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Saccharomyces cerevisiae에서 Paenibacilius macerans 유래 cycloinulooligosaccha-ride fructanotransferase의 발현 (Expression of Paenibacillus macerans Cycloinulooligosaccharide Fructanotransferase in Saccharomyces cerevisiae)

  • 김현철;김정현;전숭종;최우봉;남수완
    • 생명과학회지
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    • 제15권3호
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    • pp.317-322
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    • 2005
  • Paenibacillus macerans 유래의 cycloinulooligosaccharide fructanotransferase (CFTase) 유전자(cft)를 Saccharomyces cerevisiae SEY2102에 발현시키기 위해 대장균과 효모의 shuttle vector인 pYES2.0에 subcloning 하였다. 구축된 pYGECFTN (8.6 kb) plasmid를 S. cerevisiae SEY2102에 형질전환하였고, uracil이 결핍된 SD 배지에서 선별하였다. cft 유전자는 선별된 형질전환체(S. cerevisiae SEY2102/pYCECFTN)에서 GAL1 promoter 조절하에 성공적으로 발현되어 cyclofructan(CF)을 생성함을 TLC로 확인하였다. 그러나, 균체 외로의 효소 분비는 이루어지지 않았고 cytoplasm보다 periplasmic space에 많이 존재하였다 S. cerevisiae에서 발현된 P. polymyxa유래 CFTase보다 P. macerans 유래 CFTase의 CF 생성이 image analyzer로 확인한 결과, 더 많음을 알 수 있었다. 효소반응 5분째부터 CF가 생성됨을 확인하였고, 최적온도와 최적 pH는 각각 $45^{\circ}C$와 pH 8.0로 나타났으며, $55^{\circ}C$까지 효소활성이 안정적으로 유지되었다. Dahlia tubers, chicory root, Jerusalem artichoke 등의 inulin 기질에 따른 반응산물 분석 결과, 모든 기질로부터 CF가 생산되었으며, dahlia tubers와 Jerusalem artichoke로부터 가장 효과적으로 생성되었다.

투습발수직물과 축열보온섬유를 이용한 스키웨어의 쾌적감 (Comfort Properties of Ski Wear Using Vapor-Permeable Water Repellent Fabrics and Thermal Insulation Battings)

  • 조길수;최종명;이정주;이선우
    • 한국의류학회지
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    • 제16권2호
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    • pp.245-254
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    • 1992
  • The purpose of this study was to evaluate the mechanical thermal resistances and comfort properties of ski wear made with vapor-permeable water repellent (VPWR) fabrics and thermal insulation battings. Four types of experimental clothing were made with the combination of two VPWR fabrics (Hipora-$TM^{\circledR}$, Hipora-$CR^{\circledR}$) and two thermal insulation battings ($Viwarm^{\circledR},\;Airseal^{\circledR}$). Thermal resistances of ski wear were objectly evaluated by thermal manikin experiment ($21{\pm}\;2^{\circ}C,\;50{\pm}5\%$ R.H.,0.25 m/sec air velocity) and thermographic accessment ($2{\pm}2^{\circ}C,\;0\%$ R.H.,0.25 m/sec air velocity, and emissivity level : 1). Garment wear tests of ski wear included the measurement of the microclimate (inner temp. and relative humidity) of the experimental clothing by digital thermohygrometer and subject wear sensation using McNall's thermal comfort ratings. CBo values of experimental clothing 4 (Hipora-$CR^{\circledR}+Airseal^{\circledR}$) and 1 (Hipora-$TM^{\circledR}+Viwarm^{\circledR}$) were significantly higher than those of 2 (Hipora-$TM^{\circledR}+Airseal^{\circledR}$) and 3 (Hipora-$CR^{\circledR}+Viwarm^{\circledR}$). Thermal resistances in the points of breast, back, belly, and loin was significantly higher than those of upper am, fore arm, and shank of measuring points on the thermal manikin. According to the color map of the thermogram, the experimental clothing 4 indicated higher surface temperatures than the others showing more yellowish spots on the surface of clothing. Inner temperature of experimental clothing was not significantly different among the four types of ski wear, but relative humidities of experimental clothing were significantly different. Relative humidities of experimental clothing 1 and 3 showed higher than those of 2 and 4. Relative humidity of experimantal clothing was affected largely by the thermal resis- tance of thermal insulation batting materials. The subject wear sensation of experimental clothing 2 and 4 showed lower humidity than the others. Subject wear sensation was affected more by humidity sensation than by thermal sensation.

