This study was conducted to determine the incidence of microorganisms associated with dressed broiler with intact skin and without skin at different frozen storage periods such as 0, 10, 20, 30 days and to demonstrate the role of packaging and pretreatment chilling on the changes of carcass quality. The values of total viable count (TVC), total coliform count (TCC), total streptococcal count (TStC) and total staphylococcal count (TSC) were determined for meat samples of thigh and breast and swab samples of visceral surfaces of the broilers with intact skin and without skin. It was observed that the values of TVC, TCC, TStC and TSC in both cases of dressed broiler with intact skin and without skin exceeded the International Commission on Microbiological Specification for Foods. However, numbers of microorganisms were considerably decreased during the frozen storage. Packing and prechilled conditions were generally better effective in decrease of the loads of microorganisms than without packing and prechilled conditions, and lower bacterial numbers were also found in dressed broiler with intact skin than that without skin. The highest sensory panel score was obtained at 10 days of frozen storage. These results, thus, indicate that usages of appropriate periods and conditions of frozen storage and packaging systems can minimize the potential health hazards associated with contaminants gaining access to the dressed or processed broilers and improve the quality and shelf life of dressed broilers.
Various methods such as lel-mtration on Sephadex G-SO, 75, 100 Sephacry, and Ultro gel, and lon-exchanle chromatoaraphy on Amberilte and carboxymethyl (CM)-cellulose, and Fast Protein liquid Chromatolraphy (FPLC) were applied for the purification of enterotoxin B from Staphylococcus aureus ATCC 14458 and compared one another. lon-exchanle chromatography on Amberllte resin was good enough to remove non-entrotoxln materials in culture, convlnient to use and fast although tbe purity was less tban 70%. However, CM-cellulose showed to be better purity and yield tban those of Amberilte resin. The yields of these two resins for ion-exchange cbromatograpby were about 70% and 75%, respectively. When the gel-filtration methods on Sepbadex G-50, 75, 100, Sepbacryl, and Ultro lei were applied, the purities were about 90%. FPLC was found to be tbe most efficient metbod in terms of purity (96%) and speed. For the purification of sample with large volume, particularly, tbe combined metbod, gel-mtration after Amberlite can be also used efficiently. Tbe purified toxin was found to be identical to type B enterotoxin used for reference standard by Oucbterlony immunodiffusion test.
감염병소와 진단을 위해 여러 방사성성핵종 표지 사람비특이항체들이 임상이용되었으나, $^{123}I,\;^{99m}Tc,\;^{111}In$등 표지 핵종과 표지방법에 따른 체내동태의 차이에 대한 자료가 필요하며, 감염병소의 진단에 표준적으로 이용되어지던 $^{111}In$-oxine표지백혈구와 비교평가도 요구된다. 저자들은 $10^9$개의 포도상구균을 좌측 대퇴부에 주사하여 농양을 유발한 백서에서 $^{123}In$ 표지, iminothiolane을 이용한 $^{99m}Tc$ 표지, DTPA이용 $^{111}In$ 표지 사람비특이항체와 $^{111}In$-oxine 표지 백혈구의 체내동태 및 농양섭취율을 비교하였다. $^{123}In$-IgG는 갑상선 및 위의 방사능이 높아 체내 탈요드반응이 빠름이 시사되었으며, $^{99m}Tc$-iminothiolane IgG는 신장방사능이 높아 신장으로 IgG 또는 대사물이 배설됨을 알 수 있었다. $^{111}In$-oxine표지 백혈구는 간 및 비장의 방사능이 높았고, 혈액방사능 제거율이 가장 빨랐다. 주사 24시간 후의 농양섭취율은 $^{111}In$-DTPA IgG가 가장 높았고, 농양 대 혈액 방사능비는 $^{111}In$-oxine표지 백혈구가 가장 높았으며, $^{111}In$-DTPA IgG와 $^{99m}Tc$-iminothiolane IgG가 다음으로 비슷하였다. $^{111}In$-oxine표지 백혈구보다는 방사성핵종표지 IgG가 간편하게 이용될 수 있으며, $^{111}In$ 이 $^{99m}Tc$나 $^{123}In$보다 지연영상의 촬영에 유리함을 알 수 있었다.
