으나 상대적으로 고수온기에 발생율이 높았으며, 30cm 이상의 개체에서 주로 관찰되었다. 2003년 6월부터 2005년 5월 사이에 분리된 연쇄구균 균주를 multiplex PCR assay 기법을 이용하여 종 조성을 분리한 결과 Streptococcus iniae와 S. parauberis로 동정되었으며 그 비율은 각각 46%와 54%이었다. S. iniae는 상대적으로 9월과 10월에 높은 분리율을 나타내었으나 S. parauberissms 3월과 4월에 분리율이 높게 나타났다. S. iniae와 S. parauberis 감염개체의 병리학적 중상은 일부분 유사하였으나 S. iniae 분리개체는 복부팽만, 탈장, 복수저류증상이 주로 관찰되는 반면, S. parauberis 분리개체는 체색흑화, 무안측 발적 중상이 두드러지게 관찰되었다. 이 두 종의 병원체 모두 ampicillin과 amoxicillin에 감수성이 높았으며, S. iniae 균주들은 S. parauberis 균주들보다 상대적으로 doxycycline, erythromycin, oxytetracycline에 감수성이 높았다.

• 한국어병학회지
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• 제28권1호
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• pp.9-15
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• 2015

The potential of Streptococcus iniae glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (GAPDH) as an antigen for a subunit vaccine was investigated using a zebrafish model. The recombinant S. iniae GAPDH was purified using His-tag column chromatography, and antisera against the recombinant GAPDH (rGAPDH) were produced by intraperitoneal immunization of rats. By immunization with S. iniae rGAPDH, the survival rates of zebrafish against an S. iniae challenge increased, suggesting that GAPDH would be an antigen capable of inducing protective immune responses in fish. Furthermore, we demonstrated using Western blotting, that the antisera against rGAPDH of S. iniae had cross-reactivity with GAPDH from Streptococcus parauberis and Lactococcus garviae, which are also culprits of streptococcosis in cultured fish in Korea. These results suggest that S. iniae GAPDH may be used as an antigen for the development of a subunit vaccine against streptococcosis caused by diverse cocci in cultured fish.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제28권9호
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• pp.1433-1442
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• 2018

To identify and quantify the effects of a combination of dietary $1{\times}10^8CFU/g$ Lactococcus lactis subsp. lactis I2 ($LI_2$) and 0.1% ${\beta}$-glucooligosaccharides (BGO) on the growth and immunity of olive flounder (Paralichthys olivaceus), a feeding experiment was conducted. Flounder ($14{\pm}0.5g$) were divided into two groups and fed control and synbiotic feeds for 8 weeks. Investigations were carried out on growth and feed utilization, innate immunity, serum biochemical parameters, intestinal lactic acid bacterial (LAB) viability, microvillus length, and changes in the expression levels of genes encoding pro-inflammatory cytokines (tumor necrosis factor $[TNF]-{\alpha}$, interleukin $[IL]-1{\beta}$, and IL-6). Results demonstrated the synbiotic diet had significantly better (p < 0.05) responses in terms of weight gain and specific growth rate, three innate immune parameters (respiratory burst, serum lysozyme, and superoxide dismutase), intestinal LAB viability, and the relative $TNF-{\alpha}$ expression level (p < 0.05). Moreover, after challenge with Streptococcus iniae ($1{\times}10^8CFU/ml$), the synbiotically fed group exhibited significantly higher (p < 0.05) protection against streptococcosis, validating the observed changes in immune parameters and induction of the cytokine-encoding gene. Therefore, according to the results of the present study, synbiotic feed ($LI_2+BGO$) increased growth, modulated innate immune parameters and protected olive flounder against streptococcosis.

• 한국어병학회지
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• 제27권1호
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• pp.77-83
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• 2014