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이차원전기영동법을 이용한 white muscle과 red muscle간의 단백질 발현양상의 비교분석 (Comparative Analysis of Muscle Proteome from Porcine White and Red Muscles by Two-dimensional Electrophoresis)

  • 김남국;조중호;추교선;박혜란;박범영;김언현;이창수
    • Journal of Animal Science and Technology
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    • 제45권5호
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    • pp.731-738
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    • 2003
  • 근육의 생화학적 특성을 단백질 수준에서 분석하기 위하여 3원교잡종 돼지 3개체를 선발하고, white muscle은 longissimus dorsi muscle을 red muscle은 soleus muslce을 분리하여 분석에 이용하였다. 각 근육조직은 수용성, 불수용성 단백질 및 총단백질로 분리하여 추출하였고, 이차원전기영동 분석을 위하여 17cm 길이의 immobilized pH gradient strip (Bio-Rad, 3-10NL)과 12% acrylamide gel을 이용하여 전개하였다. 각각의 gel은 coomassie stain과 silver stain을 통하여 가시화 하였고, PDQuest software을 통하여 단백질 발현양상을 분석하였다. 하나의 gel에서 평균 600개 이상의 단백질 spot을 관찰하였으며, 반복실험을 통하여 white muscle과 red muscle간에 발현의 차이를 보이는 5개의 단백질 spot을 확인할 수 있었다. 5개의 spot 중 4개의 단백질은 측정된 분자량과 pI값이 troponin I, T 및 myoglobin의 수치값과 유사한 것으로 확인되었다. 그러나, 1개의 spot은 오차범위 내에서 유사한 단백질을 확인할 수 없었다. 5개의 단백질 spot중 1개(spot 1)는 white muscle에서, 4개의 spot(spot 2~5)은 red muscle에서 높게 발현됨을 확인하였으며, 특히 spot 4의 경우 white muscle 보다 red muscle에서 평균 14.6배 높게 발현됨을 확인하였다. 본 연구는 근육의 생화학적 특성을 이해하는데 중요한 기초 자료로 활용될 수 있으며, 앞으로 white muscle과 red muscle의 단백질 발현 분석을 통하여 단백질 수준에서의 생화학적 특성에 관한 연구가 충분히 진행되어야 할 것이다.

문덕우복구간 국도비탈면 종비토뿜어붙이기 시험시공 적용사례 (Application Case of Test Construction of Hydro-Seeding Measures with Seed-Fertilizer-Soil Materials on the Slopes Along the National Road Between Munduk and Wubokgu)

  • 전기성;우경진
    • 한국환경복원기술학회지
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    • 제10권6호
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    • pp.130-138
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    • 2007
  • To protect the surface of ground-cutting slopes occurring at the national road substitute detour [roundabout road]construction jobsite between Munduk and Wubokgu within the jurisdiction of Pohang-si and environment-friendly road construction, a test execution of re-vegetation measures on the major slopes was done and the results are as follows : As a result of finding out the number of sprouting individuals on the test construction site, the average number of sprouting individuals on the three test spots by the method of revegetation measures D, revegetation measures A, and revegetation measures B was 1,292 number of per square meter, 1,190 number of per square meter, and 1,095 number of per square meter respectively, which statistics were higher than those of test spot by the revegetation measures C. As a result of finding out living plant's breeding index [weight in dried state], the average dried weight of living plant at the test spot by the method of revegetation measures B, in case of foreign herbal species, was the highest marking 8.96 grams per square meter, and the next was 6.86grams per square meter by the method of revegetation measures D, and the next after was 6.80 grams per square meter by the method of revegetation measures A, and the last 5.93 grams per square meter by the method of revegetation measures C. As a result of finding out the covering degree on the slopes, the same average covering degree of 80% and 77.5% in revegetation measures A and revegetation measures D individually, which showed a somewhat higher covering degree than those of revegetation measures B and revegetation measures C. As a result of finding out appearing plants on the test construction site, seeding plant life was found to be sprouting on all test spot while native and foreign herbal species and herbaceous plant as well as shrubs were growing in good harmony with each other. However, in case of revegetation measures B and revegetation measures C method, foreign plant species are dominantly growing. As a result of inspecting rifts on the slopes and the excavated state by water, there existed cracks in some of base materials only in revegetation measures C method applied spot.

