Cell-Cell interaction and the extracellular matrix (ECM) are belisved to play essential roles during in vitro culturing of primary hepatocytes in the control of differentiation and in the maintenance of tissue spcific functions. The objective of this study was to examine the effects of degree of cell-cell contact (DCC) on liver sperific function of rat promary hepatocytes. Hepatocyte aggregates with various with various degrees of cell-cell contantact, I. e., dispersed cell, longish aggregate, rugged aggregate, and smooth spheroid were obtained at 1, 5-6, 15-20, and 36-48 hrs, respectively in suspension cultures grown in spinner flasks embedded in Caalginate bead and collagen gel in order. The may result from mass transfer limitation and shear damage caused by agitation during aggregation. The rugged aggregate showed a higer viability and albumin secretion rate than the dispersed cells or the other aggregates. This result indicates the possible enhancement of a bioartificial liver's (BAL) performance using primary hepatocytes and the reduction in time to prepare a BAL through optimization of the immobilization time.
We previously demonstrated that Bordetella bronchiseptica (B. bronchiseptica) antigen (Ag) enhances the Mycoplasma hyopneumoniae Ag-specific immune response. The focus of this study was whether acellular bacterin of B. bronchiseptica could be used as an adjuvant to increase antigen-presenting capability of dendritic cells (DCs) by increasing the level of activation. The metabolic activity of DCs was increased by B. bronchiseptica, similar to lipopolysaccharide (LPS). Flow cytometry analysis revealed that B. bronchiseptica increases the expression of major histocompatibility complex class-2, cluster of differentiation (CD)40, CD54, and CD86 which are closely related to DC-mediated immune responses. B. bronchiseptica enhanced the production of cytokines related to adaptive immune responses. Furthermore, the survival rate of B. bronchiseptica-injected groups was 100% at 15 and 20 mg/kg doses, whereas that of LPS-injected groups was only 20%, 0% at 15 and 20 mg/kg doses respectively, and so B. bronchiseptica is likely to be safer than LPS. Taken together, these results indicate that B. bronchiseptica can be used as an adjuvant to enhance the antigen-presenting capability of DCs. B. bronchiseptica is a candidate for producing vaccines, especially in case of DC-mediating efficacy and safety demands. This study provides researchers and clinicians with valuable information regarding the usage of B. bronchiseptica as a safe bacteria-derived immunostimulating agent for developing efficient vaccines.
Neural cell survival is an essential concern in the aging brain and many diseases of the central nervous system. Neural transplantation of the stem cells are already applied to clinical trials for many degenerative neurological diseases, including Huntington's disease, Parkinson's disease, and strokes. A critical problem of the neural transplantation is how to reduce their apoptosis and improve cell survival. Neurotrophic factors generally contribute as extrinsic cues to promote cell survival of specific neurons in the developing mammalian brains, but the survival factor for neural stem cell is poorly defined. To understand the mechanism controlling stem cell death and improve cell survival of the transplanted stem cells, we investigated the effect of plausible neurotrophic factors on stem cell survival. The neural stem cell, HiB5, when treated with PDGF prior to transplantation, survived better than cells without PDGF. The resulting survival rate was two fold for four weeks and up to three fold for twelve weeks. When transplanted into dorsal hippocampus, they migrated along hippocampal alveus and integrated into pyramidal cell layers and dentate granule cell layers in an inside out sequence, which is perhaps the endogenous pathway that is similar to that in embryonic neurogenesis. Promotion of the long term-survival and differentiation of the transplanted neural precursors by PDGF may facilitate regeneration in the aging adult brain and probably in the injury sites of the brain.
Sorghum cv. Pioneer 93 1, sorghum-sudangrass hybrid cv. Sioux and maize plant cv. Blizzard were assayed for toxic concentrations of nitrate-nitrogen ($NO_3$-N) and their relationship to morphological characteristics and environmental temperature in a field and phytotron trial. In the phytotron, sorghum and maize plants ranging from emergence to heading stage, were grown under different day/night temperatures of 30125, 25/20,28/18 and 1818 degree C. Nitrate-nitrogen in sorghum and maize plants was accumulated mainly in stems. Therefore nitrate concentration in the young plants was increased as development of stalks advanced and was highest at the stage of 3-4 leaves, when the plants had a leaf weight ratio 0.78-0.80 g/g plant weight. However, nitrate concentrations of the plant decreased as morphological development progressed, especially from the stage of growing point differentiation. Correlation coefficients showed a positive correlation of nitrate concentration with leaf weight ratio, leaf area ratio and specific leaf area, while plant height, dry matter percentage and absolute growth rate showed a negative association with TEX>$NO_3$-N ($P{\le}0.1$%). Cyanogenic glycosides, total nitrogen and crude protein were close associated with nitrate accumulation, and positively significant ($P{\le}0.1$%). High temperature over 30/25^{\circ}C.$ for 3 weeks increased N-uptake and dry matter accumulation, but reduced nitrate concentration. Under cold temperature below 18/8^{\circ}C.$ concentration of nitrate-N was increased in spite of its limited nitrogen uptake and plant growth.