2-iminothiolane is known to bind $NH_2$ group of lysine in the protein and deliver SH group, which can be used to label protein with $^{99m}Tc$. In this study, we looked for the best reaction condition in which 2-iminothiolane is conjugated to human polyclonal IgG and labeling condition with $^{99m}Tc$-glucoheptonate. Labeling yield was measured with TSK G4000SW column and HPLC or precipitation with 10% TCA (trichloroacetic acid) and 1% HSA. In vivo distribution was investigated with Staphylococcal abscess bearing rats. With decreasing glucoheptonate, the labeling yield decreased. Without 2-iminothiolane, $^{99m}Tc$-glucoheptonate was bound to IgG, which seemed to be direct labeling. With increasing 2-iminothiolane upto 20 times higher than IgG, the labeling yield increased, and plateau was seen with higher molar excess of 2-iminothiolane. Polymer formation was not observed. The pH for the conjugation of 2-iminothiolane and IgG was best around 6.4. $^{99m}Tc$-2-iminothiolane-IgG showed faster blood clearance, higher renal activity and lower hepatic and splenic activity than $^{99m}Tc$-DTPA-IgG. The biodistribution of $^{99m}Tc$-2-iminothiolane-IgG with higher molar excess of 2-iminothiolane was not different from that with lower molar excess. Labeling antibodies with $^{99m}Tc$ using 2-iminothiolane can afford a possible route to simple labeling and wide clinical use of the immunoscintigraphy.
A simple and easy modification of AST by disk diffusion was tested for the detection of induced clindamycin resistant Staphylococci and their antimicrobial susceptibility at the same time. The incidence of inducible clindamycin resistant staphylococci in blood culture and their MIC characterization at Seoul National University Hospital was analyzed by an AST contained disk approximation test (D-zone test) and Etest, respectively. Of the total 309 staphylococcal isolates, 139 (45%) isolates presented constitutive resistance to ERY and CLI (ERY-R, CLI-R phenotype), and 59 were ERY-I/R and CLI-S phenotypes. Of the 59 isolates, 19 (32%) isolates were inducible resistant to CLI. The incidence was higher in S. aureus (66.7%) than coagulase-negative staphylococci (CNS, 26.0%). Especially, methicillin-resistant staphylococci (MRSA, 100%; MRCNS, 45.5%) presented higher inducibility than methicillin susceptible (MSSA, 50%; MSCNS, 20%). For most of the inducible clindamycin resistant staphylococci (15 of 19 isolates), their ERY MIC were high (>$128_{\mu}g/mL$) and were methicillin resistant. The remaining 4 isolates were methicillin susceptible and their ERY MIC were of intermediate concentrations ($1-4_{\mu}g/mL$). We concluded that suscetibility testing of staphylococci, especially methicillin resistant, should include the D-zone test.
In this study, Artemisia mongolica fischer extract was examined for its possible differential inhibitory activity against pathogenic bacteria including Staphylococcus aureus and Lactobacillus spp. isolated from women's vagina. First, seven lactobacillus spp. were selected based on their in vitro high anti-staphylococcal activity. Various samples extracted using different concentrations of organic solvents (acetone, ethanol, methanol) were examined for optimal anti-staphylococal activity. When the Artemisia extract obtained using $100\%$ solvents was added to the cell suspension at $17\%$ (vol/vol), Lactobacillus sp. KLB 224 maintained its viability for 48 hr, whereas S. aureus was completely inactivated showing differential antimicrobial activity of the extract. Using scanning electron microscopy the effect of the extract on the cell morphology was observed: S. aureus showed markedly distorted cell morphology while Lactobacillus sp. KLB 224 appeared to remain intact.
Introduction: It is a challenge to design a protein score function which stabilizes the native structures of many proteins simultaneously. The coarse-grained description of proteins to construct the pairwise-contact score function usually ignores the backbone directionality of protein structures. We propose a new two-body score function which stabilizes all native states of 1,006 proteins simultaneously. This two-body score function differs from the usual pairwise-contact functions in that it considers two adjacent amino acids at two ends of each peptide bond with the backbone directionality from the N-terminal to the C-terminal. The score is a corresponding propensity for a directional alignment of two adjacent amino acids with their local environments. Results and Discussion: We show that the construction of a directional adjacency-score function was achieved using 1,006 training proteins with the sequence homology less than 30%, which include all representatives of different protein classes. After parameterizing the local environments of amino acids into 9 categories depending on three secondary structures and three kinds of hydrophobicity of amino acids, the 32,400 adjacency-scores of amino acids could be determined by the perceptron learning and the protein threading. These could stabilize simultaneously all native folds of 1,006 training proteins. When these parameters are tested on the new distinct 382 proteins with the sequence homology less than 90%, 371 (97.1%) proteins could recognize their native folds. We also showed using these parameters that the retro sequence of the SH3 domain, the B domain of Staphylococcal protein A, and the B1 domain of Streptococcal protein G could not be stabilized to fold, which agrees with the experimental evidence.