용도 지역 행위 제한을 고려한 국토환경성평가지도 법제적 평가 개선 (Improvement in Legislative Assessment of the Environmental Conservation Value Assessment Map Considering the Restriction on Acts of Special-Purpose Areas)

  • 양현재;김근한;윤정호;전철민;이은정;황소영
    • 한국환경복원기술학회지
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    • 제21권1호
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    • pp.13-30
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    • 2018
  • In terms of environmental friendly land use and objective environmental assessment, legislative assessment items of Environmental Conservation Value Assessment Map (ECVAM) consists of designated areas related to conservation and protection, and areas that are planned to be designated in the future. However, the gap with the reality due to omission of several protection areas and land use regulations, and assessment grades according to 3 division land use map of forest, agricultural land, and urbanized area, results in low application and utilization of ECVAM. Therefore in this study, the legislative assessment of the ECVAM was performed with new assessment items and its new ratings, to suggest an improvement in legislative assessment items of the ECVAM. As a result, legally protected areas of inhabited islands under absolute conservation, special wildlife protection districts, protected marine areas, environmental preservation sea areas, scenic spots, forest protection zone, traditional temple preservation zone, and 45 zone or district related to regulation of land use were additionally designated as new legislative assessment items. New grade ratings were given to each additional assessment items in consideration of the restrictions on acts. As a result of the legislative assessment based on the new assessment items and new grades, the 1st grade area increased by 3.47%, and the 2nd grade area increased by 19.35%. The 3rd grade area decreased by 8.54%, the 4th grade area increased by 2.95%, and 5th grade increased by 2.91%. In addition, the out-of-grade area decreased by 20.14%, considered to be a realistic assessment based on land use. With the improved legislative assessment, it is possible to provide a more accurate environmental assessment map. Increase usage of ECVAM is expected in providing regulations of land use and base data for integrated land management of land environmental planning.

이차원 전기영동을 이용한 Lactobacillus acidophilus Strains의 Shiga Toxin-producing E. coli (STEC) 부착 억제와 관련된 단백질 발현 변화 분석 (Comparison of Specific Proteins of Shiga Toxin-producing E. coli (STEC) Adhesion by Lactobacillus acidophilus Strains Using Two Dimensional Gel Electrophoresis)

  • 김영훈;문용일
    • 한국축산식품학회지
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    • 제26권2호
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    • pp.263-268
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    • 2006
  • 최근 들어 병원성 미생물의 저감화를 위하여 기존의 항생제 계열의 항균물질이 아닌 새로운 개념의 신소재 개발이 활발하게 진행 중에 있다. 특히, 이러한 신개념의 병원성 저감화 소재 중 인간의 장내에 존해하는 probiotics 균주의 특성을 이용하여 병원성 미생물을 예방하는 것은 보다 효과적인 방법 중의 하나가 될 수 있을 것으로 판단된다. 본 실험에서는 HT-29 cell을 대상으로 L. acidophilus 균체와 세포 파쇄물을 대상으로 STEC ATCC 43894의 장 상피세포 부착 억제능력을 측정하였다. 10 mg/mL의 세포 파쇄물이 존재하였을 때 $10^9cfu/mL$의 균체가 존재했을 때와 유사한 수준으로 STEC ATCC 43894의 부착 저해 효과가 관찰되었다. 하지만, L. acidophilus A4의 상등액에서는 그 저해 효과가 세포 파쇄물의 $5{\sim}10%$ 정도 수준으로 관찰되어 그 효과는 매우 적은 것으로 판단되었다. 또한, L. acidophilus A4의 세포 파쇄물이 STEC의 부착에 미치는 영향을 관찰하기 위하여 10mg/mL의 세포 파쇄물이 첨가된 배지에서 STEC의 단백질발현 양상을 확인하였다. 각 gel의 image에서 평균적으로 800개의 spot을 관찰할 수 있었으며 이중 2배 이상의 발현차이를 보이는 13개의 spot을 선발하였다. 7개의 spot은 세포파쇄물이 첨가되었을 때 발현이 증가하였으며 3개의 spot은 발현이 감소하였다. 흥미롭게도 3개의 단백질 spot은 세포파쇄물이 존재할 때만 발현되는 것을 확인하였다. 명확하지는 않지만 이러한 L. acidophilus A4의 세포 파쇄물에 존재하는 물질은 (1)STEC의 부착과 관련된 특정 단백질의 발현을 저해하거나 (2)STEC과 장상 피세포에서의 수용체 경합을 통해 부착을 억제하는 것으로 생각된다. 앞으로 이와 관련된 보다 세부적인 작용 메카니즘 연구 및 생화학적연구가 필요할 것으로 판단된다.

