Anatomical organization of Stoechospermum marginatum reveals small cortical cells with moderately dense cytoplasm, overlying a multilayered medulla comparatively poor in cytoplasmic contents. The anticlinal walls of cortical cells show local thickenings rich in alginic acids. Sori form on both thallus surfaces and show tetrasporangia, paraphyses and sterile-cells. The unicellular paraphyses are rich in sulphated polysaccharides whereas multicellular ones have abundance of not only polysaccharides, but also of vacuoles and phenols. The sterile-cells are modified cortical cells present on either side of the tetrasporangium and bear cytoplasmic strands towards soral cavity. Various stages of tetrasporogenesis are seen in a single sorus. The developing tetrasporangium shows a two layered wall, where the outer one is rich in alginic acid and inner has sulphated polysaccharides. An apical pad aids tetraspore release. Also involved in the release process are sterile-cells, paraphyses and polysaccharides.
The vegetative and male reproductive anatomy of a marine alga, Laurencia intercalaris sp. nov. (Rhodomelaceae, Rhodophyta), is described from subtidal habitats of eastern and southern Korea. This species has terete thalli with entangled fibrous holdfasts and regularly alternate branching of ultimate branchlets, and is inseparable from L. okamurae Yamada on the basis of habit. Vegetative axial cells produce a trichoblast and four pericentral cells in an alternating sequence. Spermatangia are produced intercalary or subterminally from one of two laterals on suprabasal cells of trichoblasts arising from axial cells in apical pits of branchlets. The other lateral remains sterile. In this sterile lateral, budding-like regeneration occurs on older segments that are oabscised. Comparison is made with other related Laurencia species, particularly those with terete thalli. The vegetative anatomy and the regeneration in sterile laterals of male trichoblasts, with the mode of spermatangial formation, distinguish the new species from previously described species of Laurencia including L. okamurae.
The crustose brown algal genus Endoplura has been known as a monotypic genus characterized by its intercalary plurangial reproductive structures composed of 2-4 separate parallel filaments terminated by 2-5 sterile cells and by containing several to many chloroplasts per cell. In this study, Endoplura jejuensis sp. nov. and E. koreana sp. nov. from Korea are newly described based on molecular and morphological analyses. Our phylogenetic analyses of the rbcL gene reveal that E. jejuensis sp. nov. and E. koreana sp. nov. are placed in the same clade with "E. aurea" from Japan with a strong bootstrap supporting value. E. jejuensis is characterized by small and light to dark brown crustose thalli of less than 1 cm diameter, tufts of hairs arising from the basal disc, plurangia composed mostly of two separate parallel reproductive filaments terminated by 2-4 sterile cells, and sessile unangia each with a single paraphysis. E. koreana is distinguished by olive or yellowish-brown crustose thalli of up to 3 cm diameter, tufts of hairs arising from the basal disc, and apical parts of erect filaments, plurangia with 2-5 separate reproductive filaments terminated by 2-8 sterile cells, and sessile unangia with 1-2 paraphyses. Our studies also show that "E. aurea" specimens from Japan may be recognized to be a different species from other Endoplura species.
