Induction of systemic acquired resistance (SAR) against phytophthora blight and pathogenesis-related (PR) protein accumulation by TMV infection in pepper plant (Capsicum annuum cv. Nockwang) were examined to understand the mechanism of the systemic acquired resistance in pepper plant. The zoospore suspension of Phytophthora capsici was inoculated on stem of pepper plant in which TMV-pepper strain had been inoculated on fully expanded upper leaves, and thephytopha blight incidence was examined. Both disease severity and lesion length of phytophthora blight were much smaller in TMV pre-inoculated pepper plant than in uninoculated control plants. The phytophthora blight incidence was decreased about 50% in the TMV pre-inoculated pepper, compared to the uninoculated control plant at 10 days after P. capsici inoculation. Accumulation of PR1 and PR5 proteins in intercellular fluid of TMV-inoculated and uninoculated upper leaves were monitored by immuno-blot with tobacco P1b and PR5a, antibody during induction of SAR. PR1 and PR5 were detected from 24 hours after TMV inoculation in both TMV-inoculated and uninouclated upper leaves, and increased rapidly in TMV-inoculation in uninoculated upper leaves were defoliated. PR5 could be detected upto 20 days after TMV inoculation in uninoculated upper leaves. These results suggest that TMV infection induces SAR against phytophthora blight in pepper plant, and that PR proteins are accumulated very rapidly during induction of SAR and maintained for quite long time in pepper plant.
Earthquakes occur as a cluster in many regions around the world where complex fault systems exist. The repeated shaking usually induces accumulative damage to affected structures. Damage accumulation in structural systems increases their level of degradation in stiffness and also reduces their strength. Many existing analytical tools of modeling RC structures lack the salient damage features that account for stiffness and strength degradation resulting from repeated earthquake loading. Therefore, these tools are inadequate to study the response of structures in regions prone to multiple earthquakes hazard. The objective of this paper is twofold: (a) develop a tool that contains appropriate damage features for the numerical analysis of RC structures subjected to more than one earthquake; and (b) conduct a parametric study that investigates the effects of multiple earthquakes on the response of RC moment resisting frame systems. For this purpose, macroscopic constitutive models of concrete and steel materials that contain the aforementioned damage features and are capable of accurately capturing materials degrading behavior, are selected and implemented into fiber-based finite element software. Furthermore, finite element models that utilize the implemented concrete and steel stress-strain hysteresis are developed. The models are then subjected to selected sets of earthquake sequences. The results presented in this study clearly indicate that the response of degrading structural systems is appreciably influenced by strong-motion sequences in a manner that cannot be predicted from simple analysis. It also confirms that the effects of multiple earthquakes on earthquake safety can be very considerable.
Microalgae are attracting much attention as promising, eco-friendly producers of bioenergy due to their fast growth, absorption of carbon dioxide from the atmosphere, and production capacity in wastewater and salt water. However, microalgae can only accumulate large quantities of lipid in abiotic stress, which reduces productivity by decreasing cell growth. In this study, the strategy was investigated to increase cell viability and lipid production by overexpressing S-adenosylmethionine (SAM) synthetase (SAMS) in the microalga Chlamydomonas reinhardtii. SAM is a substance that plays an important role in various intracellular biochemical reactions, such as cell proliferation and stress response, and the overexpression of SAMS could allow cells to ithstand the abiotic stress and increase productivity. Compared to wild-type C. reinhardtii, recombinant cells overexpressing SAMS grew 1.56-fold faster and produced 1.51-fold more lipids in a nitrogen-depleted medium. Furthermore, under saline-stress conditions, the survival rate and lipid accumulation were 1.56 and 2.04 times higher in the SAMS-overexpressing strain, respectively. These results suggest that the overexpression of SAMS in recombinant C. reinhardtii has high potential in the industrial-scale production of biofuels and various other high-value-added materials.