염소(鹽素) 및 염화수소(鹽化水素)가스가 수도(水稻)와 대두(大豆)에 미치는 영향(影響) (Effects of Chlorine and Hydrogen Chloride Gas Fumigation on Rice and Soybean Plants)

  • 김복영;김규식;한기학
    • 한국환경농학회지
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    • 제1권1호
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    • pp.53-58
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    • 1982
  • 수도(水稻) 및 대두(大豆)를 pot재배(栽培)하여 가스접촉실내(接觸室內)에서 $Cl_2$가스 및 HCl가스를 0.1, 0.25, 0.50, $1.0g/m^3$의 농도(濃度)로 1시간(時間)씩 접촉(接觸)시켜 가스접촉후(接觸後)에 나타나는 피해증상(被害症狀), 피해엽률(被害葉率), 수풍(收豊) 및 chlorophyll함양등(含量等)을 조사(調査)한 결과(結果)는 다음과 같다. 1) 염소(鹽素)가스는 수도(水稻), 대두(大豆) 모두 엽전면(葉全面)에 회백색(灰白色)의 미세(微細)한 반점(斑點)이 나타나며 심(甚)할 경우(境遇)는 백색(白色)으로 고사(枯死)하나, 염화수소(鹽化水素)가스는 엽(葉)의 가장자리에서부터 회백색(灰白色)으로 고사(枯死)한다. 2) 가스농도(濃度) 증가(增加)에 따라서 감수(減收)가 컸으며 수도(水稻)는 염화수소(鹽化水素)가스에서 대두(大豆)는 염소(鹽素)가스에서 피해(被害)가 컸다. 3) 동일농도(同一濃度)에서의 피해엽률(被害葉率)은 염소(鹽素)가스에서는 대두(大豆)가, 염화수소(鹽化水素)가스에서는 수도(水稻)가 크게 나타났다. 4) 수도엽(水稻葉)의 chlorophyll함량(含量)은염소(鹽素)가스접촉(接觸)이 염화수소(鹽化水素)가스 접촉(接觸)보다 피해(被害)가 적었다. 5) 수도엽(水稻葉)의 chlorophyll함양(含量)과 피해엽률(被害葉率)과는 고도(高度)의 유의성(有意性)있는 부(否)의 상관(相關)을 나타내었다.

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진핵세포에서 DNA 회복에 관련된 HRD3 유전자의 분리, 발현 및 특성 연구 (Study on Expression and Characterization of HRD3 Gene Related DNA Repair from Eukaryotic Cells)

  • Shin, Su-Hwa;Park, In-Soon
    • 생명과학회지
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    • 제14권2호
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    • pp.325-330
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    • 2004
  • 효모에 있어 자외선에 의한 절제회복 관여 DNA회복유전자가 많이 알려져 있으나, 이들이 어떤 기능을 하는지는 아직 잘 알려져 있지 않다. 본 연구에서는 자외선 조사 시 절제회복의 초기 단계에 절대적으로 필요한 RAD3 유전자와 유사한 유전자인 HRD3 유전자를 분열형 효모인 Schizosaccharomyces pombe에서 분리하여 그 특성을 연구하였다. 이 결과 분리한 유전자는 효모 RAD3 유전자와 염기서열에서 약 70%이상의 유사성을 보였다. 이 유전자의 염기서열 결과 유전자 산물의 분자량은 75 kDa였다. 2-D gel 결과 과잉발현 시 HRD3 단백질은 숙주 단백질의 합성 억제 또는 분해 촉진을 유발하여 숙주세포인 대장균에 독성초과를 나타내었다. HRD3 유전자와 lacZ 유전자를 융합시킨 여러 가지 재조합 vector를 만들어 이들 융합단백질을 분리, 연구 한 결과 HRD3 단백질의 카르복실 말단부분이 효모에 있어서 DNA회복기능과 대장균에서의 독성효과를 나타내는 중요부위임이 확인되었다.

