Attempts to isolate chicken anemia agent (CAA) were made by inoculating tissue homogenates into MDCC-MSBl or LSCC-1104B1 cell lines and passaging the cells serially. CAA was isolated from the liver and thymus of 11 weeks old layer chickens and from the liver of 10 weeks old broiler breeder chickens. The layer flock experienced approximately 45% mortality during 9 to 14 week of age from gangrenous dermatitis and lymphoid organs of affected chickens were severely atrophied. The broiler breeder flock experienced approximately 7% mortality during 7 to 9 weeks of age and affected birds showed lesions of colibacillosis, staphylococcal arthritis, and coccidiosis together with atrophied lymphoid organs. The isolated viruses were identified as CAA by the indirect fluorescent antibody test and virus neutralization test using CAA immune sera including one to Gifu-1 strain of CAA. The CAA isolate 89-69, when inoculated into susceptible 1 day old SPF chicks, induced anemia 14 to 16 days after inoculation. It did not induce any cytopathic effects in chicken embryo liver and chicken embryo fibroblast cell cultures. Infectivity of the isolate was not affected by the treatment of chloroform or heat ($70^{\circ}C$ for 15 minutes).
We present reconstruction of a complicated scalp-dura defect using acellular human dermis and latissimus dorsi myocutaneous free flap. A 62-year-old female had previously undergone decompressive craniectomy for intracranial hemorrhage. The cranial bone flap was cryopreserved and restored to the original location subsequently, but necessitated removal for a methicillin-resistant Staphylococcal infection. However, the infectious nidus remained in a dermal substitute that was left over the cerebrum. Upon re-exploration, this material was removed, and frank pus was observed in the deep space just over the arachnoid layer. This was carefully irrigated, and the dural defect was closed with acellular dermal matrix in a watertight manner. The remaining scalp defect was covered using a free latissimus dorsi flap with anastomosis between the thoracodorsal and deep temporal arteries. The wound healed well without complications, and the scalp remained intact without any evidence of cerebrospinal fluid leak or continued infection.
Staphylococcus aureus is a major pathogen for cattle, causing various forms of subclinical and clinical mastitis and could be a causative agent of food poisoning, it produces various superantigenic exotoxins which have a great public health significance. A total of 72 S. aureus clinical isolates from dairy farms located in Kyunggi Province Korea were examined for the species identification by biochemical method, and for the detection of $\beta$-lactamase, enterotoxin and other exotoxins genes by PCR. The results of species identification by biochemical method agreed with those of PCR done with species specific primer STA-AU. $\beta$-lactamase is an enzyme closely associated with the resistance to antibiotic penicillin, which is an important means of treatment of mastitis, all the isolates were positive for the presence of genes encoding $\beta$-lactamase, which were reproduced in penicillin susceptibility disc assay. Six types of toxin genes, Staphylococcal enterotoxin (SE)A, SEB, SEC, SEE, toxic shock syndrome toxin (TSST-1) and exfoliative toxin A (ET A) were detected in 72 isolates by PCR associated genotypic method in this study, none of the isolates carried the genes for enterotoxin D (SED) and exfoliative toxin B (ETB). The occurrence rate of exotoxin genes rated as 12.5%, and the precision of the PCR identification results has been confirmed using the reference strains.
Amplified fragment length polymorphism (AFLP) is a recently developed PCR-based high resolution fingerprinting method that is able to generate complex banding patterns which can be used to delineate intraspecific genetic relationships among bacteria. In this study, we have modified and evaluated a PCR-based technique, amplified fragment length polymorphism (AFLP) analysis, for use in fingerprinting strains of Staphylococcus aureus. Single-enzyme amplified fragment length polymorphism (SE-AFLP) analysis was used to perform strain identification of Staphylococus aureus. By careful selection of AFLP primers, it was possible to obtain reproducible and sensitive identification to strain level. AFLP fingerprinting of 5 reference strains of Staphylococcus aureus and 65 strains of Staphylococcus aureus that were isolated from food sources of different area and diverse genomic types of Staphylococcus aureus were recognized. As a result of this study, we found that the AFLP patterns of Staphylococcus aureus isolated from Seoul, Taejeon and Gwang-Ju indicated the close relation with genetic similarity. The main purpose of this study was to find an alternative and reliable fingerprinting method to study the overall genetic diversity, using Staphylococcus aureus species as an example, and observed if the method can be successfully applied to all staphylococcal species.
