Kim, Ki-Sun;Hwang, Kyung-A;Kim, Hyoung-Chin;Nam, Ki-Hoan;Choi, Kyung-Chul
한국수정란이식학회지
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제26권4호
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pp.287-296
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2011
Mammalian fertilization is a complex cascade process consisting of sperm migration through the female reproductive tract, physiological changes to sperm such as sperm capacitation and acrosome reaction, and sperm-egg interaction in the oviduct in vivo. On the other hand, in vitro fertilization (IVF) is a process by which egg cells are fertilized by sperm outside the body: in vitro. IVF has been used for a variety of purposes in reproductive biotechnology for human and animals. The discovery of sperm capacitation in 1951 promoted the development of IVF technology. In the initial stage of IVF, sperm capacitation in preincubation medium was shown to be essential to fuse with eggs. Besides, sperms should detour some of the in vivo regulations for IVF. This review introduces a general mammalian fertilization process, including sperm capacitation, removal of cumulus matrix, acrosome reaction, and sperm-egg fusion and focuses on the roles of key biochemical molecules, signal mechanisms, and genes involved during IVF and novel results of sperm-oocyte interaction elucidated in various gene-knockout mice models.
One of recent advances of mammalian fertilization is the understanding of the molecular basis of fertilization. Several proteins localized in sperm nucleus or on sperm surface are necessary for the fertilization process. Protamines, sperm nuclear proteins, are required for normal sperm function that leads to fertilization. Fertilin and cyritestin are sperm surface proteins and essential for sperm-egg binding. Fertilin is also required for sperm transport in the female reproductive tracts. Metalloproteses on sperm plasma membrane are found to play a role in sperm-egg fusion. The functional analysis of these proteins provides a new insight into the molecular mechanisms underlying mammalian fertilization and male fertility.
Egg activation is a crucial step that initiates embryo development upon breaking the meiotic arrest. In mammalian, egg activation is accomplished by fusion with sperm, which induces the repeated intracellular $Ca^{2+}$- increases ($[Ca^{2+}]_i$ oscillation). Researches in mammals support the view of the $[Ca^{2+}]_i$ oscillation and egg activation is triggered by a protein factor from sperm that causes $[Ca^{2+}]_i$ release from endoplasmic reticulum, intracellular $[Ca^{2+}]_i$ store, by persistently activation of phosphoinositide pathway. It represents that the sperm factor generates production of inositol trisphosphate ($IP_3$). Recently a sperm specific form of phospholipase C zeta, referred to as PLCZ was identified. In this paper, we confer the evidence that PLCZ represent the sperm factor that induces $[Ca^{2+}]_i$ oscillation and egg activation and discuss the correlation of PLCZ and infertility.
Fertilization is a complex process comprised of numerous steps. During fertilization, two highly specialized and differentiated cells (sperm and egg) fuse and subsequently trigger the development of an embryo from a quiescent, arrested oocyte. Molecular interactions between the sperm and egg are necessary for regulating the developmental potential of an oocyte, and precise coordination and regulation of gene expression and protein function are critical for proper embryonic development. The nematode Caenorhabditis elegans has emerged as a valuable model system for identifying genes involved in fertilization and the oocyte-to-embryo transition as well as for understanding the molecular mechanisms that govern these processes. In this review, we will address current knowledge of the molecular underpinnings of gamete interactions during fertilization and the oocyte-to-embryo transition in C. elegans. We will also compare our knowledge of these processes in C. elegans to what is known about similar processes in mammalian, specifically mouse, model systems.
Frozen storage of the oocytes has been used in a few mammalian species including mouse, hamster, human and cattle. However, frozen4hawed oocvtes show different sperm penetration on the levels of the zona pellucida and the plasma memhrane when compared with fresh oocytes. To elucidate biological changes occurring during freezing and thawing, we examined the kinetics of sperm penetration into frozen-thawed hamster oocytes. Oocytes obtained from superovulated female golden hamsters were frozen-thawed in an autofreezer according to an established method. Fresh and frozen4hawed oocytes were fertilized in vitro with capacitated hamster spermatozoa after removing the zona pellucida. The oocytes were examined at 1, 2, 3 and 6 h postinsemination. Sperm penetration found to be 1 h delayed in frozen-thawed oocytes. Other parameters such as degree of polyspermy and decondensing sperm heads were not affected by freezing and thawing. The results suggest that freezing and thawing may cause changes in the egg membrane surface and subsequently which leads to delay in the sperm-egg fusion.