2012년 5월에서 10월 사이에 우리나라 넙치 육상 양식장을 대상으로 폐사 피해 및 수산생물용 의약품 사용량을 전수 탐문조사와 표본 정밀조사의 형태로 진행하였다. 조사는 해당 양식장과 거래하고 있거나 관계를 맺고 있는 전국의 수산질병관리사 조사요원의 직접 현장 방문을 통한 면접과 표준 매뉴얼을 통한 진단을 통하여 실시하였다. 전국 565개의 넙치 육상 양식장을 대상으로 한 탐문 전수조사에서 해당기간 동안의 피해율은 27.18%로 집계되었고, 표본 60개소의 총 피해율은 25.50%로 나타났다. 표본조사의 피해율 조사가 $95{\pm}10%$ 이내의 신뢰성이 있는 것으로 확인되었다. 피해원인 별로는 탐문조사 및 표본조사에서 모두 스쿠티카병, 자연감모, 연쇄구균병, VHS, 선별도태, 비브리오병, 활주세균병 등의 원인이 높은 피해율을 보이는 것으로 집계되었다. 피해 중량과 피해금액을 봤을 때는 고체중의 넙치에서 발생한 비감염성 원인에 의한 폐사피해 및 연쇄구균증이 매우 높은 피해율을 보여주었다. 표본조사에서 수산생물용의약품의 사용량을 조사한 결과, 가장 많이 사용되었던 의약품은 스쿠티카병 치료목적의 formalin 약욕제제인 것으로 나타났고, 항균 항생물질로는 연쇄구균병의 치료목적으로 사용되는 amoxicillin, florfenicol과 광범위 항균작용을 기대하는 oxytetracycline, neomycin 등의 사용량이 높았다.

• 한국수산과학회지
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• 제52권4호
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• pp.382-388
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• 2019

Streptococcosis caused by Streptococcus parauberis is a very important disease in farmed olive flounder Paralichthys olivaceus. For most fish pathogens, including S. parauberis, there are no analytical criteria to distinguish antibioticsusceptible strains from antibiotic-resistant strains. In this study, epidemiological cut-off ($CO_{WT}$) values were generated to classify 75 strains of S. parauberis isolated from 1999 to 2018 as wild type (WT) and non-wild type (NWT) using disc diffusion data and normalized resistance interpretation (NRI) analysis. The susceptibility of the isolates to 16 antibiotics was evaluated using CLSI guideline M42-A. The wild-type cut-off values for amoxicillin, erythromycin, oxytetracycline, and florfenicol for S. parauberis were ${\geq}35$, 31, 28, and 27 mm, respectively. The NWT ratios of S. parauberis strains to treatment with GEN, FFC, ENR, SXT, EFT, VAN, and CHL were 17% or less, indicating that these antibiotics may be used to treat streptococcosis caused by S. parauberis. For recent S. parauberis isolates, the NWT ratios for AMX, ERY, OTC and FFC are much higher than for strains isolated from 1999-2007. The $CO_{WT}$ data from this study will assist aquatic animal disease professionals in prescribing appropriate antibiotics for the treatment of streptococcosis caused by S. parauberis, which will help reduce the misuse and abuse of antibiotics in the aquaculture sector.

• 한국어병학회지
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• 제33권2호
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• pp.119-125
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• 2020

2013년부터 2020년까지 제주지역 양식 넙치로 부터 연쇄구균 470 균주를 분리하였다. 분리된 균주를 대상으로 multiplex PCR방법을 이용한 종 동정결과 S. iniae가 92균주(19.6%), S. parauberis가 378균주(80.4%)로 조사되었다. 연도별 경향을 보면 2003년에는 S. iniae와 S. parauberis 분리비율이 각각 56.9%와 43.1%로 조사되었으나 이후 지속적으로 S. iniae의 분리율이 감소하고 S. parauberis 분리율이 증가하기 시작하여 2015년부터는 전체 분리주가 모두 S. parauberis로 확인되었다. S. parauberis로 동정된 균주들에 대하여 PCR을 통한 serotype 분석 결과 subserotype Ia 34.9%, subserotype Ib/Ic 46.3%, serotype II 18.8% 순으로 조사되었다. S. parauberis에 대한 serotype 분포변화 조사 결과에서는 2003년과 2004년에는 serotype II가 각각 59.1%, 50.0%로 가장 많았으나, 2005년부터 2009년 사이에는 subserotype Ib/Ic가 가장 많았으며(각각 57.6%, 86.0%, 84.6%, 57.9%, 83.3%), 2010년부터 이후에는 2015년을 제외하고는 subserotype Ia가 가장 높은 비율로 분리되었고, 최근 3년(2018년부터 2020년)동안을 보면 subserotype Ia가 가장 많은 약 70% 내외이며, subserotype Ib/Ic가 약 16~30%, serotype II는 2018년에는 분리되지 않았으나 2019년과 2020년에 각각 3.4%와 16.7%로 다시 증가하는 경향을 보였다. 넙치의 연쇄구균병은 성어에 발생하여 큰 경제적 피해를 유발하므로 이에 대한 대책연구를 위해서는 지속적인 모니터링 연구가 필요하다고 생각된다.