Staphylococci are Gram-positive, facultatively anaerobic cocci, normally found on the skin andmucosal surfaces of most warm-blooded animals and often involved in a wide variety of diseases in animals.Staphylococcal infections are treated with antibiotics and, consequently, antibiotic resistance and/or acquiredresistance have developed. Staphylococcus (S.) intermedius and Staphylococcus (S.) aureus are 2 comonveterinary isolates that are frequently associated with suppurative infections. This study was undertaken toexamine antimicrobial susceptibility of S. aureus (23 isolates) and S. intermedius (160 isolates) isolatedfrom dogs in Gwangju, Korea and investigate whether the antibiotic resistance of S. aureus and S.intermedius is efected by the site of isolation, age, and sex of dogs. More isolates were isolated fromadult dogs (71.3%) than juveniles (20.5%). Antimicrobial resistance was commonly found for Penicillin,Tetracycline, Trimethoprim-Sulphamethoxazole in both Staphylococcus species. All of the isolates weresusceptible to Amoxicillin/Clavulanic Acid, Cephalothin, Oxacilin, Neomycin, and Vancomycin. Appropriateprotocol for antibiotic use and strategies to reduce antimicrobial resistance rate will be needed. Periodicsubstitution of antimicrobial agents and limitation of antibiotic use should also be considered.
Lysogenic conversion of Staphylococcus aureus to loss of ${\beta}-hemolysin$ production by serological group F phages is always associated with gain in staphylokinase production. In this study, the new phages belonging to serotype F were detected during the course of isolation of phages from Staph aureus of bovine origin and some characteristics of the new phages isolated were investigated. The new phages, ${\phi}470$ and ${\phi}499$, isolated from Staph aureus producing ${\beta}-hemolysin$ and staphylokinase(${\beta}^+\;K^+$) were found to convert ${\beta}^+\;K^+$ strain to ${\beta}^+K\;^+$, Staph aureus strains lysogenized by this serotype F single-converting phage ${\phi}470$ or ${\phi}499$ could be again lysogenized with serotype F double-converting phage ${\phi}506$. The frequency of lysogenization of indicator strains by serotype F single-converting phage was 100%, whereas the frequency for serotype F double-converting phage ${\phi}506$ varied from 4.2% to 97.6% according to the indicator strains. The indicator strain lysogenized with phage ${\phi}470$ was resistant to phage ${\phi}499$, and vice versa, but not to phage ${\phi}506$. Therefore, phage ${\phi}470$ and ${\phi}499$ were shown to be identical by immunity test.
Empyema is a severe infection encountered in the pediatrics. With advance of the antibiotics and chemotherapeutics, there was a marked decrease in number of empyema. Empyema complicated by staphylococcal pneumonia in infant and children has been distressing problem, and the management of this complication has been discussed repeatedly in the past. In Korea, tuberculous empyema is also troublesome. If empyema is localized within thick capsule, tube thoracostomy and closed drainage alone is unacceptable, and early open thoracotomy to eliminate the empyema has proved good result. A clinical analysis of 39 patients with thoracic empyema was done. They were managed surgical intervention at Dept. of Thoracic & Cardiovascular Surgery at Kyung-Hee University Hospital from Jan. 1974 to December, 1984. 1. Age and sex distribution, infancy 9, early childhood 11. late childhood 9, puberty 10. The male to female ratio was 21:18. 2. The highest seasonal incidence was winter [21 cases]. 3. Cardinal symptoms were cough [76%], fever and chill [66%], and dyspnea [40%]. 4. The location of the empyema was right in 27 cases [69%] and 12 cases in left side. 5. The most frequent lesion to predisposing factor was pneumonia [67%]. 6. The commonest organism was Staphylococcus aureus in 15 [38%] cases, and Mycobacterium tuberculosis in 10 cases [26%]. 7. The surgical treatment was performed in all patients. The surgical procedure was closed tube thoracostomy in 25 cases [64%], decortication in 7 cases [18%], pulmonary resection in 4 cases [10%], and decortication with curettage in 2 cases. 8. One patient died from sepsis complicated by lymphoma and in one patient bronchopleural fistula was developed postoperatively.