Initiation and activation of sperm motility are prerequisite processes for the contact and fusion of male and female gametes at fertilization. The phenomena are under the regulation of cAMP and $Ca^{2+}$ in vertebrates and invertebrates. Mammalian sperm requires $Ca^{2+}$ and cAMP for the activation of sperm motility. Cell signaling for the initiation and activation of sperm motility in the ascidians and salmonid fishes has drawn much attention. In the ascidians, the sperm-activating and attracting factors from unfertilized egg require extracellular $Ca^{2+}$ for activating sperm motility and eliciting chemotactic behavior toward the egg. On the other hand, the cAMP-dependent phosphorylation of protein is essential for the initiation of sperm motility in salmonid fishes. A decrease of the environmental $K^+$ concentration surrounding the spawned sperm causes $K^+$ efflux and $Ca^{2+}$ influx through the specific $K^+$ channel and dihydropyridine-sensitive L-/T-type $Ca^{2+}$ channel, respectively, thereby leading to the membrane hyperpolarization. The membrane hyperpolarization induces synthesis of cAMP, which triggers further cell signaling processes, such as cAMP-dependent protein phosphorylation, to initiate sperm motility in salmonid fishes. This article reviews the studies on the physiological mechanisms of sperm motility and its cell signaling in aquatic species.
정자의 운동개시는 수정시에 정자와 난자가 만나기 위한 전제조건이다. 동물의 정자는 CAMP와Ca2'의 조절기구에 의해서 정자의 운동개시가 일어난다. 정자운동 활성 및 개시를 위한 세포 신호전달기구는 멍게류와 연어과 어류에서 많은 연구가 이루어져 왔다. 멍게류의 경우, 난에서 분비되는 정자 활성 및 유인물질(sperm-activating and -attracting factor)은 정자 활성 및 난으로의 유인을 위하여 외부의 $Ca^{2+}$을 요구한다. 한편 연어과 어류의 정자에서는 Cyclic AMP 의존형의 단백질 인산화가 정자 운동개시 기구에 관여한다. 방정된 정자 주위의 $K^{+}$ 농도의 감소는 특정한 $K^{+}$ channel 및 dihydropyridine 감수성의 L-/T- type $Ca^{2+}$ channel을 통한 $K^{+}$ 유출과 $Ca^{2+}$ 유입에 의해 세포막의 과분극과 세포내 $Ca^{2+}$ 이온의 농도증가를 가져온다. 세포막의 과분극에 의해서 합성된 cyclic AMP는 정자 운동개시의 주요기구인 cyclic AMP의존형의 단백질 인산화를 유도한다.
Four important attributes for successful fertilization by a spermatozoon are (ⅰ) correct morphology, (ⅱ) correct presentation of egg recognition and fusion molecules, (ⅲ) progressive motility and (ⅳ), correct transfer of signalling molecules from sperm to egg for activation of development. In this presentation, these topics will be described and illustrated with emphasis on the endogenous control mechanisms that enable spermatozoa to respond to external signals. (omitted)
The main purpose of this study is to estimate the effect of adding Tea-N-Tris (TES) to the freezing buffer for miniature pig sperm. In particular, we attempted to identify the association between the MMPs expression and the fertility and viability of frozen sperm from each extender (LEY (Lactose Egg-Yolk), TLE (TES + LEY), TFGE (TES + Fructose + Glucose Egg-Yolk)). In accordance with this, Hypoosmotic Swelling Test (HOST) respond test was the lowest among sperms frozen in LEY while the highest HOST respond was observed among sperms frozen in TLE. Furthermore, we observed MMPs expression in all sperm groups, with pro-MMP showing lower expression than active MMPs. The expression of MMP-9 and MMP-2 was the highest in sperms frozen in LEY, Meanwhile, sperms from the TFGE and TLE group showed lower level of MMP-9 and MMP-2 expression in the order of TLE being the lowest. LEY group showed lower rate of blastocyst development than the TES supplement group, although the difference was not statistically significant. Meanwhile the rate of blastocyst development appeared similar when sperms from TLE and TFGE group were used for IVF. Together, these results indicate that adding Tea-N-Tris to the sperm freezing buffer only suppresses MMPs protein activation but also maximize in-vitro fertility, providing a means to improve the success rate in the in vitro manipulation of miniature pig sperm.
Lonicera caerulea (Honey berry, HB) has been used in medical treatment in Russia, Japan, China and Korea. It has high level of vitamin C and polyphenolics. Polyphenolics can improve anti-inflammatory effect and prevent cancer, diabetes mellitus type 2. Also, Vitamin C is a representative anti-oxidant. however, it is still unknown what effect it will have on the oxidation stress of the reproductive system. In previous studies, ROS can be produced when it is exposed to heat stress and has negative effect on sperm's maturation, capacitation, hyperactivation, acrosome reaction and fusion of egg and sperm. Therefore, the purpose of this study is to investigate the antioxidant effects of L. Caerulea on the sperm and mice. At first, it conducted using ICR mouse (n = 20) for 4 weeks. There are four groups of mice (n = 5 per group). Also, L. Caerulea was taken by oral gavage. Group I (control) kept at 23℃-27℃ and administer D.W (0.5 mL/day), Likewise, Group II (HB) kept at room temperature but gave HB (250 mg/kg, 0.5 mL/day), Group III (HB + HS) received heat stress (40℃) using hyperthermia induction chamber and gave HB at same dose. and Group IV (HS) exposed heat stress only. Mainly, we showed degree of gene expression using Western blot in SOD, HSP 70, 17β-HSD and Real-time PCR. It can find correlation between intracellular activity like steroid hormone, apoptosis under ROS and antioxidant activity of L. Caerulea.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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