Son, Nguyen Thai;Huong, Vu Thi Thu;Lien, Vu Thi Kim;Nga, Do Thi Quynh;Au, Tran Thi Hai;Nga, Tang Thi;Hoa, Le Nguyen Minh;Binh, Tran Quang
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.29
no.9
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pp.1460-1469
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2019
The extensive distribution of multidrug-resistant (MDR) methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) poses a threat to healthcare worldwide. This study aimed to investigate the MDR and molecular patterns of MRSA isolates in children admitted to the two biggest tertiary care pediatric hospitals in northern and southern Vietnam. A total of 168 MRSA strains were collected to determine antibiotic susceptibility by minimum inhibitory concentration tests. Antibiotic-resistant genes, pulsed-field gel electrophoresis, staphylococcal cassette chromosome mec (SCCmec) typing, and multilocus sequence typing were used for the molecular characterization of MRSA. Among the total strains, the MDR rate (51.8%) was significantly higher in the northern hospital than in the southern hospital (73% vs. 39%, p < 0.0001). The MDR-MRSA with the highest rates were "ciprofloxacin-erythromycin-gentamicintetracyclines" (35.6%), followed by "erythromycin-tetracycline-chloramphenicol" (24.1%), and "ciprofloxacin-erythromycin-gentamicin" (19.5%), showing an accumulative total of 79.3%. The most susceptible antibiotics were rifampicin (100%) and vancomycin (100%), followed by doxycycline (94.0%), meropenem (78.0%), and cefotaxime (75.0%). The SCCmecII strains showed greater resistance to gentamicin, ciprofloxacin, tetracycline, meropenem and cephalosporins compared with the other strains. The SCCmecII strains exhibited the highest rate in the tested genes (aacA/aphD: 55.2%, ermA/B/C: 89.7%, and tetK/M: 82.8%). ST5-SCCmecII was the predominant clone in the northern hospital, whereas SCCmecIVa was more pronounced in the southern hospital. In conclusion, our results raised concerns about the predominant MDR-MRSA strains in the pediatric hospitals in Vietnam. The north-south difference in the antibiotic resistance patterns and genetic structure of MRSA suggests different MRSA origins and various uses of antimicrobial agents between the two regions.
Background: Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) is a leading cause of severe infections in humans and animals worldwide. Studies elucidating the population structure, staphylococcal cassette chromosome mec types, resistance phenotypes, and virulence gene profiles of animal-associated MRSA are needed to understand spread and transmission. Objectives: The objective of this study was to determine 1) clonal complexes and spa types, 2) resistance phenotypes, and 3) virulence/resistance gene profiles of MRSA isolated from animals in Switzerland. Methods: We analyzed 31 presumptive MRSA isolates collected from clinical infections in horses, dogs, cattle, sheep, and pigs, which had tested positive in the Staphaurex Latex Agglutination Test. The isolates were characterized by spa typing and DNA microarray profiling. In addition, we performed antimicrobial susceptibility testing using the VITEK 2 Compact system. Results: Characterization of the 31 presumptive MRSA isolates revealed 3 methicillinresistant Staphylococcus pseudintermedius isolates, which were able to grow on MRSA2 Brilliance agar. Of the 28 MRSA isolates, the majority was assigned to CC398 (86%), but CC8 (11%) and CC1 (4%) were also detected. The predominant spa type was t011 (n = 23), followed by t009 (n = 2), t034 (n = 1), t008 (n = 1), and t127 (n = 1). Conclusions: The results of this study extend the current body of knowledge on the population structure, resistance phenotypes, and virulence and resistance gene profiles of MRSA from livestock and companion animals.
The aim of this study was to investigate the prevalence of antimicrobial resistance and virulence factors in staphylococci isolated from canine otitis externa. A total 295 causative microorganisms were isolated. The most common isolated species were Staphylococcus (S) pseudintermedius (94 isolates) followed by Pseudomonas aeruginosa (60 isolates), S. schleiferi (25 isolates), Escherichia coli (23 isolates) and Proteus mirabilis (20 isolates). Staphylococci isolates were showed high resistance to penicillin (78.6%), erythromycin (55.9%), tetracycline (52.4%), clindamycin (51.7%) and ciprofloxacin (42.8%). Of the 145 staphylococci isolates, 49 (33.8%) methicillin-resistant staphylococci (MRS) were observed, distributed among S. pseudintermedius (n=34), S. schleiferi (n=6), S. epidermis (n=4), S. hominis (n=2), S. aureus, S. caprae and S. saprophyticus (n=1, respectively). Forty-three (87.8%) of 49 MRS and 10 (10.4%) of 96 methicillin-susceptibility staphylococci harbored mecA gene. About 80% of MRS were multidrug-resistant with resistance to at least one antibiotic in three or more antibiotic classes. Resistance genes blaZ (93/114, 81.5%), ermB (35/81, 43.2%), ermC (3/81, 3.7%), aacA-aphD (50/54, 92.5%), tetM (69/76, 90.7%) and tetK (6/76, 7.8%) were detected among resistant isolates. Virulence factors genes lukF and lukS were found in 100%(145/145) and 43.4%(63/145), respectively. Genes encoding ermA, eta, etb and tsst were not detected. To the best of our knowledge, this is the first study which investigated for the presence of genes encoding antimicrobial resistance and staphylococcal toxins in staphylococci isolated from canine otitis externa. A continuous monitoring and surveillance program to prevent antimicrobial resistance in companion animals is demanded.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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