AZ91 마그네슘 합금의 플라즈마 전해산화 피막 형성 및 물성에 미치는 0.1 M NaOH + 0.05 M NaF 용액 중 Na2SiO3 농도의 영향 (Formation Behavior and Properties of PEO Films on AZ91 Mg Alloy in 0.1 M NaOH + 0.05 M NaF Solution Containing Various Na2SiO3 Concentrations)

  • 권두영;송풍근;문성모
    • 한국표면공학회지
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    • 제53권2호
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    • pp.59-66
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    • 2020
  • Effects of Na2SiO3 concentration added into 0.1 M NaOH + 0.05 M NaF solution on the formation behavior and properties of PEO films on AZ91 Mg alloy were investigated under 1200 Hz of alternating current (AC) by voltage-time curves, in-situ observation of arc generation behavior and measurements of film thickness, surface roughness and micro vickers hardness. In the absence of Na2SiO3 in the 0.1 M NaOH + 0.05 M NaF solution, about 4 ㎛ thick PEO film was formed within 1 min and then PEO film did not grow but white spots were formed by local burning. Addition of Na2SiO3 up to 0.2 M caused more increased formation voltage and growth of PEO film with uniform generation of arcs. Addition of Na2SiO3 from 0.2 M to 0.4 M showed nearly the same voltage-time behavior and uniform arc generation. Addition of Na2SiO3 more than 0.5 M resulted in a decrease of formation voltage and non-uniform arc generation due to local burning. PEO film growth rate increased with increasing added Na2SiO3 concentration but maximum PEO film thickness was limited by local burning if added Na2SiO3 concentration is higher than 0.5 M. Surface roughness of PEO film increased with increasing added Na2SiO3 concentration and appeared to be proportional to the PEO film thickness. PEO film hardness increased with increasing added Na2SiO3 concentration and reached a steady-state value of about 930 HV at more than 0.5 M of added Na2SiO3 concentration.

삼요소시비량과 수도생육상태가 백엽고병(벼, 흰빛잎마름병) 발병에 미치는 영향 (Effects of N,P,K fertilizer levels and growth condition on the development of Bacterial leaf blight in rice plants)

  • 김정화;조용섭
    • 한국응용곤충학회지
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    • 제9권1호
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    • pp.7-13
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    • 1970
  • 1. 본 병에 강한 감수성품종인 금남풍을 사용하였고, Xanthomonas oyzae 6526 균주를 반합성감자배양기에 이식, $28^{\circ}C$에 3일간 사면배양한 뒤 균부유액을 만들어 상엽 상단부에 단침접종하고 14일 뒤에 확대된 병반길이를 조사하였다. 시험구설정은 3요소를 각각 무비$\cdot$표준비$\cdot$배비의 3개 수준으로 시비하여 총 27개구를 설정하고 3반복 임의배치하였다. 2. 질소질비료는 인산$\cdot$가리의 시용량에 크게 좌우되지 않았고 증시할 수록 발병이 심하였다. 3. 인산은 표준량시용하였을 때만 다소 발병억제효과의 경향이 있었으나 배비하게 되면 오히려 무비구보다도 터 발병이 촉진되었다. 4. 가리를 표준양시용하였을에 발병이 현저히 줄어들으나 시용량과 비례하지 않았고 배비하면 인산에서 처럼 다시 발병이 촉진되었다. 5. 출수시기가 늦어질 수록, 그리고 수수가 많을수록 발병이 심하였다. 6. 삼요소를 다같이 표준량시용하였을 때가 가장 발병이 적었는데, 작물의 영양조성은 비료의 종류, 시용량, 시용방법에 따라 좌우되며 발병도 기주식물의 조성과 밀접한 관계가 있으므로 시비법을 적절히 조절하면 본 병의 피해를 많이 감소시킬 수 있을 것으로 기대된다.

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