${\alpha}$-Waxy corn starch was used as a feed for twin-screw extrusion in order to enhance starch liquefaction with added thermostable ${\alpha}$-amylase (derived from Bacillus licheniformis). The residence time distribution and starch liquefaction were investigated. The starch liquefaction was analyzed in terms of reducing sugar contents, molecular size from gel permeation chromatography (GPC), and microstructure from scanning electron microscopy (SEM). The use of ${\alpha}$-starch contributed to the production of more reducing sugar than the use of raw starch use alone. From GPC, the effect of ${\alpha}$- starch on the molecular size reduction was shown to be small. From SEM, irregular and damaged surface were observed on the extrudate from ${\alpha}$-starch, as compared to those from raw starch. The spread of residence time distribution curves was greater with feed of ${\alpha}$-starch than raw starch, indicating that ${\alpha}$-starch was hard to flow forward during extrusion. This could be improved by increasing the feed moisture content and barrel temperature of extruder.
The catalytic activities of immobilized gIucoamylase in a packed bed column and a continuous stirred tank reactor have been compared. Rapid production of glucose from liquefied starch have been studied through, the continuous liquefaction and saccharification using settling chamber. The immobilized glucoamylase with chitin gave the saccharification yield of 20% with the dextrin concentration of 100 g/l in a residence of 20 min. in a packed bed column. The half-life of immobilized glucoamylase with chitin was 19 days. The glucoamyalse immobilized in chitin and encapsulated with Ca-alginate gave the saccharification yield of 6% with the dextrin concentration of 50 g/l in a residence of 20 min. in a packed bed column. The Ca-alginate encapsulated and chitin immobilized glucomylase had a half-life of 25 days, which is 6 day larger than that of the immobilized glucoamylase with chitin only. In continuous liquefaction and saccharification, the glucose yield was 17% for the liquefied starch with naked barley concentration of 50gA in a residence of 20 min.
Various volume of water for the optimal brewing condition of the Korean distilled liquor produced by liquefaction of rice and corn starch was investigated Pilot brewings were carried out by the liquefaction of 5kg of rice and 10kg of corn starch with 150%, 200% and 250% of water regarding the amount of rice and corn starch. The pH, alcohol production and total acidity were normal during the fermentation process. The yield was proportional to the amount of water added and the highest yield was obtained by 250% of water addition without loss of quality. All the test results were not significantly different by the one-way ANOVA and Duncan's multiple range test at p<0.05 and the flavor profiles were also not different according to the amount of water added. As a result, 250% of water addition was the most economical and optimal brewing condition in this study.
Production of cyclodextrin (CD) directly from raw corn starch without liquefaction using cyclodextrin glucanotransferase (CGTase) was carried out in an agitated bead reaction system. Similar CD yield and production rate comparable with those of conventional method using liquefied starch were obtained. Especially high purity-CD in the reaction mixture without accumulation of malto-oligosaccharides was obtained. The maximum 54g/l of CD was obtained at raw starch concentration of 200g/l. CD yield was inversely proportional to raw starch concentration, and conversion yield was 0.48 at substrate concentration of 100g/l. The optimal amount of enzyme (CGTase unit/g raw starch) was found to be around 6.0. Granular structure of raw starch degraded by CGTase was observed by SEM in order to investigate the enhancing mechanism, along with those of acid or alkali pretreated raw starch, amylose, and amylopectin. Kinetic constants of CGTase on raw starch in an agitated bead reaction system were evaluated, and CGTase was competitively inhibited by CD.
To produce liquor and vinegar using potatoes needs to liquefy and sacchrify potatoes . So selecting the efficient fermenter for proceeding these process successfully is very important . This study was investigated several fermenter and crush types of potatoes for alcohol fermentation. Final sugar contents was high in pottoes saccharificatiion by nuruk or crude enzyme. But pure enzyme and blucoamylase ended liquefaction and saccharificatiion within short ime. So complex type fermenter mixed several fermenters was superior to single type fermenter. Complexfermenter III using crude enzyme and glucoamyulase saccharificed excellently potatoes with 150% of water contents by treatment of 3 hours. Through alcohol fermentation using pressure steamed potatoes (PSP), it could be obtained 6.4% , 150%, of alcohol content and yield. However to perform a series process efficiently , crush steamed pottoes (CSP) was suitable. When it was fermented after saccharification using crush steamed potatoes and complex fermenter III, it could be obtained 6.6% of alcohol and 6.7% of acidity.