The 'Excellent Quality Competitive Enterprises' selection system began with the government's selection and announcement of 'Top 100 Excellent Quality Competitive Enterprises' in 1997 in accordance with Article 6 of the Quality Management and Safety Control of Industrial Products Act and Article 5 (Selection of excellent quality management enterprises, etc.) of the Act's Enforcement Decree. The content of the research and analysis results is summarized as follows: 1. The participation and confidence of enterprises in the differentiation of the assessment system for the excellent quality competitive enterprises selection system is high: from the initial year to the present, 10% of enterprises have participated in the system for over 10 years and since 2000 participating enterprises have been on a steady rise. 2. The distribution of participating enterprises is not limited to any specific region but is spread nationwide, while the participation scale and business types also are being evenly distributed. 3. From the perspective of management performance, as compared with the average of domestic manufacturing businesses or that of U.S. manufacturing businesses, an analysis found that among management results, the excellent quality competitive enterprises achieved far higher sales growth and operating profit rate on sales, however their own capital ratio and debt to equity ratio appeared to be slightly higher.
한국감성과학회 2000년도 춘계 학술대회 및 국제 감성공학 심포지움 논문집 Proceeding of the 2000 Spring Conference of KOSES and International Sensibility Ergonomics Symposium
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pp.15-25
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2000
Cardiac, respiratory, electrodermal and frontal (F3, F4) EEG responses were analyzed and compared during to slides of International Affective Picture System (IAPS) in the study on 42 students. Physiological responses during 20s of exposure to slides intended to elicit happiness (nurturant and erotic), sadness, disgust, surprise, fear or anger emotions were quite similar and were expressed in heart rate (HR) deceleration, decreased HR variability (HRV), specific SCR, increased non-specific SCR frequency (N-SCR), and EEG changes exhibited in theta increase, alpha-blocking and increased beta activity, and frontal asymmetry. However, some emotions demonstrated variations of the response magnitudes, enabling to differentiate some paris of emotions by several physiological parameters. The profiles showed higher magnitudes of HRV and EEG responses in exciting (i.e., erotic) and higher cardiac and respiratory responses in surprise. The most different pairs were exciting-surprise (by HR, HRV, theta, and alpha asymmetry), exciting-sadness (by theta, alpha, and alpha asymmetry), and exciting-fear (by HRV, theta, F3 alpha, and alpha asymmetry). Nurturant happiness yielded the least differentiation. Differences were found as well within negative emotions, e.g., anger-sadness were differentiated by HRV and theta asymmetry, while disgust-fear by N-SCR and beta asymmetry. Obtained results suggest that magnitudes of profiles of physiological variables differentiate emotions evoked by affective pictures, despite that the patterns of most responses were featured by qualitative similarity in given passive viewing context.
Plasma protein which has been known as one of nonspecific immunostimulators was added to feedstuff to examine its effect on the enhancement of cellular immune response in porcine immune system. A total of 40 piglets, 20 male and 20 female each, were fed for 30 days with or without plasma protein. The peripheral blood were collected and analyzed for the investigation of leukocyte subpopulations and their activities by using a panel of monoclonal antibodies specific to porcine leukocyte differentiation antigens and flow cytometry. The results obtained as follows. 1. Total weight gain, daily feed intake and feed conversion rate for 10 days were significantly improved to 56%, 20% and 22% in the piglets fed plasma protein, respectively. 2. A significant increase in N (null or non T/non B) cells was also noticed. Leukocyte proportion from piglets fed plasma protein was 20.2-24.7%, otherwise that from piglets fed without plasma protein was 12.3-13.4%, respectively. 3. A significant increase in the proportion of B cells and cells expressing poCD1 was not found in piglets fed plasma protein. 4. Reaction with monoclonal antibodies specific to adhesion molecules, poCD11a, poCD11b, poCD44 and poCD45A and poCD45B, has shown that leukocyte subpopulation from piglets fed plasma protein did not significantly higher than that from piglets fed without plasma protein. 5. Total proportion of granulocytes and monocytes was about 50% in both group and the proportion after treated with Hypaque/Ficoll was 2.7% and 5.8% in each group, respectively.
