• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• 제26권1호
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• pp.83-87
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• 1999

Since the blastocyst is broken and spreads out on a flat plastic culture dish (two dimensional culture) during in vitro development, it has been difficult to study the implantation process. It also has been difficult to analyse the interactions between endometrial epithelial and stromal cells because of the lack of a long-term in vitro model which can stimulate in vivo characteristics, as these cells eventually fail to proliferate or cease to express differentiated functions. Recently nontransformed cell lines, CUE-P and CUS-V2, derived from rat endometrial epithelium and stroma were reported. In this study, morphology of CUE-P and CUS-V2 was examined and oxytocin gene expression by CUE-P cells was demonstrated by RT-PCR. The CUE-P cells have a cuboidal morphology and CUS-V2 cells resemble fibroblast and exhibit a spindle-like morphology. In RT-PCR, same size of PCR products of oxytocin gene at hypothalamus, uterus and CUE-P cells were demonstrated. These results showed three dimensional culture system could be made by using the new cell lines.

• IMMUNE NETWORK
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• 제7권3호
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• pp.117-123
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• 2007

Background: This study was designed to investigate the role of the hepatocyte growth factor (HGF) with regards to differentiation of somatic stem cells originating from the human umbilical cord blood (UCB) into hepatic lineage cells in vitro culture system. Methods: Mononuclear cells from UCB were cultured with and without HGF based on the fibroblast growth factor (FGF)-1, FGF-2, and stem cell factor. The cultured cells were confirmed by immunofluorescent staining analysis with albumin (ALB), cytokeratin-19 (CK-19), and proliferating cell nuclear antigen (PCNA) MoAb. ALB and CK-18 mRNA were also evaluated by reverse transcription-polymerase chain reaction. In order to observe changes in proliferating capacity with respect to the cultured period, CFSE with affinity to proliferating cells were tagged and later underwent flow cytometry. Results: In the HGF-treated group, cultured cells had a large oval shaped appearance with adherent, but easily detachable characteristics. In the HGF-non treated group, these cells were spindle-shaped with strong adherent characteristics. Expressions of ALB and CK-19 were evident in HGF-treated group compared to non-expression of those in to HGF-non treated group. Dual immunostaining analysis of the ALB producing cells showed presence of PCNA in their nuclei, and ALB and CK-18 mRNA were detected on the 21st day of cultured cells in the HGF-treated group. Conclusion: Our findings suggest that HGF has a pivotal role in differentiating somatic stem cells of human UCB into hepatic lineage cells in vitro.

• 폴리머
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• 제32권5호
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• pp.409-414
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• 2008

전기방사법으로 이온염을 함유하는 TFE/증류수 혼합용매를 이용하여 젤라틴 나노섬유를 제조하였으며, 얻어진 나노섬유의 평균직경은 $110{\sim}125\;nm$였다. 이온염의 농도가 증가할수록 비드의 발생이 줄어들고 균일한 나노섬유 제조가 가능하였다. 이는 이온염의 첨가에 의한 젤라틴 용액의 점도 및 전도도가 증가함에 기인하는 것으로 확인되었다. 특히 일가이온보다 이가이온을 사용할 경우 점도 및 전도도의 증가에 더 효과적이었으며 이들 이온염은 분자간 소수성 상호작용뿐만 아니라 젤라틴 분자의 입체구조 정렬에도 영향을 주었다. 그러나 이온염 농도에 따른 나노섬유의 직경변화는 관찰되지 않았다. 제조된 나노섬유를 이용한 XRD분석 결과 이온염의 농도가 증가할수록 젤라틴 분자의 재결정화에 의해 나노섬유의 결정화도가 높아졌다.

• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• 제49권3호
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• pp.175-184
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• 2022

Objective: The aim of this study was to evaluate the impacts of platelet-rich plasma (PRP) and conditioned medium (CM) derived from endometrial stromal cells on mouse preantral follicle culture in a two-dimensional system to produce competent mature oocytes for fertilization. Methods: In total, 240 preantral follicles were isolated from female mouse ovarian tissue and divided into four groups. The preantral follicles were isolated three times for each group and then cultured, respectively, in the presence of alpha minimum essential medium (control), PRP, CM, and PRP+CM. The in vitro growth, in vitro maturation, and cleavage percentage of the preantral follicles were investigated. Immunocytochemistry (IHC) was also conducted to monitor the meiotic progression of the oocytes. Additionally, the mRNA expression levels of the two folliculogenesis-related genes (Gdf9 and Bmp15) and two apoptosis-related genes (Bcl2 and Bax) were investigated using real-time polymerase chain reaction. Results: In the PRP, CM, and PRP+CM groups, the preantral follicle maturation (evaluated by identifying polar bodies) were greater than the control group. The cleavage rate in the CM, and PRP+CM groups were also greater than the control group. IHC analysis demonstrated that in each treatment group, meiotic spindle was normal. In the PRP+CM group, the gene expression levels of Bmp15, Gdf9, and Bcl2 were greater than in the other groups. The Bax gene was more strongly expressed in the PRP and control groups than in the other groups. Conclusion: Overall, the present study suggests that the combination of CM and PRP can effectively increase the growth and cleavage rate of mouse preantral follicles in vitro.

• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• 제50권3호
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• pp.177-184
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• 2023

Objective: Reconstructed oocytes after polar body genome transfer constitute a potential therapeutic option for patients with a history of embryo fragmentation and advanced maternal age. However, the rescue of genetic material from the first polar body (PB1) through introduction into the donor cytoplasm is not yet ready for clinical application. Methods: Eighty-five oocytes were obtained following in vitro maturation (IVM) and divided into two groups: PB1 nuclear transfer (PB1NT; n=54) and control (n=31). Following enucleation and PB1 genomic transfer, PB1 fusion was assessed. Subsequently, all fused oocytes underwent intracytoplasmic sperm injection (ICSI) and were cultured in an incubator under a time-lapse monitoring system to evaluate fertilization, embryonic morphokinetic parameters, and cleavage patterns. Results: Following enucleation and fusion, 77.14% of oocytes survived, and 92.59% of polar bodies (PBs) fused. However, the normal fertilization rate was lower in the PB1NT group than in the control group (56.41% vs. 92%, p=0.002). No significant differences were observed in embryo kinetics between the groups, but a significant difference was detected in embryo developmental arrest after the four-cell stage, along with abnormal cleavage division in the PB1NT group. This was followed by significant between-group differences in the implantation potential rate and euploidy status. Most embryos in the PB1NT group had at least one abnormal cleavage division (93.3%, p=0.001). Conclusion: Fresh PB1NT oocytes successfully produced normal zygotes following PB fusion and ICSI in IVM oocytes. However, this was accompanied by low efficiency in developing into cleavage embryos, along with an increase in abnormal cleavage patterns.

• Journal of Veterinary Science
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• 제24권1호
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• pp.4.1-4.16
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• 2023

Background: In vitro culture of preantral follicles is a promising technology for fertility preservation. Objectives: This study aims to investigate an optimized three-dimensional (3D) fetal bovine serum (FBS)-free preantral follicle culture system having a simple and easy operation. Methods: The isolated follicles from mouse ovaries were randomly divided in an ultra-low attachment 96-well plates supplement with FBS or bovine serum albumin (BSA) culture or encapsulated with an alginate supplement with FBS or BSA culture. Meanwhile, estradiol (E₂) concentration was assessed through enzyme-linked immunosorbent assay of culture supernatants. The diameter of follicular growth was measured, and the lumen of the follicle was photographed. Spindle microtubules of oocytes were detected via immunofluorescence. The ability of oocytes to fertilize was assessed using in vitro fertilization. Results: The diameters were larger for the growing secondary follicles cultured in ultra-low attachment 96-well plates than in the alginate gel on days 6, 8, and 10 (p < 0.05). Meanwhile, the E2 concentration in the BSA-supplemented medium was significantly higher in the alginate gel than in the other three groups on days 6 and 8 (p < 0.05), and the oocytes in the FBS-free system could complete meiosis and fertilization in vitro. Conclusions: The present study furnishes insights into the mature oocytes obtained from the 3D culture of the preantral follicle by using ultra-low attachment 96-well plate with an FBS-free system in vitro and supports the clinical practices to achieve competent, mature oocytes for in vitro fertilization.