Direct synthesis of cyclodextrin (CD) from extruded insoluble corn starch without liquefaction procedure using cyclodextrin glucanotransferase (CGTase) was carried out. Increased CD production rate and yield were achieved in heterogeneous enzyme reaction system containing extruded corn starch compared with those of conventional system employing liquefied or partially cyclized starch. At extruded starch concentration of 100 g/l the CD concentration and conversion yield were reached up to 54 g/l and 0.54, respectively. High purity of $\alpha \beta \gamma$-CDs without accumulation of undesirable malto-oligosaccharides was produced, furthermore, the residual extruded starch was easily separated by centrifugation from reaction mixture, whlch will facilitate the purification procedure. Granular structure of extruded starch was observed by SEM to investigate enzyme reaction mechanism. Supplemental addition of $\alpha$-amylase enhanced slightly the initial CD production rate, but it decomposed produced CD at the late stage. Various! extruded raw starches, such as, corn, rice, and barley were also suitable substrates for CD production.
Simultaneous liquefaction and cyclodextrin (CD) production were conducted on potato starch using cyclomaltodextrin glucanotransferase (CGTase) from a mutant strain MNNG 8 of Bacillus stearothermophilus No. 239. A high concentration (30%) of potato starch was converted to cyc1o-dextrins (CDs) with 29% yield in the conditions of pH 6.0, temperature $80^{\circ}C$, 4.3 mM $CaCl_2$, CGTase addition of 3.0 dextrinizing activity unit (DAU) at $40^{\circ}C$/g starch.
Since 1950 there has been a dramatic progress in rationalization of the production of sweet potato and potato starch in Japan. This enabled dextrose industry by enzymatic process to develop rapidly due to the success of enzymatic liquefaction and saccharification. Isomerization of glucose to fructose has been studied, and the immobilization of isomerases prompted its products on industrial scale in 1970. Another advance is the development of effective methods of producing high purity maltose. A malto-hexaose forming amylase was discovered in 1971 and attempts are being made for its pharmaceutical utilization. Saccharification of cellulose by cellulase has been studied. Conversion of starch to other polysaccharides is another example for the numerous Japanese activities.
Direct conversion of raw starch without liquefaction to maltose using maltose-forming fungal a-amylase (Fungamyl) was carried out in an agitated bead enzyme reactor (bioattritor). The reaction rate in bioattritor was comparable with conventional method which utilized liquefied soluble starch. Moreover the extent of maltose formation increased substantially compared with conventional method; from 150 g / I of raw starch, around 95 g/l of maltose was formed and 72% of maltose content in sugar mixture was achieved. Especially, pH influenced greatly not only on total sugar formation from raw starch in bioattritor but also on maltose content in sugar mixture. The optimal pH for maltose formation from raw starch was shifted into the weak alkaline pH, the optimal pH of 8.0~9.0 in bioattritor contrast to pH of 5.0~5.5 for liquefied starch. The maltose formation and content were also affected by the amounts of Fungamyl added and raw starch concentration. Consumption of maltose-forming Fungamyl can be substantially reduced by supplementary addition of starch liquefying a-amylase (Termamyl).
For fuel alcohol production, enzymatic liquefaction and saccharification of tapioca starch by ${\alpha}$-amylase and glucoamylase were studied. The thermophilic ${\alpha}$-amylase Termamyl produced from Bacillus licheniformis gave a better liquefaction than the relalively low temperature enzyme BAN from B. subtilis. Oplimal temperature and pH with Termamyl were $90∼95^{\circ}C$ and 5.8, respectively. Minimal amount of Termamyl 240uc for a satisfactory liquefaction for a two-hour reaction was about 0.0125% (v/w) with respect to the mass of tapioca used. For saccharification experiments two enzymes, Novo AMG and Do-I1 enzymes were compared. The enzymatic activity of each enzyme was a little different depending on the substrate used and the latter was found to have a significant amount of ${\alpha}$-amylase activity. With Novo AMG optimal temperature was about $58^{\circ}C$ The pH optimum was 4.3 with maltose, however, with tapioca, no difference was observed between pH 4.3 and 5.7 which is a natural, unadjusted pH of liquefied tapioca. For 85% of completion of saccharification, it was necessary to use 0.0625% (v/w) of Novo AMG 400L for tapioca and to run the reaction for more than 10 hr, Packed volume of solid particles in tapioca slurry remained at around 30% during liquefaction and saccharification. This indicates that the removal of the solid particle before fermentation is not economically feasible at all, even though the solid particles make it very difficult to operate the bioreactor in a continuous mode with cell-recycle.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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