The Ralfsiaceae family, part of the Ralfsiales order and consisting of crustose brown algae, includes five genera: Analipus, Endoplura, Fissipedicella, Heteroralfsia, and Ralfsia. In this study, a novel crustose genus named Ramipedicella gen. nov. is introduced within the Ralfsiaceae based on molecular and morphological analyses. Phylogenetic analyses using both concatenated dataset (rbcL + COI-5P genes) and rbcL indicate that the crustose brown algae that we collected from Korea and Russia form a unique grouping within the Ralfsiaceae. This grouping is strongly supported by both bootstrap analysis and Bayesian posterior probabilities. The genetic differences in the rbcL and COI-5P sequences between Ramipedicella and other genera within Ralfsiaceae range from 6.7 to 9.3% for rbcL and from 15.5 to 20.8% for COI-5P. Ramipedicella is characterized by crustose thalli having new crusts growing on top of old ones with a hypothallial basal layer and erect perithallial filaments, long cells with width-to-length ratio of 1 : 1-16, single chloroplast per cell, plurangia with one to several sterile cells, one to several unangia produced from unicellular stalks or from the lateral-basal region to the paraphyses, and unangia arising sequencially in irregularly branched specialized filaments. Ramipedicella, the recently identified genus, comprises two distinct species. Ramipedicella miniloba, the type species, is distinguished by crusts with small lobes, numerous hair tufts, plurangia terminated by 1-4 sterile cells, and large oblong unangia. Ramipedicella longicellularis is identified by generally smooth crusts, absence of phaeophycean hairs, plurangia terminated by 1-2 apical sterile cells, and smaller mostly oblanceolate unangia.
We have developed a polymerase chain reactionrestriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) marker that can distinguish male-fertile (N) and male-sterile (S) cytoplasm in onions. The PCR-RFLP marker was located in a chloroplast psbA gene amplicon. Digesting the amplicons from different cytoplasm-containing varieties with the restriction enzyme MspI revealed that N-cytoplasm plants have a functional MspI site (CCGG), whereas the S-cytoplasm plants has a substitution in that site (CTGG), and thus no MspI target. The results obtained using this PCR-RFLP marker to distinguish between cytoplasmic male sterile factors in 35 onion varieties corresponded with those using a CMS-specific sequence-characterized amplified region (SCAR) marker. Moreover, the PCR-RFLP marker can identify N- ot S-cytoplasms in DNA sample mixtures in which they are in up to a 10-fold minority, indicating that use of the marker has high diagnostic precision. We also demonstrated the usefulness of the SNP detected in the psbA gene for high-throughput discrimination of CMS factors using Real-time PCR and a TaqMan probe assay.
The study was carried out to investigate the effects of preservation of ovaries and oocytes with and without cumulus cells and incubation time on zona penetration by canine spermatozoa. The objective of this study was to produce in vitro fertilized oocytes and solute canine sterile. (omitted)
Objectives : This study was performed to investigate the anti-cancer effects of Rhus verniciflua Stokes (RVS) extracted with sterile distilled water on cholangiocarcinoma cell lines. Materials and Methods : Two cholangiocarcinoma cell lines, SNU-1079 and SNU-1196, were used in this study. Cells were treated with different concentrations of RVS for 24, 48, and 72 hours. Cell count, viability, apoptosis, and mRNA expression of Bax, Bcl-2, Mcl-1, survivin, caspase-3, and cyclin D1 and P21 were determined with an automatic cell counter (ADAM-MC), MTT assay, apoptosis assay (Annexin-V/PI staining), and RT-PCR. Results : All cells treated with RVS showed decreased cell counts in a dose-dependent manner. RVS inhibited proliferation of SNU-1196 in a dose-dependent manner, but SNU-1079 proliferation was inhibited in the long-time culture group in a dose-dependent manner. The proportion of early and late-stage apoptotic cells was increased by RVS in a dose-dependent manner in SNU-1196. In contrast, it was increased significantly in SNU-1079 treated with high-dose RVS. After treatment with RVS, the mRNA expression of Bcl-2 was decreased while Bax was increased in SNU-1079. Cyclin D1 mRNA levels were decreased in SNU-1196 in a dose-dependent manner. P21 expression was increased in all cells after the treatment with RVS. Conclusions : RVS appears to have potential as a therapeutic agent for cholangiocarcinoma.