• Maxillofacial Plastic and Reconstructive Surgery
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• 제16권3호
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• pp.321-347
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• 1994

교근의 근방추에서 유래하여 단일 연접성 고유수용성 악반사에 관여하는 구심성 신경섬유를 단일 축삭내 HRP 주입기법으로 염색해서 삼차신경 운동핵에서의 type I a 및 type II 신경 섬유 종말부의 미세 구조 및 연접양상을 분석한 결과는 다음과 같았다. ${\cdot}$ 대부분의 표식 종말지는 dome, 길쭉한 형태 혹은 둥근 모양을 나타내었으며, scalloped 형태 혹은 glomerulus 형태는 관찰되지 않았다. ${\cdot}$ 표식 종말지는 다수의 균일한 형태 및 크기(49-52nm) 의 투명한 구형의 소포와 때때로 소수의 치밀소포(직경:87-114nm)를 함유하고 있었다. ${\cdot}$ 표식 종말지의 크기는 type I a가 장경($1.91{\pm}0.63{\mu}m$), 단경($0.94{\pm}0.28{\mu}m$) 및 평균 직경($1.42{\pm}0.40{\mu}m$)에서 type II보다 작았다(p<0.05). ${\cdot}$ 표식 종말지는 신경원체 혹은 가지돌기와 비대칭 연접을 이루었으며, 다형소포와 같은 연접소포들을 함유하는 종말부와의 연접은 관찰되지 않았다. ${\cdot}$ 대부분의 type I a (94.9%) 및 type II(85.9%) 종말지는 단지 1개의 neuronal propile과 연접을 이루었으며, 4개 이상의 neuronal propile들과 연접을 이루는 경우는 관찰되지 않았다. ${\cdot}$ type I a 종말지에 있어서 대부분(87.2%)은 신경원체 및 근심부 가지돌기와 연접을 이루는데 반해 type II 종말지는 다수가(64.8%) 원심부 가지돌기와 연접을 이루었으며 신경원체 및 근심부 가지돌기와 연접을 이루는 경우는 35.2%에 그쳤다. 이상을 종합해 보면 단일 연접성 악반사를 일으키는 구심성 신경섬유 종말부는 삼차운동신경핵에서, 동통 및 촉각 또는 감각분별등 복잡한 감각을 처리하는 감각핵에서 보다 연접후신경원에 강력한 흥분성 신호를 전달하며 또한 대단히 단순한 연접양상을 이루는 것으로 나타났다.

• 콘크리트학회논문집
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• 제16권2호
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• pp.241-248
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• 2004

콘크리트의 강도증진과 내구성 및 유동성 향상을 위하여 사용되는 광물혼화재가 혼합된 시멘트페이스트 시스템의 레올로지 특성이 연구되었다. 그리고 시멘트페이스트는 일성분, 이성분, 삼성분 혼합 페이스트 시스템으로 구성되었다. 페이스트 시스템의 레올로지 특성을 평가하기 위하여 Haake사의 Rotolnsco RT 20 레오미터가 사용되었다. 레올로지 특성을 평가한 결과 다음과 같은 실험 결과를 얻었다. 일성분 페이스트 시스템의 경우, 고성능 감수제의 첨가량이 증가함에 따라 레올로지 특성들이 상당히 개선된다. 이성분 페이스트 시스템에서는 고로슬래그와 플라이애쉬의 치환율이 증가함에 따라 비치환된 시스템의 경우보다 항복응력과 소성점도는 감소된다. 실리카 퓸이 치환된 이성분 페이스트 시스템에서는 실리카 퓸의 치환율이 증가함에 따라 항복응력과 소성점도의 값이 급격히 증가된다. 삼성분 페이스트 시스템에서는 OPC-BFS-SF와 OPC-FA-SF 페이스트 시스템 두 경우 모두 실리카 퓸을 단독으로 치환한 페이스트 시스템과 비교하여 레올로지 특성이 향상된다. 이성분과 삼성분 페이스트 시스템 모두 플라이애쉬 보다 고로슬래그를 배합에 넣어 사용할 때 레올로지 특성이 좀 더 개선된다.