Staphylococcus aureus cultures exposed to rotating magnetic field (RMF) were studied in order to analyse the possible induced changes in staphylococcal enterotoxin genes (se) expression. Liquid cultures of S. aureus strains carrying different se were exposed to the RMF of magnetic frequency 50 Hz and magnetic induction 34 mT for 10 h at $37^{\circ}C$. Three time points of bacterial growth cycle were considered for RNA extractions. Gene expression analyses were evaluated using real-time quantitative PCR method. The present study confirmed, that the RMF can stimulate the growth rate of S. aureus cultures in comparison to the unexposed controls, while the stimulation is not strain dependent. The studies have also shown, that the RMF, depending on the exposure time but regardless the bacterial strain, can influence on the expression of various se. In general, except for sea, as a result of bacterial exposure to the RMF through subsequent growth phases, the expression of se decreased, reaching the values below results recorded for unexposed controls. In the case of sea expression remained at a lower level as compared to the control, regardless the time of exposition.
Park, Cheong-Kyu;Choi, Seong-Mi;Lee, Young-Ju;Kim, Ki-Seuk;Yeo, Sang-Geon
Korean Journal of Veterinary Research
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제44권3호
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pp.407-413
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2004
Specimens collected from various pyogenic lesions of dogs were culturally examined for staphylococci and all staphylococcal isolates obtained from the specimens were also tested for susceptibility to 14 antimicrobial agents. A total of 123 isolates of staphylococci were identified. Of these, 120 were Staphylococcus intermedius and 3 were S aureus. All isolates were susceptible to oxacillin, cefazolin, cephalothin and amikacin, whereas more than 85% of the isolates were resistant to ampicillin, penicillin G and tetracycline. S intermedius isolates could be divided into 8 different biotypes by biotyping with the most common type accounting for 66.7% of the isolates. One hundred and seventeen(97.5%) isolates could be also divided into 26 different antibiogram patterns. The predominant antibiogram type accounted for 34.2% of the isolates. Antibiogram typing was found to be effective in distinguishing epidemiologically related isolates of S intermedius.
Micro-scale magnetic beads are widely used for isolation of proteins, DNA, and cells, leading to the development of in vitro diagnostics. Efficient isolation of target biomolecules is one of the keys to developing a simple and rapid point-of-care diagnostic. A zinc finger protein (ZFP) is a double-stranded (ds) DNA-binding domain, providing a useful scaffold for direct reading of the sequence information. Here, we utilized two engineered ZFPs (Stx2-268 and SEB-435) to detect the Shiga toxin (stx2) gene and the staphylococcal enterotoxin B (seb) gene present in foodborne pathogens, Escherichia coli O157 and Staphylococcus aureus, respectively. Engineered ZFPs are immobilized on a paramagnetic bead as a detection platform to efficiently isolate the target dsDNA-ZFP bound complex. The small paramagnetic beads provide a high surface area to volume ratio, allowing more ZFPs to be immobilized on the beads, which leads to increased target DNA detection. The fluorescence signal was measured upon ZFP binding to fluorophore-labeled target dsDNA. In this study, our system provided a detection limit of ≤ 60 fmol and demonstrated high specificity with multiplexing capability, suggesting a potential for development into a simple and reliable diagnostic for detecting multiple pathogens without target amplification.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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