Background: Differentiating morphologic features based on hematoxylin-eosin (HE) staining is the most common method to classify pathological subtypes of non-small-cell lung cancer (NSCLC). However, its accuracy and inter-observer reproducibility in pathological diagnosis of poorly differentiated NSCLC remained to be improved. Materials and Methods: We attempted to explore the role of immunohistochemistry (IHC) staining in diagnosing pulmonary squamous cell carcinoma (SQCC) with poorly differentiated features by HE staining or with elevated serum adenocarcinoma-specific tumor markers (AD-TMs). We also compared the difference of epidermal growth factor receptor (EGFR) mutation rate between patients with confirmed SQCC and those with revised pathological subtype. Logistic regression analyses were used to test the association between different factors and diagnostic accuracy. Results: A total of 132 patients who met the eligible criteria and had adequate specimens for IHC confirmation were included. Pathological revised cases in poor differentiated subgroup, biopsy samples and high-level AD-TMs cases were more than those with high/moderate differentiation, surgical specimens and normal-level AD-TMs. Moreover, biopsy sample was a significant factor decreasing diagnostic accuracy of pathological subtype (OR, 4.037; 95% CI 1.446-11.267, p=0.008). Additionally, EGFR mutation rate was higher in patients with pathological diagnostic changes than those with confirmed SQCC (16.7% vs 4.4%, p=0.157). Conclusions: Diagnosis based on HE staining only might cause pathological misinterpretation in NSCLC patients with poor differentiation or high-level AD-TMs, especially those with biopsy samples. HE staining and IHC should be combined as pathological diagnostic standard. The occurrence of EGFR mutations in pulmonary SQCC might be overestimated.
인간 과립구 성장인자(hG-CSF)는 골수에서 생산되는 단백질로 호중구의 분화 및 생성을 촉진시키는 역할을 한다. 현재 재조합 hG-CSF는 암화학요법에 의한 호중구감소증, 골수이식시 호중구 감소증, 재생불량성 빈혈에 수반되는 호중구 감소증 등으로 적응증이 확대되고 있다. 본 연구에서는 OmpA signal sequence를 삽입하여 인간 과립구 성장인자(hG-CSF)가 분비발현되도록 고안된 T7 promoter 에 의하여 발현되는 pYRCl 발현백터를 제조하였다. E. coli BL2l (pYRCl) 발현시 $37^{\circ}C$에서 배양하는 경우 많은 양의 봉입체(aggregates)를 형성한다. 이에 비하여 $10\mu$M ucose를 포함하는 변형된 MBL배지에서 10 g/$\ell$IPTG를 유도물질로 7시간동안 $25^{\circ}C$에서 배양하였을 때 전체 periplasm단백질의 15%가 soluble rhG-CSF이었다. 또한, 유가식 배양방법을 사용하여 E. coli BL2l(pYRCl)에서 soluble rhG-CSF의 생산조건을 조사하였다. 유가식 배양에서 rhG-CSF의 발현량이 비증식속도를 $0.43 h^{-1}$ 에서 0.14 $h^{-1}$ 으로, 유도 배양시간을 최적화함으로써 rhG-CSF의 발현량이 4.4mg/$\ell$에서 24mg/$\ell$ 로 증가하였다.
Md. Samiul Haque;Mohammad Saiful Islam;Myung-Jo You
Parasites, Hosts and Diseases
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제61권4호
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pp.439-448
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2023
Tick infestation causes a significant threat to human and animal health, requiring effective immunological control methods. This study aimed to investigate the potential of recombinant Haemaphysalis longicornis enolase protein for tick vaccine development. The exact mechanism of the recently identified enolase protein from the H. longicornis Jeju strain remains poorly understood. Enolase plays a crucial role in glycolysis, the metabolic process that converts glucose into energy, and is essential for the motility, adhesion, invasion, growth, and differentiation of ticks. In this study, mice were immunized with recombinant enolase, and polyclonal antibodies were generated. Western blot analysis confirmed the specific recognition of enolase by the antiserum. The effects of immunization on tick feeding and attachment were assessed. Adult ticks attached to the recombinant enolase-immunized mice demonstrated longer attachment time, increased bloodsucking abilities, and lower engorgement weight than the controls. The nymphs and larvae had a reduced attachment rate and low engorgement rate compared to the controls. Mice immunized with recombinant enolase expressed in Escherichia coli displayed 90% efficacy in preventing tick infestation. The glycolytic nature of enolase and its involvement in crucial physiological processes makes it an attractive target for disrupting tick survival and disease transmission. Polyclonal antibodies recognize enolase and significantly reduce attachment rates, tick feeding, and engorgement. Our findings indicate that recombinant enolase may be a valuable vaccine candidate for H. longicornis infection in experimental murine model.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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