• 한국식물병리학회지
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• 제1권3호
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• pp.199-206
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• 1985

바이로이드(viroid)는 그의 완전한 분자구조가 처음으로 밝혀진 식물병원체이며, coat-protein이 제거된 viral-RNA가 아닌 바이로이드로서의 독립적인 특성과 병원성을 가진 작은 크기의 병원체임이 밝혀짐으로써 미생물의 영역을 한 단계 넓혀서 생각하도록 하였다. 일반적으로 생각되는 미생물 즉 곰팡이, 세균, 마이코플라스마, 바이러스들이 동물과 식물 및 인체에 병원체로서 작용하는데 바이로이드는 현재까지 고등식물에서만 발견되는 병원체이다. 다라서 바이로이드가 동물 및 인체에서 아직까지 밝혀지지 않고 있는 병의 병원체일 가능성이 있으므로 이에 대한 연구가 계속되고 있다. 바이로이드는 작은 크기임에도 독자적인 자기증식을 하는 능력과 생존을 유지하는 특성이 있기 때문에 이들의 분자구조 및 생물적 특성을 연구하는데 좋은 자료가 되며, 최근에 급속한 진전을 보이고 있는 분자생물학 및 유전공학적인 방법과 기술을 이용하여 Viroid의 여러 가지 성질과 생물학적인 위치에 대한 연구가 활발히 진행되고 있다. 앞으로 연구가 계속되어 Viroid의 증식과 병원성에 대한 문제가 해결된다면, 바이로이드병의 예방이나 치료법이 확립된 것이며 또한 목적하는 유전자를 운반하는 Vector로 개발하여 생물공학 분야에 적극적으로 활용할 수 있을 것이다.

• 헤리티지:역사와 과학
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• 제38권
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• pp.285-303
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• 2005

당대(唐代)의 출토유물인 명기와 낙양명원기를 중심으로 당대의 귀족 정원을 고찰한 결과, 산수경관인 가산과 연못이 정원의 중심이 되고, 여기에 누정을 짓고 화목을 심었다. 가산은 치석첩산(置石疊山)하고, 동굴을 만들었고, 명기의 석가산은 산지산세(山地山勢)는 험준, 층만첩장(層巒疊嶂), 녹색이 깔린 자리와 같고, 새들이 혹 산간에서 노래하고, 연못 호반에서 물을 마신다 라고 표현되었다. 연못은 착지인수(鑿池引水)하고 수계가 발달하였으며, 누정 건물로는 청(廳), 당(堂), 관(館), 정(亭), 대(臺), 누(樓), 각(閣), 사(榭) 등이 있다. 조경식물로는 대나무, 연꽃, 모란을 가장 많이 볼 수 있고, 향나무, 소나무, 회, 잣나무, 전나무, 오동, 가래, 복숭아, 오얏, 매화, 살구, 국화, 칡덩쿨 등을 식재했던 것을 알 수 있다. 위와 같이 중국 당대의 원림은 풍부하고 다양하며 뛰어난 원림 양식으로 원림발달의 전성기를 구가하였고, 문화교섭에 의해 동시대의 통일신라의 민간 특히 귀족의 주택 정원도 사절유택(四節遊宅) 등의 기록에 의하면 한국 조경 발달사에서 전성기에 해당될 것으로 유추할 수 있다.