In this study, we aimed to enhance the accumulation of chorismate (CHR) and anthranilate (ANT), key intermediates in the shikimate pathway, by modifying a shikimate over-producing recombinant strain of Corynebacterium glutamicum [19]. To achieve this, we utilized a CRISPR-driven genome engineering approach to compensate for the deletion of shikimate kinase (AroK) as well as ANT synthases (TrpEG) and ANT phosphoribosyltransferase (TrpD). In addition, we inhibited the CHR metabolic pathway to induce CHR accumulation. Further, to optimize the shikimate pathway, we overexpressed feedback inhibition-resistant Escherichia coli AroG and AroH genes, as well as C. glutamicum AroF and AroB genes. We also overexpressed QsuC and substituted shikimate dehydrogenase (AroE). In parallel, we optimized the carbon metabolism pathway by deleting the gntR family transcriptional regulator (IolR) and overexpressing polyphosphate/ATP-dependent glucokinase (PpgK) and glucose kinase (Glk). Moreover, acetate kinase (Ack) and phosphotransacetylase (Pta) were eliminated. Through our CRISPR-driven genome re-design approach, we successfully generated C. glutamicum cell factories capable of producing up to 0.48 g/l and 0.9 g/l of CHR and ANT in 1.3 ml miniature culture systems, respectively. These findings highlight the efficacy of our rational cell factory design strategy in C. glutamicum, which provides a robust platform technology for developing high-producing strains that synthesize valuable aromatic compounds, particularly those derived from the shikimate pathway metabolites.
Kang, Ui-Gum;Jung, Yeun-Tae;Ha, Ho-Sung;Somasegaran, Padma;Bohlool, B. Ben
Korean Journal of Soil Science and Fertilizer
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v.26
no.4
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pp.265-270
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1993
The symbiotic dynamics of Bradyrhiwbium japonicum YCK strains indigenous to Korean soils were investigated accordingly to their competitive conditions for nodulation. For this experiment the single strain inoculants of YCK strains and the mixed inoculants of one YCK strain and one USDA strain were applied to Korean Jangbaekkong and American Clark soybeans at mollisol soils(Torroxic Haplustoll, pH 6.8). The results were summarized as follows : 1. The symbiotic effectiveness of B. japonicum YCK strains was increased on the average of nitrogen accumulation by mixing with USDA strains, especially with strain USDA 110. 2. The effectiveness of each mixed inoculant was affected by soybean cultivar. 3. YCK strains occupied on the average of 83 and 86 % of the nodules against strain USDA 110 on Jangbaekkong and Clark soybeans, respectitvely. 4. The most effective strain among three YCK strains was strain YCK 213 as a single inoculant and was strain YCK 141 as a mixed inoculant with USDA strains. 5. The mixed inoculants of YCK strains and strain USDA 123 showed antagonism for nodulation.
The cultural conditions for L-glutamate production were investigated using Brevibacterium flavum nov. sp. D2209B, the most productive strain among 5 strains reported in preceeding paper. A temperature of 3$0^{\circ}C$ and a medium volume of 30 ml per 500-flask were selected as standard culture conditions. And the following results were obtained. 1. When the concentration of acetate in the medium was below 30 g per litre, the maximum amount of L-glutamate was accumulated. 2. KH$_2$PO$_4$, MgSO$_4$, FeCI$_3$ and MnCI$_2$ were required for the L-glutamate poduction, but the concentration of those inorganic salts little effected. 3. Signifcant amount of L-glutamate was accutnulated in the limited biotin concentration less than 0.3 ug per litre. 4. The addition of malic acid or succinic acid enhanced the accumulation. 5. The L-glutamate accumulation was related to the incubation time of seed; the amount of L-glutamate accumulated was maximum by inoculating 16-20 hour incubated seed. 6. In the medium containing sufficient amount of biotin for growth, L-glutamate accumulation was stimulated by the addition of penicillin at appropreate time during incubation.
Poblete-Castro, Ignacio;Rodriguez, Andre Luis;Lam, Carolyn Ming Chi;Kessler, Wolfgang
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.24
no.1
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pp.59-69
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2014
One of the major challenges in metabolic engineering for enhanced synthesis of value-added chemicals is to design and develop new strains that can be translated into well-controlled fermentation processes using bioreactors. The aim of this study was to assess the influence of various fed-batch strategies in the performance of metabolically engineered Pseudomonas putida strains, ${\Delta}gcd$ and ${\Delta}gcd-pgl$, for improving production of medium-chain-length polyhydroxyalkanoates (mcl-PHAs) using glucose as the only carbon source. First we developed a fed-batch process that comprised an initial phase of biomass accumulation based on an exponential feeding carbon-limited strategy. For the mcl-PHA accumulation stage, three induction techniques were tested under nitrogen limitation. The substrate-pulse feeding was more efficient than the constant-feeding approach to promote the accumulation of the desirable product. Nonetheless, the most efficient approach for maximum PHA synthesis was the application of a dissolved-oxygen-stat feeding strategy (DO-stat), where P. putida ${\Delta}gcd$ mutant strain showed a final PHA content and specific PHA productivity of 67% and $0.83g{\cdot}l^{-1}{\cdot}h^{-1}$, respectively. To our knowledge, this mcl-PHA titer is the highest value that has been ever reported using glucose as the sole carbon and energy source. Our results also highlighted the effect of different fed-batch strategies upon the extent of realization of the intended metabolic modification of the mutant strains.