Ralfsia longicellularis is known as an endemic species in Far East Asia. In this study, we report R. longicellularis as a new record from Korea based on morphological and molecular analyses. Molecular analyses based on plastid-encoded rbcL gene sequences and morpho-anatomical studies were undertaken on Ralfsia species, a poorly studied genus from Korea. Ralfsia longicellularis is mainly characterized by a dark brown thallus; 770-1200 ㎛ thick, curved cells in the creeping and ascending parts of the filaments; basal layer and erect filament cells with a width-to-length ratio of 1 : 1.5 to 10; narrowshaped sporangia on-stalk cells at the base of the paraphyses; and mostly uniseriate plurilocular reproductive organs capped with 1-2 sterile cells. The R. longicellularis samples from Korea in this study were similar to ones collected from the type locality (Peter the Great Bay, Russia) in morphology. The rbcL analyses also revealed that our Korean R. longicellularis samples were placed in the same clade with Russian materials, within a Ralfsia clade but distinct from the congeners.
The survival and transfer of chromosomal genes coding for the synthesis of amino acids (threonine, tryptophan, histidine, leucine, methionine) and of plasmid-borne genes coding for resistance to antibiotics (chloramphenicol, kanamycin, erythromycin) by transformation in sterile and nonsterile soil (the soil was amended to 12% vol/vol with the clay mineral, montmorillonite) was studied. In pure culture, the numbers of vegetative cells of the Bacillus subtilis strains decreased by 1 to 1.5 orders of magnitude within one week, but spores of each strain showed lesser decreases. In sterile soil, the populations of vegetative cells and spores decreased by 1.5 to 3 orders of magnitude within 2 to 4 days and then showed little additional decreased. The transformation frequencies (number of transformants/numbers of donors and recipients) of individual amino acid-genes invitro ranged from $1.3{\pm}0.6{\times}10^{-6}$ to $6.0{\pm}2.36{\times}10^{-6}$, of two amino acid-genes from $8.5{\pm}0.7{\times}10^{-8}$ to $3.1{\pm}0.6{\times}10^{-7}$, and of the antibiotic-resistance genes from $1.5{\pm} 0.2{\itmes} 10^{-7}$ to $1.4{\pm} 0.4{\times} 10^{-5}$ . In sterile soil, the frequencies of transfer of individual amino acid-genes ranged from $2.0{\times} 10^{-7}$ to $2.0{\times} 10^{-5}$ and of the antibiotic-resistance genes from $2.0{\times} 10^{-7}$ to $9.4{\pm} 4.7{\times} 10^{-6}$. The transfer of two amino acid-genes in sterile soil was detected at a frequency of $2.0{\times} 10^{-6}$ to $4.5{\times} 10^{-6}$, but only in three instances. The transformation frequencies of antibiotic-resistance genes in nonsterile soil were essentially similar to those in sterile soil. However, to detect transformants in nonsterile soil, higher concentrations of antibiotics were needed, as the result of the large numbers of indigenous soil bacteria resistant to the concentration of antibiotics used in the sterile soil and in vitro studies. The results of these studies show that genes can be transferred by transformation in soil and that this mechanism of transfer must be considered in risk assessment of the release of genetically engineered microorganisms to the environment.
A newly isolated heterotrophic marine bacterium, Vibrio alginolyticus, was used to remove a high load of ammonia gas under non-sterile condition. The cells were inoculated onto an inorganic packing material in a fixed-bed reactor (biofilter), and a high load of ammonia, in the range of ammonia gas concentration of 170 ppm to 880 ppm, was introduced continuously. Sucrose solution and 3% NaCl was supplied intermittently to supplement the carbon source and water to the biofilter. The average percentage of gas removed exceeded 85% for 107-day operation. The maximum removal capacity and the complete removal capacity were$19\;g-N\;kg^{-1}$ dry packing material $day^{-1}$ and $16\;g-N\;kg^{-1}$ dry packing material $day^{-1}$, respectively, which were about three times greater than those obtained in nitrifying sludge inoculated onto the same packing material. On day 82, the enhanced pressure drop was restored to the normal one by NaOH treatment, and efficient removal characteristics were later observed. During this operation, the non-sterile condition had no significantly adverse effect on the removability of ammonia by V. alginolyticus.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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