Kim, Juewon;Cho, Si Young;Kim, Su Hwan;Cho, Donghyun;Kim, Sunmi;Park, Chan-Woong;Shimizu, Takahiko;Cho, Jae Youl;Seo, Dae Bang;Shin, Song Seok
Journal of Ginseng Research
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v.41
no.3
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pp.277-283
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2017
Background: The ginseng berry has various bioactivities, including antidiabetic, anticancer, antiinflammatory, and antioxidative properties. Moreover, we have revealed that the active antiaging component of the ginseng berry, syringaresinol, has the ability to stimulate longevity via gene activation. Despite the many known beneficial effects of ginseng, its effects on skin aging are poorly understood. In this study, we investigated the effects of ginseng and the ginseng berry on one of the skin aging processes, melanogenesis, and age-related pigment lipofuscin accumulation, to elucidate the mechanism of action with respect to antiaging. Methods: The human melanoma MNT1 cell line was treated with ginseng root extract, ginseng berry extract, or syringaresinol. Then, the cells were analyzed using a melanin assay, and the tyrosinase activity was estimated. The Caenorhabditis elegans wild type N2 strain was used for the life span assay to analyze the antiaging effects of the samples. A lipofuscin fluorescence assay was performed during 10 passages with the syringaresinol treatment. Results: A 7-d treatment with ginseng berry extract reduced melanin accumulation and tyrosinase activity more than ginseng root extract. These results may be due to the active compound of the ginseng berry, syringaresinol. The antimelanogenic activity was strongly coordinated with the activation of the longevity gene foxo3a. Moreover, the ginseng berry extract had more potent antiaging effects, caused a life span extension, and reduced lipofuscin accumulation. Conclusion: Taken together, our results suggest that these antimelanogenic effects and antiaging effects of ginseng berry mediate the activation of antioxidation-FoxO3a signaling.
Transformed hairy roots were induced from in vitro grown plantlets of Trichosanthes kirilowii by infection with Agrobacterium rhizogenes strain ATCC15834. Transformed hairy roots exhibited active growth with high branching of roots on plant growth regulators-free medium. Cloned line (TR-03) of hairy root was tested for its growth and extracellular protein accumulation in medium under various culture conditions. Among the culture media tested, a full-strength MS medium had a pronounced effect on root biomass and extracelluar protein accumulation in medium. The maximum root biomass (2.4 g DRW/flask) and extracellular total protein contents $(28.3ug/m\ell)$ in medium was obtained at inoculum size of 2 g (FRW) and in MS medium supplemented with 4% sucrose. In addition, the optimal shaking speed for root growth and extracellular protein accumulation in medium were 100 rpm. The total extracellualr protein concentration reached a maximum of $28.3ug/m\ell$ at 4 weeks and decreased thereafter. Protein translation inhibitory activity was observed in culture broths and reached levels of 21.3 unit. These studies demonstrate that the transformed hairy roots can be utilized for the in vitro production of ribosome-inactivating proteins.
Based on the numerical investigations using steel bridge pier subjected to strong seismic excitations a new approach to seismic damage assessment for steel structures and their members has been proposed in conjunction with the suggested definition of failure state. The relevant failure form of the steel pier is evaluated. It is revealed that when a seismic load has a short period, the failure of global buckling beyond the allowable displacement is more dominant than that by that of the local buckling caused by the accumulation of plastic strain. When a seismic load is not beyond this certain part, but repeats within the range of where a plastic deformation occurs, the plastic strain is accumulated on the partial element of bottom edge of steel pier and the failure occurs by the local buckling from the accumulated plastic local strain.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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